Pyrococcus furiosus α-amylase can hydrolyze α-1,4 linkages in starch and related carbohydrates under hyperthermophilic condition (~ 100℃), showing great potential in a wide range of industrial applications, while its relatively low productivity from heterologous hosts has limited the industrial applications. Bacillus subtilis, a gram-positive bacterium, has been widely used in industrial production for its non-pathogenic and powerful secretory characteristics. This study was conducted to increase production of P. furiosus α-amylase in B. subtilis through three strategies. Initial experiments showed that co-expression of P. furiosus molecular chaperone peptidyl-prolyl cis-trans isomerase through genomic integration mode, using a CRISPR/Cas9 system, increased soluble amylase production. Therefore, considering that native P. furiosus α-amylase is produced within a hyperthermophilic environment and is highly thermostable, heat treatment of intact culture at 90℃ for 15 min was performed, thereby greatly increasing soluble amylase production. After optimization of the culture conditions (nitrogen source, carbon source, metal ion, temperature and pH), experiments in a 3-L fermenter yielded a soluble activity of 3,806.7 U/ml, which was 3.3- and 28.2-fold those of a control without heat treatment (1,155.1 U/ml) and an empty expression vector control (135.1 U/ml), respectively. This represents the highest P. furiosus α-amylase production reported to date and should promote innovation in the starch liquefaction process and related industrial productions. Meanwhile, heat treatment, which may promote folding of aggregated P. furiosus α-amylase into a soluble, active form through the transfer of kinetic energy, may be of general benefit when producing proteins from thermophilic archaea.
Purpose: The objective of this study was to investigate the high-efficiency anaerobic digestion of organic wastes with high fat content. Specifically, the analysis focused on biogas production performance with a focus on carbon number and the double bond count of the long-chain fatty acids (LCFAs), which are hydrolysis products of triglycerides. Methods: Experiments were performed under mesophilic anaerobic conditions with a feed-to-microorganism ratio (F/M) of 1.0. Biogas production performance was analyzed through biogas production patterns, lag-phase, and the time required for 90% biogas production (T90). Results: Biogas production increased when the content of unsaturated LCFAs (containing relatively large numbers of carbon atoms) increased. In substrate containing LCFAs with four or more double bonds, although the initial lag-phase in biogas production was shortened, development of a three-step lag-phase resulted in decreased biogas production. These results suggest that high rates of anaerobic digestion are possible when the LCFAs have high unsaturated fatty acid content with three or fewer double bonds. Conclusions: When various types of LCFAs are digested anaerobically, biogas production performance can be improved if the unsaturated fatty acid content and number of double bonds are optimized for maximum production.
Production of free radicals of superoxide anion in tissues by cadmium, activities of superoxide dismutase and catalase to protect tissue damages caused by the free radicals and ATPase that plays an important role in energy metabolism at cellular level were investigated. Experiments in vivo were conducted with liver, kidney and testicle tissue homogenates of rats adding $0.05{\sim}0.50mM$ cadmium chloride, and in vivo experiments administering single dose of 5 mg of cadmium/kg of body weight in 0.1% cadmium chloride solution intraperitoneally 48 hours prior to evisceration. Production of superoxide radicals in liver and testicle increased with addition of cadmium in vitro, but not in kidney. In vivo experiments, however, superoxide radicals slightly increased in liver and kidney but not in testicle. Superoxide dismutase (Cu, Zn-SOD and Mn-SOD), catalase and ATPase (total, $Mg^{++}-\;&\;Na^+,\;K^+-$) activity decreased in the presence of cadimium in dose dependent manner. Reduction of these enzyme activities varied not only with dosage of cadmium but also with type of tissue and between in vitro and in vivo experiment.
Salah Uddin, M.;Tareque, A.M.M.;Rahman, M.A.;Howlider, M.A.R.;Jasimuddin Khan, M.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.5
no.2
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pp.237-248
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1992
The effect of 16 different dietary rations, computed by the combinations of 13, 16, 19 or 22% CP and 2600, 2800, 3000 or 3100 kcal ME/kg, on growth performances and carcass yield of Starcross layers were assessed in two similar experiments. In both experiments, the body weight, eviscerated carcass yield, edible carcass yield, length of digestive tract and shank length increased but the feed intake decreased linearly with the increase of dietary CP and ME levels. The liver and gizzard weights as percentages of live weight tended to be increased with the increase of dietary CP and ME levels. The carcass dry matter, crude protein, fat, ash and energy content were not influenced by the dietary CP and ME levels. Dietary CP levels had positive correlations with all the parameters (except feed and energy intake and carcass dry matter). However, the dietary ME levels were positively correlated with all the parameters (except feed and energy intake; carcass dry matter and ash) in both experiments. The higher values were noted for all the parameters (except gizzard and carcass fat percentages) studied in Experiment 1 compared to those observed in Experiment 2.
Song, Jae Yang;Seo, Young Bin;Hong, Soon-Kwang;Chang, Yong Keun
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.23
no.2
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pp.149-155
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2013
Heterologous expression of a putative $K^+/H^+$ antiporter of Streptomyces coelicolor A3(2) (designated as sha4) in E. coli and Streptomyces hygroscopicus JCM4427 showed enhanced tolerance to $K^+$ stress, acidic-pH shock, and/or geldanamycin production under $K^+$ stress. In a series of $K^+$ extrusion experiments with sha4-carrying E. coli deficient in the $K^+/H^+$ antiporter, a restoration of impaired $K^+$ extrusion activity was observed. Based on this, it was concluded that sha4 was a true $K^+/H^+$ antiporter. In different sets of experiments, the sha4-carrying E. coli showed significantly improved tolerances to $K^+$ stresses and acidic-pH shock, whereas sha4-carrying S. hygroscopicus showed an improvement in $K^+$ stress tolerance only. The sha4-carrying S. hygroscopicus showed much higher geldanamycin productivity than the control under $K^+$ stress condition. In another set of experiments with a production medium, the secretion of geldanamycin was also significantly enhanced by the expression of sha4.
Kim, Seong-Hun;Lee, Ju-Hee;Kim, Hyung-Seok;Park, Seong-Wook
Journal of the Korean Society of Fisheries and Ocean Technology
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v.46
no.2
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pp.115-125
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2010
In order to design the optimal escape vent for the coon strip shrimp pot, the tank experiments were conducted with the model pot of five different slit height and slit width, respectively. The optimal height and width of escape vent were determined to 20mm and 40mm by tank experiments, respectively. These were determined by the 50% selection carapace length which was denoted to 25mm in selectivity curve. The escape experiments were conducted to determine a number of escape vent with the original shrimp pot to be set the designed escape vent from 2 vents to 10 vents increasing at intervals of 2 vents in tank. The optimal number of escape vents denoted 8 vents. Therefore, to apply the escape vent in commercial shrimp pot will be efficient to reduce small size shrimps to catch.
Proceedings of the Korean Society for Noise and Vibration Engineering Conference
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1998.04a
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pp.173-178
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1998
An automatic Q. C. tester for a production line of electric grinder is developed using vibration signals. The methods of measuring and analyzing the vibration signals are found through several experiments at laboratory and production line. The experiments show that checking a vibration signal at running condition only, without any sound signal, is enough to judge whether the product is good or not. The Q. C. tester is made of accelerometer and PC. Measured vibration signal using accelerometer is transmitted to PC through A/D board. Vibration level are calculated using FFT algorithm in PC for already selected five frequency bands, which can specify the cause of fault. The Judging criteria of vibration levels of each bands are decided through a lot of experiment with the comparison of manual judgement.
AEC was designed to assist in the production of radiographs of equal density and to aid in the production f consistently high quality radiographs. Many improvements have been made in the AEC and these have helped to increase it's acceptance. Newer system (Falling load) control kVp and mA as well as exposure time. Authors have had experiments about the characteristics of AEC by Zone System. Zone System is the method to detection of photographic image qualify by control the photo print from Fred Archer and Ansel Adams. With the Zone System theory the experiments of density control, characteristics of phantom thickness and reproducibility of occupation rate of contrast media could make quality control of X-ray photography effectively in falling load system.
Proton exchange membrane (PEM) water electrolysis systems offer several advantages over traditional technologies including higher energy efficiency, higher production rates, and more compact design. In this study, all the experiments were performed with a self-designed PEM electrolyser operated at 1 atm and $25^{\circ}C$. Two types of electrolyte were used: (i) potassium hydroxide (KOH), and (ii) sulfuric acid ($H_2SO_4$). In the experiments, the voltage, current, and time were measured. The concentration of the electrolyte significantly affected the electrolyser performance. Overall the best case was with 15 wt% $H_2SO_4$ at the anode channel and 20 wt% at the cathode channel with. In addition, increasing the difference in concentration of the sulfuric acid had an effect on the diffusion. The diffusion flux became larger when the difference in concentration became larger, increasing electrolyser efficiency without the addition of extra energy.
Uddin, M. Salah;Tareque, A.M.M.;Howlider, M.A.R.;Khan, M. Jasimuddin
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.4
no.4
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pp.361-368
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1991
In two experiments 640 starcross replacement pullets between 25 and 154 days of age were fed ad libitum on either of 16 diets formed by the combination of $4CP{\times}4ME$ levels to study the interaction of CP and ME on growth performances. In both experiments, feed intake decreased, but protein intake, energy intake, live weight gain and feed conversion efficiency increased and sexual maturity hastened with the increase of dietary protein and/or energy level. The protein conversion efficiency decreased with the increase of dietary protein level. The energy conversion efficiency, however, did not show any relationship with dietary energy level. There was a greater improvement of growth performance due to simultaneous increase of dietary protein and energy level than that of increasing protein or energy alone.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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