From the Panax ginseng chloroplast, the psbE and psbF genes, encoding the $\alpha$- and $\beta$-subunits of cytochrome b-559 of the photosystem II reaction center, respectively, were cloned and characterized. The psbE and psbF genes were composed of 252 and 117 nucleotides, respectively. The deduced amino acid sequence of the $\alpha$-subunits showed 95%, 93%, and 91% homology to monocots, dicots, and liverwort, respectively, whereas the $\beta$-subunits showed approximately 98% to 95% homology to the same species. Southern blot analysis revealed that a single copy of the psbEF gene exists in the chloroplast plastid. Northern blot analysis indicated that the psbE and psbF genes are cotranscribed as a polycistron.
Korean public service broadcasting(PSB) is facing identity crisis and debate on improving PSB governance. In order to analyze the causes of the crisis of PSB, We attempted to typify the constituent factors of governance of PSB based on the perception of public service broadcasting employees and media professionals. The results of the study are summarizes as follows. First, PSB' governance is typified by four factors such as market influence, political influence, professionalism, and guarantee of PSB system. Secondly, it is analyzed that only political influence among PSB governance factors has a significant effect on the perception of crisis of PSB. Thirdly, it is analyzed that the way of constituting the KBS board and the ratio of personnel have a meaningful influence on 'political influence'. The results of this study confirm that Korean PSB needs to improve the governance structure of PSB away from political influence in order to secure the legitimacy and identity.
The psbA gene of photo system II was cloned and characterized from the P. ginseng chloroplast. The psbA gene is composed of 1,062 nucleotides. The overall amino acid sequence shows 99% and 98% identities to dicots and monocots of higher plants, respectively. Southern blot analysis revealed that a single copy of the psbA gene existed in the chloroplast genome. Northern blot analysis of the in vivo accumulation of the psbA transcript, after being grown under the different intensities (5%, 10%, 20%, and 100%) of daylight, indicated that the steady-state level of the psbA transcript was not significantly affected by light intensity.
The psbC gene, encoding the intrinsic chlorophyll-binding protein of CP43, one of the PS core complex polypeptides, was cloned from the Panax ginseng chloroplast, which is composed of 1,422 nucleotides and the overall nucleotide sequence shows more than 84% identity to those of eukaryotic photosynthetic organisms. The predicted topology of CP43, based on hydropathy analysis, includes six membrane-spanning ${\alpha}-helices$ resulting in three lumenal and four stromal loops. The putative translation start codon for the psbC gene is located at 48 nucleotides upstream from the stop codon of the psbD gene whose product is also a component of the PSII reaction center, implying that the promoter of the psbC gene is possibly located in the middle of the structural gene of the psbD gene. Northern blot analysis of the in vivo accumulation of the psbC transcript from the plants grown under the various growth light intensities (5%, 10%, 20%, and 100%) of daylight indicated that the steady-state level of the psbC transcript was not significantly affected by light intensity.
Zygnema is a conjugating filamentous green algal genus that is distributed in a broad range of freshwater habitats, from sea level to alpine summits. Although more than 150 species have been described worldwide, their taxonomy remains unclear, probably owing to their relatively simple morphology. We investigated the detailed morphology of Korean Zygnema species, combined with analysis of the plastid psbA gene from 22 specimens of the genus and putative relatives, in order to develope a key to their identification and isolation, and to determine their relationships. We recognized two species of Zygnema; Z. insigne and Z. leiospermum, based on morphological characters such as width of the vegetative cell, position of zygospores, dimensions and form of spores, shape of female gametangia, and color of mesospores. The analysis of psbA data was consistent with morphological comparison. The pairwise divergence between two species was 3.7-4.1% (34-38 bp) in psbA sequences. The phylogeny of psbA revealed the monophyly of Z. insigne and Z. leiospermum together with two isolates of Z. circumcarinatum from Germany and Scotland. This is the first report on the psbA gene phylogeny of Zygnema.
This study was carried out to obtain basic information on breeding using PCR-aided RFLP technology which can identify the variation inter- and intra-species of ginseng in the level of DNA. It was intended to investigate banding pattern on psbA and rbeL genes of chloroplast DNA in ginseng after treating with restriction enzymes. To isolate psbA and rbcL genes of chloroplast, both psbA-N, psbA-C primer and rbcL-N, PX-1 primer were used. As a result, 1,008 bp band of psbA gene and 1,336 bp band of rbcL gene were appeared, which was optimal and expected molecular weight. In addition, primers to isolate atpB, rpoB, trnL, and trnF genes were used, resulting in the expected 1366, 900, 1500 and 1008 bp bands. Genes of psbA and rbcL isolated by PCR were cut by restriction enzymes, Sau3A, TaqI, AluI, HaeIII, and RFLP pattern was investigated. KG line and other species of ginseng were cut by TaqI treatment, and bands were located in 800 bp. The treatment treated by AluI also showed the same 800 bp band in KG line and other species. In HaeIII treatment, 500 bp of faint bands were shown in case of KG line, whereas any bands were not observed in other species. All chloroplast genes formed bands by PCR amplification. However, it was not evident to distinguish intra-or inter-species of ginseng after restriction enzyme treatment. Therefore, more restriction enzyme treatment or sequence comparison method should be considered for further experiment.
Photosynthetic bacteria (PSB) play an important role in water purification, and their application is beneficial for sustainable aquaculture. However, maintaining the microbial stability of PSB from subculturing to preservation is a challenging task. Since improvement in the microbial stability of PSB is a crucial parameter, optimized conditions for cell immobilization and lyophilization were investigated. In PSB immobilization, 0.1-M CaCl2 was found to be the most effective divalent metal ion solution in terms of cost-effectiveness, resulting in beads with a 4-mm diameter and high loading (1.91×109 CFU/mL) of viable cells. Maintenance of cell viability, external appearance, and color of PSB beads was best in 3.5% NaCl during storage. In lyophilization, the addition of skim milk (9%) and dextrose (2%) as cryoprotective additives allowed the highest cell viability. Over an 18-week shrimp breeding period, when optimally manufactured beads and lyophilized powder of PSB were applied to shrimp aquaculture water, NH4+, NO3-, and NO2- were more effectively removed by 55%, 100%, and 100%, respectively, compared to controls. Thus, microbial stability of PSB through optimized cell immobilization and lyophilization was successfully enhanced, enabling a wide application.
We measured shear viscosity of copoly(styrene(St)/butyl methacrylate(BMA)) (co-PSB) particles, with a capillary rheometer at $170^{\circ}C$, prepared by suspension polymerization with hydrophobic silica as a stabilizer. co-PSB particles with the weight average molecular weights of lower than 74,800 g/mol displayed a Newtonian behavior at low shear rates. With the weight average molecular weight exceeding 136,800 g/mol, co-PSB particles showed shear thinning against shear rates and the absolute value of the slopes between shear viscosity vs. shear rate increased. When the ratio between St and BMA changed from 7/3 to 5/5 to 3/7, shear viscosity and glass transition decreased despite similar molecular weights. When the ratio was 1/9, it showed a large increase in initial shear viscosity despite reduced glass transition. Shear viscosity exhibited an increase in proportion to carbon black concentration. The effect of carbon black concentration on the shear viscosity of co-PSB composites was less pronounced compared to varying molecular weights and/or compositional ratio.
Background: Pneumonia is a frequent complication in patients undergoing mechanical ventilation, Quantitative culture of protected specimen brush(PSB) have shown satisfactory diagnostic accuracy for the diagnosis of ventilator-associated pneumonia. However PSB method is invasive, expensive, and require a bronchoscopic procedure. But endotracheal aspiration(EA) is simple and less expensive. The purpose of our study was to investigate the diagnosic value of EA quantitative cultures. Method: We studied 15 cases of ventilator-associated pneumonia(for >72h of mechanical ventilation) patients. Patients were divided into two diagnostic categories. Group I was the patients who were suspicious of clinical pneumonia, Group II was the patients for control. The obtained samples by EA and PSB were homogenized for quantitative culture with a calibrated loop method in all patients. Result: Using $10^3cfu/ml$, $10^5cfu/ml$ as threshold in quantitative culture of PSB, EA respectively, we found that EA quantitative cultures represented a relatively sentive(70%) and relatively specific (60%) method to diagnose the ventilator-associated pneumonia. Conclusion: Although EA quantitative cultures are less specific than PSB for diagnosing ventilator-associated pneumonia. EA quantitative cultures correlated with PSB quantitative culture in patients with clinical pneumonia and may be used to treat these patients when bronchoscopic procedures are not available.
Photosynthesis uses light energy to drive the oxidation of water at an oxygen-evolving catalytic site within photosystem II (PSII). Chlorophyll binding by the photosystem II subunit S protein, PsbS, was found to be necessary for energy-dependent quenching (qE), the major energy-dependent component of non-photochemical quenching (NPQ) in Arabidopsis thaliana. It is proposed that PsbS acts as a trigger of the conformational change that leads to the establishment of nonphotochemical quenching. However, the exact structure and function of PsbS in PSII are still unknown. Here, we clone and express the recombinant PsbS gene from Arabidopsis thaliana in E. coli and purify the resulting homogeneous protein. We used various biochemical and biophysical techniques to elucidate PsbS structure and function, including circular dichroism (CD), fluorescence, and DSC. The protein shows optimal stability at $4^{\circ}C$ and pH 7.5. The CD spectra of PsbS show that the conformational changes of the protein were strongly dependent on pH conditions. The CD curve for PsbS at pH 10.5 curve had the deepest negative peak and the peak of PsbS at pH 4.5 was the least negative. The fluorescence emission spectrum of the purified PsbS protein was also measured, and the ${\lambda}_{max}$ was found to be at 328 nm. PsbS revealed some structural changes under varying temperature and oxygen gas condition.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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