Mutational experiments were performed to improved to improve the protease productivity of Aspergillus flavus KU 153, which is selected among the wild strains. A UV-induced mutant strain having high protease productivity was obtained by the use of the clear zone method as a simple criterion for a primary screening test. Neutral and alkaline protease activities of hte mutant strain were higher than 1.8 times, comopared with those of the parental strain, respectively, while in the case of acid protease, it was 2.7 times. The mutant strain selected was more powerful in the production of cellulase and amylase, as well s protease in wheat bran, compared with those of the parental strain. protease production of the parental strain has reached maximum level at 3 days culture, while alkaline nad neutral protease production of the mutantstrain has reached at 2 days culture. On the other hand, the mutant strain formed the spore slowly, compared with the parental strain. Column chromatography of the neutral protease on DEAE-Sephadex A-50 showed that the mutant strain was not induced the formation of another neutral protease isozyme, but induced the variation in the function of regulatory gene.
Hong, Seong Chul;Her, Kyu-Hee;Kim, Heung-Up;Lee, Jaechun;Lee, Sang Pyo;Chung, Young-Bae
Parasites, Hosts and Diseases
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v.52
no.1
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pp.117-120
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2014
Several studies have reported that the citrus red mites Panonychus citri were an important allergen of citrus-cultivating farmers in Jeju Island. The aim of the present study was to purify and assess properties of a cysteine protease from the mites acting as a potentially pathogenic factor to citrus-cultivating farmers. A cysteine protease was purified using column chromatography of Mono Q anion exchanger and Superdex 200 HR gel filtration. It was estimated to be 46 kDa by gel filtration column chromatography and consisted of 2 polypeptides, at least. Cysteine protease inhibitors, such as trans poxy-succinyl-L-leucyl-amido (4-guanidino) butane (E-64) and iodoacetic acid (IAA) totally inhibited the enzyme activities, whereas serine or metalloprotease inhibitors did not affect the activities. In addition, the purified enzyme degraded human IgG, collagen, and fibronectin, but not egg albumin. From these results, the cysteine protease of the mites might be involved in the pathogenesis such as tissue destruction and penetration instead of nutrient digestion.
Alpha-amylase and glucoamylase activities were higher in koji with 40% water than that with 30 and 50% water, and A. oryzae exhibited very high alpha-amylase and glucoamylase activities compared to A. sojae and A. niger. Acidic, neutral and alkaline protease activities also showed higher activities in koji prepared with flour, Korean wheat powder and soybean powder with 40% water based on the weight of the sample. Alpha-amylase, acidic, neutral and alkaline protease activities of all the koji samples according to incubation periods increased until 3~4 days of incubation and maintained nearly the same level or slightly decreased after 5 days of incubation. The protease activities of A. oryzae and A. sojae showed nearly the same trend regardless of differences in substrate conditions and koji materials, but those of A. niger showed a lower activity than those of A. oryzae and A. sojae. These results suggest that the preparation of koji is possible with Korean wheat powder and soybean powder and A. sojae can be utilized as a new strain for fermented foods using soybean as the main materials to increase functional properties and produce products having a new taste and flavor.
Bowman-Birk type protease inhibitors of soybeans were purified with gel filtration on Sephadex G-75. Significant differences were found in the content and in the electrophoretic patterns of the purified protease inhibitors. Ten among fourteen electrophoretic bands appeared as protease inhibitors. The chymotrypsin and trypsin inhibiting activities in soybeans showed three and four fold variation respectively. And the cultivars with higher chymotrypsin inhibiting activities seemed to have higher cysteine contents.
This study was carried out to investigate the changes of enzymes and micro inorganic nutrients that is associated with flower senescence during flower development in tulip cultivars, ‘Apeldoorn’ and ‘Golden Apeldoorn’. Ribonuclease, peroxidase and protease activities were gradually increased from the stage of early flowering to later Polyphenol oxidase showed the highest activity at stage 5, which the flower was in full bloom indicating that it acts at an initial stage of flower senescence. The protease activity was different in the petal extracts during flower development between the cultivars ‘Apeldoorn’ (red petal) and ‘Golden Apeldoorn’ (yellow petal). This result suggested that protease might relate to pigment biosynthesis in petal of tulip. In contrast to the decrease of inorganic nutrients K, Mn, Zn and P contents during floral development, Ca, Mg and Fe showed the gradual increasement that is similar with ribonuclease, peroxidase and protease. It suggests that they have some interaction during flower senescence.
Objectives: We investigated the antioxidant and antibacterial activities of Pinus densiflora ethanol extracts (PDEE) treated with trypsine as a protease. Methods: Various antioxidant activities were evaluated by measuring total contents of polyphenol and flavonoid, DPPH electron-donating ability and $ABTS^+$ radical scavenging activity of test material. To compare the antibacterial activity, paper disc diffusion assay was performed against two resident bacteria in human skin (Staphylococcus aureus and Staphylococcus epidermidis). Results: As for the total contents of polyphenol and flavonoid, and the electron-donating ability and ABTS+ radical scavenging activity, both PDEE and trypsin-treated Pinus densiflora ethanol extract (T-PDEE) showed high antioxidant activity in dose-dependent manner. And the T-PDEE showed slightly higher activity than PDEE, which indicated protease treatment seemed to affect in antioxidant activity. In the result of paper disc diffusion assay, antibacterial activity was confirmed in all two types of skin resident bacteria. T-PDEE was more active than PDEE and it seems that treatment of protease may increase the antibacterial activity of PDEE. Conclusion: All of these results, we confirmed that treatment of protease to PDEE can increase the antioxidant and antibacterial activities, and it can be explained thought that this would be applicable as a cosmeceutical material in the future.
Allergen extracts from dust mites and cockroaches commonly found in Korean homes were used to evaluate their enzymatic activity as they are believed to influence allergenicity. Allergen extracts were prepared from 3 dust mite species (Dermatophagoides farinae, D. pteronyssinus, and Tyrophagus putrescentiae) and 3 cockroach species (Blattella germanica, Periplaneta americana, and P. fuliginosa) maintained in the Korea National Arthropods of Medical Importance Resource Bank. Proteins were extracted in PBS after homogenization using liquid nitrogen. The activities of various enzymes were investigated using the API Zym system. No significant difference in phosphatase, lipase, or glycosidase activity was observed among the 6 allergen extracts, but much difference was observed in protease activity. Protease activity was assessed in more detail by gelatin zymography and the EnzChek assay. Extract from T. putrescentiae showed the highest protease activity, followed by those of the cockroach extracts. Extracts from D. farinae and D. pteronyssinus showed only weak protease activity. Gelatinolytic activity was detected mainly in a 30-kDa protein in D. farinae, a 28-kDa protein in D. pteronyssinus, a > 26-kDa protein in T. putrescentiae, a > 20-kDa protein in B. germanica, and a > 23-kDa protein in P. americana and P. fuliginosa. The information on various enzymatic activities obtained in this study may be useful for future studies. In particular, the strong protease activity found in cockroach extracts could contribute to sensitization to cockroach allergens, which is known to be associated with the development of asthma.
Alkalophilic bacteria isolated from compost were selected, identified and tested for production of alkaline protease. The bacterium was tentatively assigned to Bacillus sp. based on the morphological, cultural and biochemical characteristics. The optimum pH of growth was 10 Galactose and Sodium glutamate enhanced the production of alkaline protease. The protease was most active at pH 11.0 and $60^{\circ}C$ and stable in the range of pH 5-11 and temp. $30^{\circ}-55^{\circ}C$. The protease was stabilized by the presence of calcium salts.
The activities of s-amylase, ${\alpha}-amylase$ and protease of three combination products containing digestive enzymes, antacids and herbal drugs on the Korean market were estimated. The effects of antacids and herbal drugs on the activities of digestive enzymes were investigated. Starch-saccarifying activity of s-amylase, starch-dextrinizing activity of ${\alpha}-amylase$ and protein-peptic activity of protease were estimated by Somogy, Mc'Credy, and Casein-Folin method, respectivley. The optimal pH of s-amylase, ${\alpha}-amylase$ and protease were pH 5.0, 4.8 and 7.0, rcspectively. The digestive activities at optimal pH continued about eight hours. The digestive activities of individual enzymes were reduced to 40-90% by antacids and were affected somewhat positively or negatively by herbal drugs. Enzyme activities of the combination products were also affected by pH and reaction time.
This study was carried out to investigate the changes in microflora, enzyme activity and sensory quality of four kinds of cheonggukjang during fermentation. Three different kinds of cheonggukjang were prepared with germinated soybeans using rice straw, Bacillus natto, B. natto plus Aspergillus oryzae, and the last one was prepared with non-germinated soybeans using rice straw. The pH values of cheonggukjang prepared with germinated or non-germinated soybeans increased up to 36 hr of fermentation and then decreased. The number of bacteria and molds increased significantly up to 24 hr of fermentation and then leveled off during fermentation. Acidic and neutral protease activities of all cheonggukjang continuously increased significantly during fermentation. ${\alpha}$- and ${\beta}$-Amylase activities of cheonggukjang decreased slightly during fermentation except cheonggukjang prepared with germinated soybeans using the mixed culture. The number of microflora, protease and ${\alpha}$-amylase activities were highest in cheonggukjang prepared with germinated soybeans using B. natto plus A. oryzae. The results of the sensory evaluation revealed that for overall acceptability, the cheonggukjang prepared with germinated soybeans using B. natto plus A. oryzae was similar to the cheonggukjang prepared with non-germinated soybeans using rice straw.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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