Optimum reaction conditions for gel formation of rapeseed, Brassica napus, protein catalyzed by microbial TGase(transglutaminase) were evaluated by measuring breaking strength and deformation of gel. The polymerization of the protein gel was ascertained by SDS-PAGE and content of GL crosslinking$[{\varepsilon}-({\gamma}-glutamyl)lysine]$. In the reaction between rapeseed protein and TGase at $45^{\circ}C$ for 60 min, the breaking strength and deformation of the gel was the maximum at the ratio of 1 : 40 of enzyme to substrate. 10%(w/v) of rapeseed protein concentrate was optimum for gel production. The maximum breaking strength and deformation was shown at $45^{\circ}C$ The breaking strength increased linearly up to 90 min of the reaction time and remained unchanged. The breaking strength and deformation by TGase treatment was pH dependent and pH 7 was optimum for 10% rapeseed protein solution. SDS-PAGE analysis indicated that new band of highmolecular polymers were formed by the enzyme reaction, with disappearing the original bands of rapeseed protein. According to HPLC analysis. the content of GL crosslinking was increased from 0 to $7.14\;{\mu}mol/g$ gel for 90 min of the reaction time.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.6
no.2
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pp.151-155
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2003
Using gel filtration chromatography, high molecular silk fibroin with high purity was obtained and silk flbroin microsphere particles (SFMP) could be simply made by spray dryer method. Also, some of the physicochemical properties of SFMP and morphology were investigated. The average molecular weight of pure silk fibroin protein dissolved in calcium chloride is about 61,500g/㏖ as measured by gel permeation chromatography. SFMP was spherical in shape, and particles, sized average of 2 ${\pm}$ 10 ${\mu}$, were observed by SEM and particle analyzer, respectively. Obtaining microspheres particles by spray dryer method accelerated the transition from the random coil to the $\beta$-sheet structure during spray dryer treatment. It was identified by the basic fourier transform infrared spectroscopy of SFMP. The swelling ratio of SFMP is majorly dependent on the pH of the solution, not on the occurred gelation. The characteristic structure, which might be applicable to immobilization of drugs is superior to other matrix materials for the use of biomaterials with skin affinity.
An $\alpha$-D-galactosidase ($\alpha$-D-galactoside galactohydrolase, EC 3. 2. 1. 22) from earthworm was purified by affinity chromatography using N-$\varepsilon$-aminocaproyl-$\alpha$-D-galactopyranosylamine coupled to sepharose and its properties were examined. The specific activity of the purified enzyme, tested with p-nitrophenyl-$\alpha$-D-galactopyranoside as substrate, was 314 units/mg protein, representing an 122-fold purification of the original crude extract. The final preparation obtained from by Sephadex G-25 chromatography showed a single band on SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. The molecular weight was determined to be 48,000 by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. The purified galactosidase was showed maximum activity at pH 4.5 and 4$0^{\circ}C$, and was stable in the pH and temperature ranges from 4.0 to 5.5 and 30 to 5$0^{\circ}C$, respectively. The enzyme activity was inhibited by Zn2+, Hg2+ and Co2+. When the purified $\alpha$-galactosidase treated to guar gum for 6 hour, gel-promoting property was increased. It was clear that enzymatic elimination of galactose from guar gum by purified $\alpha$-galactosidase would lead to a significant increase in gelation ability.
The main goal of periodontal regeneration is to be achieved by epithelial exclusion, periodontal ligament cell activation or alveolar bone regeneration. The purpose of this study was to investigate on the physico- chemical and biological characteristics of biodegradable chitosan beads. Chitosan beads were fabricated by ionic gelation with sodium tripolyphosphate and they had the size in 300um diameter. As therapeutic agent, flurbiprofen was incorporated into the beads by 10, 20% loading contents. The release of drugs from the chitosan beads was measured in vitro. Also, biological activity tests of flurbiprofen loaded chitosan beads including cytotoxicity test, ihhibition of $IL-1{\beta}$ production, suppression to $PGE_2$ production, collagenase inhibition test, the ability of total protein synthesis, and tissue response were evaluated. The amount of flurbiprofen released from chitosan was 33-50% during 7 days. Minimal cytotoxicity was observed in chitosan beads. Flurbiprofen released from chitosan beads significantly suppressed the $IL-1{\beta}$ production of monocyte, $PGE_2$ production and markedly inhibited collagenase activity. Meanwhile, flurbiprofen released from this system showed increased ability for protein synthesis. Throughout 4 -week implantation period, no significant inflammatory cell infiltrated around chitosan bead and also fibroblast like cell types at the beads - tissue interface were revealed with gradual degradation of implanted chitosan beads. From these results, it was suggested that flurbiprofen loaded chitosan beads can be effectively useful for biocompatible local delivery system in periodontal regeneration.
In order to investigate the rheological properties of myofibrillar protein (MP) mixed with tapioca starch (TS; 0, 1, and 2%) at various salt concentrations (0.1, 0.3, and 0.45 M), viscosity, gel strength, differential scanning calorimeter (DSC) and sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) were measured. Viscosity of MP increased with increasing salt concentrations (p<0.05), but not with the addition of TS. The addition of TS improved gel strength and cooking yield at all salt concentrations (p<0.05). DSC results demonstrated that the starting peak of TS gelation was observed at $55^{\circ}C$, however, no differences in peak were observed with various salt and TS levels (p>0.05). SDS-PAGE profile also showed no differences in protein bands for pork myofibrillar protein with various salt and TS levels. Based on the model study, pork model sausages with various levels of tapioca (0, 1, and 2%) and TG (1%) were manufactured. The pork model sausages with 2% TS increased pH and water holding capacity (p<0.05), while those with TGase (1%) increased most textural properties, regardless of the addition of TS. Thus, the combination of 1% TG with 2% TS improved the gel strength and water holding capacity in the meat products.
Ha, Ho-Kyung;Kim, Jin Wook;Han, Kyoung-Sik;Yun, Sung Seob;Lee, Mee-Ryung;Lee, Won-Jae
Journal of Dairy Science and Biotechnology
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v.35
no.3
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pp.208-214
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2017
The aims of this study were to manufacture a hydrolyzed goat milk protein (HGMP)/chitosan ologisaccharide (CSO) nano-delivery system (NDS) and to investigate the effects of production variables, such as sodium tripolyphosphate (TPP), HGMP, and CSO concentration levels, on the formation and physicochemical properties of the NDS. An HGMP/CSO NDS was produced using the ionic gelation method at pH 5.5. Transmission electron microscopy and a particle size analyzer were used to determine the morphological and physicochemical properties of NDSs, respectively. The size of the HGMP/CSO NDS decreased from 225 to 138 nm as HGMP and CSO concentration levels decreased. The NDS had a positive surface charge, with a zeta-potential value of +23 mV. The encapsulation efficiency (EE) of docosahexaenoic acid was enhanced as the HGMP concentration level increased. Additionally, increasing the concentration level of CSO resulted in an increase in the EE of resveratrol. The HGMP/CSO NDS exhibited good physical stability during freeze-drying. Thus, our findings showed that the HGMP/CSO NDS was successfully manufactured and that HGMP and CSO concentration levels were key factors affecting the physicochemical properties of the NDS.
Pengfei Xue;Juan Zheng;Rongrong Li;Lili Yan;Zhaohao Wang;Qingbin Jia;Lianqun Zhang;Xin Li
Journal of Korean Neurosurgical Society
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v.67
no.3
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pp.364-375
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2024
Objective : Kinesin family member C1 (KIFC1), a non-essential kinesin-like motor protein, has been found to serve a crucial role in supernumerary centrosome clustering and the progression of several human cancer types. However, the role of KIFC1 in glioma has been rarely reported. Thus, the present study aimed to investigate the role of KIFC1 in glioma progression. Methods : Online bioinformatics analysis was performed to determine the association between KIFC1 expression and clinical outcomes in glioma. Immunohistochemical staining was conducted to analyze the expression levels of KIFC1 in glioma and normal brain tissues. Furthermore, KIFC1 expression was knocked in the glioma cell lines, U251 and U87MG, and the functional roles of KIFC1 in cell proliferation, invasion and migration were analyzed using cell multiplication, wound healing and Transwell invasion assays, respectively. The autophagic flux and expression levels matrix metalloproteinase-2 (MMP2) were also determined using imaging flow cytometry, western blotting and a gelation zymography assay. Results : The results revealed that KIFC1 expression levels were significantly upregulated in glioma tissues compared with normal brain tissues, and the expression levels were positively associated with tumor grade. Patients with glioma with low KIFC1 expression levels had a more favorable prognosis compared with patients with high KIFC1 expression levels. In vitro, KIFC1 knockdown not only inhibited the proliferation, migration and invasion of glioma cells, but also increased the autophagic flux and downregulated the expression levels of MMP2. Conclusion : Upregulation of KIFC1 expression may promote glioma progression and KIFC1 may serve as a potential prognostic biomarker and possible therapeutic target for glioma.
This study was conducted to investigate the mechanism involved with gelation of soybean proteins, 7S and 11S. For the preparations of soybean gels, calsium coagulation and isoelectric point precipitation through the lactic acid fermentation were employed. The textural properties and microstructure of soybean curds were examined by Instron Universal Testing Machine and Scanning Electron Microscope(SEM), respectively. Soybean cheeses were also prepared from soyprotein curds. The characteristics of prepared soybean cheeses were studied by Instron and Sensory evaluation. Microstructure of soybean curds demonstrated by SEM differed markely, postulating that molecular interaction occured in the curds varied with type of protein and coagulative conditions. Textural parameter measured by Instron demonstrated that the curds and the cheeses made through lactic acid fermentation showed higher values in hardness, gumminess and chewiness than those coagulated with $CaCl_2$ 11S PRF could give the curds with higher values in hardness, cohesiveness, springiness, gumminess and chewiness than SPI and 7S PRF Sensory evaluation results showed that soybean cheese made from 11S PRF scored higher values in taste, chewiness, and hardness. However, panels preferred soybean cheese prepared from SPI in color, chewiness and brittleness.
The sol to gel transition of aqueous solution of block copolymers consisting of methoxy poly (ethylene glycol) (MPEG) and biodegradable polyesters such as $\varepsilon$-caprolactone and L-lactide was investigated as a function of temperature. MPEG-PCL was prepared by ring opening polymerization of $\varepsilon$-caprolactone in the presence of HClㆍEt$_2$O as monomer activator at room temperature. Also, MPEG-PLLA was prepared by ring opening polymerization of L-lactide in the presence of stannous octoate at 115$^{\circ}C$. The properties of block copolymers were investigated by $^1$H-NMR, IR, and GPC as well as the observation of thermo sensitive phase transition in aqueous solution. As the hydrophobic block length increased, the sol to gel transition temperature increased and curve of that steepen to lower concentration. To confirm the gel formation at body temperature, we observed the formation of gel in the mice body after injection of 20 wt% aqueous solution of each block copolymer. After surging, we investigated the gelation in mice. The results obtained in this study confirmed the feasibility as biomaterials of injectable implantation for controlled release of drug and protein delivery.
LEE Eung-Ho;KIM Se-Kwon;CHO Duck-Jae;KIM Jin-Dong;no Sudibjo;KIM Soo-Hyun
Korean Journal of Fisheries and Aquatic Sciences
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v.11
no.4
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pp.189-195
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1978
Using the skins of conger eel, Astroconger myriaster, and hagfish, Eptatretus burzeri, from fillet manufactory, the optimum conditions of skin glue processing were investigated and physical ana chemical properties of the product were also determined. The yields of conger eel and hagfish skin to the total body weight were $10.6\%$ and $11.4\%$, respectively. The optimum processing conditions for conger eel skin glue were the extraction of skins which were previously tinted with $0.3\%$ calcium hydroxide solution for one hour, in water at pH 5.5 and $60^{\circ}C$ for four hours. The additional water was six times sample weight. In case of the hagfish skin glue, the liming time with $0.3\%$ calcium hydroxide solution was suitable for three hours, and the skins were extracted with water as much as nine times sample weight at pH 5.0 and $60^{\circ}C$ for three hours. The contents of crude protein of conger eel and hagfish skin glue were $91.5\%$ and $90.2\%$, respectively. The content of crude lipid was slightly higher than that of chemical grade gelatin. Relative viscosity, melting point, gelation temperature and jelly strength of conger eel skin glue were 13.6, $15.2^{\circ}C$, $6.2^{\circ}C$ and 13.0g respectively and those of hagfish skin glue were 12.9, $14.8^{\circ}C$, $4.3^{\circ}C$ and 23.3g respectively. The turbidity of conger eel skin glue and hagfish skin glue were slightly superior to those of dry glue.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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