Yu, Jing;Chen, Kui-Sheng;Li, Ya-Nan;Yang, Juan;Zhao, Lu
Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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v.13
no.8
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pp.4147-4151
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2012
The current study was conducted to explore the inhibitory effects of a small interfering RNA (siRNA) on 3-phosphoinositide-dependent protein kinase 1 (PDK1) expression in esophageal cancer 9706 (EC9706) cells and the influence on their biological behavior. After transfection of a synthesized PDK1 siRNA, PDK1 mRNA and protein expression and the phosphorylation level of the downstream Akt protein were assessed using RT-PCR and Western blot analysis. Proliferation, apoptosis, cell invasion and in vivo tumor formation capacity were also investigated using MTT, flow cytometry, Transwell invasion trials, and nude mouse tumor transplantion, respectively. PDK1 siRNA effectively suppressed PDK1 mRNA and protein expression, and down-regulated the phosphorylation level of the Akt protein in the EC9706 cells (P < 0.05). It also inhibited cell proliferation and invasion, and promoted apoptosis; such effects were particularly obvious at 48 h and 72 h after transfection (P < 0.05). Growth of transplanted tumors was inhibited in nude mice, with decreased PDK1 expression in tumor tissues. PDK1 may be closely correlated with proliferation, apoptosis and invasion of esophageal cancer cells and thus may serve as an effective target for gene therapy.
Kim, Young-Ho;Lee, Young-Ok;Nou, Ill-Sup;Shin, Ill-Yong;Kameya, Toshiaki;Saito, Takashi;Kang, Kown-Kyoo
Plant Resources
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v.1
no.1
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pp.1-5
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1998
Total iron content and ferritin distribution have been determined in red pepper(Capsicum annuum L.) during development stage under conditions of iron nutritional status from hydroponic culture. Color of the leaves become chlorotic on iron deficient and high concentration. The plant height on each iron concentration had retarding effect at concentration lower than $25\muM$ and greater than 125$25\muM$. In normal green leaves. Total iron content was almost constant with a mean value of $2.5\mumole$ of iron/mg of dry matter, except at 63day, for which it increases slightly to $4\mumole$. Howere, iron content of chlorotic plants grew on iron free medium was not almost detectable. Also in post chlorotic leaves(++Fe), iron content was evidently increase unitl 7days after transfer on liquid medium, but decreased from after 14days. Also, ferritin protein analysed total protein extracts prepared from leaves of different ages using antibodies raised against ferritin protein. Ferritin protein deereased progressively during the first week of germination and was not detectable in vegetative tissues. Ferritin protein in post chlorotic leaves wasevidently strongly cnhanced until 11days after transfer on liquid medium but decreased until the leves became chlorotic.
In order to screen the aging related proteins in human normal colon epithelia, the comparative proteomics analysis was applied to get the two-dimensional electrophoresis (2-DE) profiles with high resolution and reproducibility from normal colon epithelial tissues of young and aged people. Differential proteins between the colon epithelia of two age groups were found with PDQuest software. The thirty five differential protein-spots were identified by peptide mass fingerprint (PMF) based on matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry (MALDI-TOFMS) and database searching. Among them there are sixteen proteins which are significantly up-regulated in the colonic mucosal epithelia of young people group, which include ATP synthase beta chain, electron transfer flavoprotein alpha-subunit, catalase, glutathione peroxidase 1, annexin A2 and heat shock cognate 71 kDa protein, etc.; There are nineteen proteins which are significantly up-regulated in the colonic mucosal epithelia of aged people group, which include far upstream element-binding protein 1, nucleoside diphosphate kinase B, protein disulfide-isomerase precursor and VDAC-2, etc.. The identified differential proteins appear to be involved in metabolism, energy generation, chaperone, antioxidation, signal transduction, protein folding and apoptosis. The data will help to understand the molecular mechanisms of human colon epithelial aging.
In Oriental medicine, there has been a theory that the deficiency of the Qi(氣) and the Phlegm(濕)-Damp(痰) bring Obesity. And so a clinically representative herb-medicine of the obesity treatments is Chegameyiin-tang . We observed the effects of Chegameyiin-tang on the fat tissues and what the function of Chegameyiin-tang is. These experimental studies were designed to investigate the effects of Chegameyiin-tang on the weight and lipid metabolism of obesity rats induced by high fat diet. And what is changed in the blood and how the leptin and uncoupled protein is affected. The measurement has been performed on (1) the weight of obese rats fed high fat diet, (2) the average size and number of epididymal fat cells, (3) the total cholesterol, triglyceride, glucose. and free fatty acids in the blood. and (4) the leptin and uncoupled protein in the blood are observed. The results are as follows; 1. In the sample group, the weight decrease occured significantly throughout the whole research period than that of control group. 2. In the sample group, epididymal fat weight showed significantly decrease in the 8th and 14th weeks than that of control group.3. In the sample group, epididymal fat cell size was decreased significantly in the 8th and 14th weeks than that of control group. 4. In the sample group, total cholesterol. triglyceride and glucose increased rather than control group in 8 weeks, those decreased significantly in 14 weeks. 5. In the sample group, free fatty acids and insulin increased rather than control group in 8 weeks. those showed some decrease in 14 weeks . 6. In the sample group, leptin decreased significantly than control group in 8, 14 weeks. Uncoupled protein showed some decrease in 8 weeks. that decreased significantly in 14 weeks.
Bladder cancer is one of the most common types of cancer. Most gene mutations related to bladder cancer are dominantly acquired gene mutations and are not inherited. Previous comparative transcriptome analysis of urinary bladder cancer and control samples has revealed a set of genes that may play a role in tumor progression. Here we set out to investigate further the expression of two candidate genes, centromere protein U (CENPU) and mitochondrial ribosomal protein s28 (MRPS28) to better understand their role in bladder cancer pathogenesis. Our results confirmed that CENPU is up-regulated in human bladder cancer tissues at mRNA and protein levels. Gain-of-function and loss-of-function studies in T24 human urinary bladder cancer cell line revealed a hierarchical relationship between CENPU and MRPS28 in the regulation of cell viability, migration and invasion activity. CENPU expression was also up-regulated in in vivo nude mice xenograft model of bladder cancer and mice overexpressing CENPU had significantly higher tumor volume. In summary, our findings identify CENPU and MRPS28 in the molecular pathogenesis of bladder cancer and suggest that CENPU enhances the progression of bladder cancer by promoting MRPS28 expression.
Zinc finger (ZNF) proteins play a critical role in cell growth, proliferation, apoptosis, and intracellular signal transduction. In this paper, we cloned and characterized a novel human KRAB-related zinc finger gene, ZNF425, which encodes a protein of 752 amino acids. ZNF425 is strongly expressed in the three month old human embryos and then is almost undetectable in six month old embryos and in adult tissues. An EGFP-ZNF425 fusion protein can be found in both the nucleus and the cytoplasm. ZNF425 appears to act as a transcription repressor. Over-expression of ZNF425 inhibits the transcriptional activities of SRE, AP-1, and SRF. Deletion analysis indicates that the C2H2 domain is the main region responsible for the repression. Our results suggest that the ZNF425 gene is a new transcriptional inhibitor that functions in the MAPK signaling pathway.
Recent evidence haas indicated that meningioma-associate protein (MAC30) exhibits different expression patterns in various tumors. However, little is known about the value of MAC30 in human squamous cell carcinoma of lung (SQCLC). The purpose of our study was to investigate the expression of MAC30 and to explore its clinical significance in SQCLC patients. A total of 156 Chinese patients diagnosed with SQCLC were selected for this study. The expression of MAC30 in all tissues was confirmed by immunohistochemical staining. Quantitative real-time PCR was performed to analyze MAC30 mRNA expression in 32 cases of SQCLC patients with corresponding non-tumor lung tissues. We observed enhanced mRNA expression of MAC30 in SQCLC as compared to control samples. Further, elevated MAC30 protein expression was strongly associated with poor tumor differentiation, TNM stage, and lymph node metastasis. In addition, we observed that patients with increased MAC30 expression demonstrated poor overall survival. Multivariate analysis explicated that increased MAC30 expression was a valuable independent predictable factor for poor tumor differentiation and short survival in SQCLC patients. Our present study suggests that MAC30 may serve as a biomarker for poor tumor differentiation and outcomes of patients with SQCLC.
Present study aims to investigate the effect of muddy water on various tissues and plasma proteins of Hemiculter eigenmanni in Imha reservoir. The gills in muddy water were shown to have clubbing in secondary lamellae and edema in primary lamellae, respectively. The size of glomerula in kidney was smaller than that of control. Scanning electron micrographs of gills revealed muddy debris and parasites attached between primary and secondary lamellae, suggesting that muddy water possibly involves to decrease in respiratory rate. By using SDS-PAGE, plasma protein bands displayed both quantitative and qualitative changes and ferritin activities were shown more stronger and Fe-3 ferritin band appeared to be specific to plasma of muddy water.
Among the known interferon-induced antiviral mechanisms, the Mx pathway is one of the most powerful pathways. The Mx protein has direct antiviral activity and inhibits a wide range of viruses by blocking an early stage of the viral replication cycle. Cloning, characterization, and expression of Mx in vivo and in vitro have been conducted. The chicken Mx gene spans 21 kb and is made up of 14 exons and 13 introns, of which the promoter region was analyzed. The real-time PCR results showed that Mx expression was increased in chicken embryo fibroblasts (CEF) after 12- and 24-h induction with polyI: C. Induction of Mx expression by poly I: C in vivo revealed tissue-specific patterns among the chicken tissues tested. A trace expression of Mx was detected in healthy chicken liver tissues from adult chickens without inducement; the expression levels in the liver, heart, and gizzard were higher than in the muscle and kidney. This is the first report to demonstrate the expression of a glutathione-S-transferase-tagged-Mx fusion protein of 75 KDa, as well as the biological activity tested by SDS-PAGE and western blotting.
It has been reported that ubiquitin-conjugating enzyme 9 (Ubc9), the unique enzyme2 in the sumoylation pathway, is up-regulated in many cancers. However, the expression and regulation of UBC9 in glioma remains unknown. In this study, we found that Ubc9 was up-regulated in glioma tissues and cell lines compared to a normal control. UBC9 knockdown by small interfering RNA (siRNA) affected cell proliferation and apoptosis in T98G cells. Further experiments revealed that microRNA (miR)-214 directly targeted the 3' untranslated region (UTR) of UBC9 and that there was an inverse relationship between the expression levels of miR-214 and UBC9 protein in glioma tissues and cells. miR-214 overexpression suppressed the endogenous UBC9 protein and affected T98G cell proliferation. These findings suggest that miR-214 reduction facilitates UBC9 expression and is involved in the regulation of glioma cell proliferation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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