Soybean (Glycine max (L.) Merr.) seed is the main source of protein and oil for human and animal. The use of soybean protein has been expanded in the food industry due to their excellent nutritional benefits. But, antinutritional and allergenic factors are exist in the raw mature soybean. Lipoxygenase, Kunitz trypsin inhibitor (KTI) protein, and ${\alpha}^{\prime}-subunit$ of 7S globulin are main antinutritional factors in soybean seed. Breeding of a new soybean strain with lacking these components is needed. The objective of this research was to select new soybean line with lipoxygenase-free, KTI-free, and ${\alpha}^{\prime}-subunit$ free (lx1lx1lx2lx2lx3lx3titicgy1cgy1 genotype). Total 434 $F_2$seeds were obtained from the cross of cultivar, "Gaechuck#2" and PI506876. Presence and absence of lipoxygenase, KTI protein, and ${\alpha}^{\prime}-subunit$ of 7S globulin was tested by SDS electrophoresis using a partial seed of each $F_2$seed. Only one $F_2$seed with lacking these three components was selected and was planted to $F_2$plant. Absence of lipoxygenase, KTI, and ${\alpha}^{\prime}-subunit$ protein was confirmed on the $F_3$seeds harvested. Selected line with lx1lx1lx2lx2lx3lx3titicgy1cgy1 genotype might be useful for soybean breeding.
This experiment was carried out to compare the change of muscle protein compositions, amino acid compositions of muscle protein, and free amino acid compositions by age of the Israeli strain of common carp, Cyprinus carpio nudus. Protein compositions of the muscle were: sarcoplasmic protein $25.8-27.2\%$, myofibrillar protein $62.3-56.2\%$, residual intracellular protein $9.6-13.2\%$ and stroma $2.3-2.9\%$. In between 1 year and 3 years, there were differences as follows; myofibrillar protein in 1 year was much than 3 years, and other proteins in 3 years were much than 1 year. By SDS-polyacrylamide gel electrophoresis, sarcoplasmic protein of the samples in 1 year an 3 years were composed of 11 subunits and 10 subunits, respectively. And appeared 210,000 dalton component in 1 year but did not appeared in 3 years. Myofibrillar protein was composed of 23 subunits in both 1 year and 3 years but the differences of subunits by age were not observed. No differences were observed by age in the composition of myofibrillar protein and residual intracellular protein. Amino acid composition of muscle protein in both 1 year and 3 years were no differences to each other, but the contents of glutamic acid, aspartic acid, lysine were higher than other amino acids. The amount of total free amino acid in 1 year was much than in 3 years.
A mutant tryptophan synthase $\alpha$-subunit, where Pro28 was replaced with Leu, tends to be expressed in recombinant E. coli. CD and fluorescence spectra of this protein indicate some changes in secondary and tertiary structure. Wild type protein was more or less affected by {TEX}$Ca^{2+}${/TEX} ion in regards of the fluorescent properties of its native, unfolded and intermediate forms, but the mutant protein was not at all. The dramatic structural changes may be related to the aggregation of this mutant protein.
Journal of The Korean Society of Grassland and Forage Science
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v.22
no.1
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pp.51-58
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2002
PSI-H is an intrinsic membrane protein known to be essential for efficient electron flow in PSI complex. We isolated a cDNA clone encoding a PSI-H subunit homolog from Chinese cabbage (Brassica campestris L.). The cDNA, designated bpsaH, had an insert of 435 bp and a full open reading frame that would encode a protein of 145 amino acids. The amino acid sequence deduced from the cDNA sequence is 79.3% identical to that of spinach, suggesting the cDNA most likely encodes Chinese cabbage PSI-H subunit. The bpasH was expressed at high level in leaf tissue and low level in flower bud, whereas it was undetectable in root tissue.
The comparison soy protein coagulation by heat-and enzyme-treatment are summarized. The gelation mechanism of glycinin by heating was mainly due to dissociation and aggregation of the basic subunit of 11S globulin. In case of 7S globulin, macro-soluble aggregates may be formed by noncovalent intraction more than 30min at 8$0^{\circ}C$. Whereas, coagulum occured by the microbial enzyme was more minuter than the other Ca-, HCI-coagulum. Heat treatment attacked the basic subunit of 11S globulin and this results agreed very, how-ever, preferred acidic subunit to basic subunit of 11S globulin and attacked the 7S globulin, that could produce coagulum products within 4~5min at $65^{\circ}C$.
Soybean [Glycine max (L.) Merr.] seed is an important dietary source of protein, oil, carbohydrate, isoflavone and other various nutrients for humans and animals. However, there are anti-nutritional factors in the raw mature soybeans. Kunitz trypsin inhibitor (KTI) protein and stachyose are the main anti-nutritional factors in soybean seed. The ${\alpha}^{\prime}$-subunit of ${\beta}$-conglycinin protein exhibit poor nutritional and food processing properties. The genetic removal of the KTI and ${\alpha}^{\prime}$-subunit proteins will improve the nutritional value of the soybean seed. The objective of this research was to develop a new soybean strain with KTI and ${\alpha}^{\prime}$-subunit protein free ($titicgy_1cgy_1$ genotype) and proper agronomic traits. A breeding population was developed from the cross of the Bl-1 and 15G1 parents. A total of 168 $F_2$ seeds from the cross of the BL-1 and 15G1 parents were obtained. The segregation ratios of 9: 3: 3: 1 ($104Ti\_Cgy_{1\_}:\;30Ti\_cgy_1cgy_1:\;21cgy_1cgy_1Ti\_:\;13titicgy_1cgy_1$) between the Ti and $Cgy_1$ genes in the $F_2$ seeds were observed (${\chi}^2=5.12$, P=0.5-0.10). Two $F_4$ plant strains with proper agronomical traits and $titicgy_1cgy_1$ genotype (free of both KTI and ${\alpha}^{\prime}$-subunit protein) were selected and harvested. 2 strains (S1 and S2) had yellow seed coats and hilum. The plant height of the S1 strain was 65 centimeters. The 100-seed weight was 29.2 g. The plant height of the S2 strain was 66 centimeters and 100-seed weight was 26.2 g. The two strains selected in this research will be used to improve the new cultivar that will be free of the KTI and ${\alpha}^{\prime}$-subunit proteins.
Using differential hybridization, a cDNA clone was isolated fortuitously from Amaranthus viridis and sequenced. This nucleotide sequence exhibited 55.1% identity with vma6 which encodes the 36-kD subunit of the vacuolar proton transporting ATPase in Saccharmoyces cerevisiae. The predicted open reading frame encodes a protein of 221 amino acid sequence with a calculated molecular weight of 25,452 and reveals high levels of similarity with subunit D polypeptide of vacuolar H -ATP(e.g., 48.5, 52.1 and 49.3% identity to the vacuolar 36-kD chain of yeast, vacuolar 32-kD polypeptide IV of human and vacuolar 28-kD protein of bovine chromaffin granules, respectively). The hydropathy index computation revealed that this predicted protein is a peripheral protein. These results indicated that the predicted protein may play a sturctural role in the vaculor H -ATPase as does gamma subunit in V-type ATPase.
The effect of cations on the formation of protein aggregates was examined by in vitro refolding of mutant tryptophan synthase $\alpha$-subunit in which Pro 24 was replaced by Leu. $NH^{4+},; K{^+}; and; Na^{+}$ and no effect, but $Mg^{2+}; and; Ca^{2+}$stimulated the formation of protein aggregates in dose-dependent manner. It is suggested that $Mg^{2+} and Ca^{2+}$ may be implicated in the formation of protein aggregates in vivo.
Protein kinase CKII (CKII) is a protein Ser/Thr kinase that is ubiquitously distributed in eukaryotic cells. Although it has been suggested that CKII plays an critical role in cell growth and proliferation, its functional significance and regulation in the cells remain poorly understood. To investigate the exact biological function of CKII, we have identified proteins that interact with the subunits of CKII using the twohybrid system. In this report, we have identified cathepsin L, a lysosomal protease, as a cellular protein capable of interacting with the ${\beta}$ subunit of CKII. Cathepsin L does not interact with the ${\alpha}$ subunit of CKII, supporting the idea that the ${\beta}$ subunit can mediate the interaction of CKII with target proteins. We have found that cathepsin L has several putative CKII phosphorylation sites including Thr-84, Ser-160, Ser-270, Thr-288, and Ser-301. These data suggest that CKII is a possible protein kinase for cathepsin L phosphorylation.
The objective of this study was to investigate the fundamental characteristics of proteins effecting on Korean wheat flour quality. Mixing properties and protein contents of Eunpa, Allgreu, and Woori showed soft wheat characteristics. Tapdong had strong dough stability and high protein content like hard wheat flour. However, even though Greu had a high protein content, the dough strength was very weak like soft wheat flour. No major difference was observed in protein solubility with water, 0.1N NaCl, 70% ethyl alcohol, 0.1 N acetic acid solution and in sulfur and disulfide contents between Korean wheat flours and imported flours. However, DNS (Dark Norther Spring) had more contents of acid insoluble and SDS insoluble proteins compared with Korean wheat varieties. PAGE pattern of Tapdong was very similar to imported wheat flours at the high molecular weight regions and characteristic high molecular weight glutenin subunits were observed over 116 kD protein molecular weight region from 4 Korean wheat flours such as Eunpa, Woori, Allgreu, and Greu.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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