Stevia rebaudiana is a traditional herb used as a sweetener in Brazil and Paraguay as well as Korea and China. This study investigated the efficacy of Stevia rebaudiana methanol extract (SRE) to protect cells against the mitochondrial dysfunction and apoptosis in hepatocyte. To determine the effects of SRE on oxidative stress, we used the human derived hepatocyte cell line, HepG2 cell. Treatment of arachidonic acid (AA)+iron in HepG2 cells synergistically amplified cytotoxicity, as indicated by the excess reactive oxygen species (ROS) and mitochondrial permeability transition by fluorescence activated cell sorter (FACS) and immunoblot analysis. Treatment with SRE protected hepatocytes from AA+iron-induced cellular toxicity, as shown by alterations in the protein levels related with cell viability such as procaspase-3. SRE also prevented the mitochondrial dysfunction induced by AA+iron, and showed anti-oxidant effects as inhibition of $H_2O_2$ production and GSH depletion. Moreover, we measured the effects of SRE on AMP-activated protein kinase (AMPK), a key regulator in determining cell survival or death. Acetyl-CoA Carboxylase (ACC), a direct downstream target of AMPK. SRE increased phosphorylation of ACC, and prevented the inhibition of ACC phosphorylation by AA+iron. These results indicated that SRE has the ability to protect cells against AA+iron-induced $H_2O_2$ production and mitochondrial impairment, which may be mediated with AMPK-ACC pathway.
This study was designed to elucidate the synergistic cytotoxic mechanisms of the co-treatment of adriamycin and Paljinhangahm-dan in human hepatoma malignant cancer cell line, HepG2. The combination of adriamycin and the ethanol extract of Paljinhangahm-dan synergistically augmented the cytotoxicity of Adriamycin and Paljinhangahm-dan in HepG2 cells. The cytotoxicity of two drugs was revealed as apoptosis characterized by DNA fragmentaton in agarose gel electrophoresis. The apoptotic cytotoxicity of adriamycin and Paljinhangahm-dan was accompanied by the cleavage of procaspase -3 protease and PARP. Of note, anti apoptotic Bcl2 protein was obviously decreased, but Fas was dramatically increased in HepG2 cells co-treated with Adriamycin and Paljinhangahm -dan. In addition, through 2-D gel electorphoresis, we observed that the expression levels of a lot of proteins were obviously changed by the status of drug treatments. This results suggest that the synergistic cytotoxicity of the co-treatment of adriamycin and Paljinhangahm-dan might be caused by the changes of the expression levels of a lot of proteins which play pivotal roles in cell survival or death.
Lee, Seul Ah;Park, Bo-Ram;Moon, Sung Min;Kim, Do Kyung;Kim, Chun Sung
International Journal of Oral Biology
/
제43권2호
/
pp.61-68
/
2018
Codium fragile (Suringar) Hariot is an edible green seaweed that belong to the Codiaceae family and has been used in Oriental medicine for the treatment of enterobiasis, dropsy, and dysuria. Methanol extract of codium fragile has anti-oxidant, anti-inflammatory and anti-cancer properties, although the anti-cancer effect on oral cancer has not yet been reported. In this study, we investigated the anti-cancer activity and the mechanism of cell death by methanol extracts of Codium fragile (MeCF) on human FaDu hypopharyngeal squamous carcinoma cells. Our data showed that MeCF inhibits cell viability in a dose-dependent manner, and markedly induced apoptosis, as determined by the MTT assay, Live/Dead assay, and DAPI stain. In addition, MeCF induced the proteolytic cleavage of procaspase -3, -7, -9 and poly(ADP-ribose) polymerase(PARP), and upregulated or downregulated the expression of mitochondrial-apoptosis factor, Bax(pro-apoptotic factor), and Bcl-2(anti-apoptotic factor). Futhermore, MeCF induced a cell cycle arrest at the G1/S phase through suppressing the expression of the cell cycle cascade proteins, p21, CDK4, CyclinD1, and phospho-Rb. Taken together, these results indicated that MeCF inhibits cell growth, and this inhibition is mediated by caspase- and mitochondrial-dependent apoptotic pathways through cell cycle arrest at the G1/S phase in human FaDu hypopharyngeal squamous carcinoma cells. Therefore, methanol extracts of Codium fragile can be provided as a novel chemotherapeutic drug due to its growth inhibition effects and induction of apoptosis in human oral cancer cells.
Objectives : This study was designed to evaluate the effect on cytotoxicity of Bojungikki-tang(BIT) in human lung cancer H460 cells. Methods : BIT-induced cell death was confirmed as apoptosis characterized by chromatin condensation and increase of the $sub-G_1$, DNA content. It was tested whether the water extract of BIT affects the cell cycle regulators such as, p2l/Cipl, p27/Kipl, cyclin $B_1$. Results : The data showed that treatment of BIT decreased the viability of H460 cells in a dose-dependent manner. p2l/Cip1 is gradually decreased by the addition of the cells with BIT extract. Interestingly, p27/Kip1 is not detected for 24 hr after the addition of BIT extract, however, after 24 hr, p27/Kipl markedly increased. In addition, cyclin $B_1$, decreased in a time dependent manner after the addition of the water extract. The activation of caspase -3 protease was further confirmed by degradation of procaspase-8 protease andpoly(ADP-ribose) polymerase(P ARP) by BIT in H460 cells. Moreover, BIT induced the increase of Bak expression. Conclusion : These results suggest that the extract of BIT exerts anticancer effects to induce the death of human lung cancer H460 cells via down regulation of cell cycle regulators such as p2l/Cip1, and cyclin B1 or up regulation of cell cycle regulators such as p27/Kip1. Moerover results suggest that BIT induces an apoptosis in H460 cells via activation of intrinsic caspase cascades.
Yang, Jung Eun;Lee, Seul Ah;Moon, Sung Min;Han, Seul Hee;Choi, Yun Hee;Kim, Su-Gwan;Kim, Do Kyung;Park, Bo-Ram;Kim, Chun Sung
International Journal of Oral Biology
/
제42권2호
/
pp.47-54
/
2017
Anthriscus sylvestris (L.) Hoffm. is a perennial herb found widely distributed in various regions of Korea, Europe, and New Zealand. The root of A. sylvestris have been extensively used in the treatment for antitussive, antipyretic, cough remedy in Oriental medicine, but the physiologically active function of the leaf of A. sylvestris is as yet unknown. In this study, we investigated the anti-cancer activity and the mechanism of cell death of water extracts of leaf of Anthriscus sylvestris (WELAS), on human FaDu hypopharyngeal squamous carcinoma cells. Our data showed that WELAS treatment inhibited cell viability in a concentration- and time-dependent manner. In addition, the treatment of WELAS markedly induced apoptosis in FaDu cells, as determined by the viability assay, DAPI stain and FACS analysis. WELAS also increased the proteolytic cleavage of procaspase-3, -9 and PARP (poly(ADP-ribose) polymerase). In addition, exposure to WELAS decreased the expression of Bcl-2 (an anti-apoptotic factor), but increased the expression of Bax (a pro-apoptotic factor), suggesting that mitochondria-dependent apoptotic pathways are mediated in WELAS-induced apoptosis. Taken together, these results indicate that water extracts of leaf of A. sylvestris inhibits cell growth and induces apoptosis via the mitochondrial-dependent apoptotic pathway in FaDu human hypopharyngeal squamous carcinoma cells. Therefore, we propose that the water extracts of leaf of A. sylvestris is a novel chemotherapeutic drug, having growth inhibitory properties and induction of apoptosis in human oral cancer cells.
Objectives : The purpose of this study was to investigate the anticancer effects of Bodusan (BDS) on SNU-1 cells, a human gastric cancer cell line. Methods : To study the cytotoxic effect of BDS on SNU-1 cells, the cells were treated with various concentrations of BDS and then cell viability was determined by XTT reduction method and trypan blue exclusion assay. The typical signs of apoptosis, was examined by western blot analysis. BDS-induced MAPK activation was also examined by Western blot for phosphorylated ERK and p38. Results : BDS reduced proliferation of SNU-1 cells in a dose-dependent manner and decreased procaspase 3 level in a dose-dependent manner and induced the clevage of PARP at concentration > 500 ${\mu}g/ml$. BDS also triggered the mitochondrial apoptotic signaling by increasing the release of cytochrome C from mitochondria to cytosol and reducing the level of anti-apoptotic Bcl-2. BDS significantly decreased ERK phosphorylation and increased p38 phosphorylation in a dose-dependent manner. Futhermore, BDS treatment up-regulated p53 and p21waf expression in a dose-dependent manner. Conclusion : BDS-induced apoptosis is MAP kinase-dependent apoptoric pathway and arrested SNU-1 cells at the G0/G1 of cell cycle. These results suggest that BDS is potentially useful as a chemotherapeutic agent in human gastric cancer.
Hepatocellular carcinoma is the world's most common primary malignant tumor of the liver. In-Jin-ho-Tang (IJHT) has been used as a traditional Chinese herbal medicine since ancient times, and today it is widely used as a medication for jaundice associated with inflammation of the liver. In-Jin-Ho-Tang is a drug preparation consisting of three herbs: Artemisiae Capillaris Herba (Artemisia capillaries $T_{HUNS}$, Injinho in Korean), Gardeniae Fructus (Gardenia jasminodes $E_{LLIS}$, Chija in Korean) and Rhei radix et rhizoma (Rheum palmatum L., Daehwang in Korean). This study investigated whether or not methanol extract of IJHT could induce HepG2 cancer cell death. Cytotoxic activity of IJHT on HepG2 cells was measured using an XTT assay, with an $IC_{50}$ value of $700{\mu}g/ml$ at 24 h Apoptosis induction by IJHT in HepG2 cells was verified by the cleavage of poly ADP-ribose polymerase, and a decrease in procaspase-3, -8, -9. Treatment of IJHT resulted in the release of cytochrome c into cytosol, loss of mitochondrial membrane potential (${\Delta}{\Psi}_m$), decrease in anti-apoptotic Bcl-2, and an increase in pro-apoptotic Bax expression. Thus, IJHT induced apoptosis in HepG2 cells via activation of caspase and mitochondria pathway. These results indicate that IJHT has potential as an anti-cancer agent.
Objective : Caryophylli Flos has been used in Korean medicine to relieve vomiting and pains caused by chills that make fluid circulation difficult. This study was designed to investigate the protective effect of ethanol extract of Caryophylli Flos (CF) in hydrogen peroxide (H2O2)-induced apoptotic cell death in human keratinocyte HaCaT cells. Methods : CF was prepared by extracting 200 g of Caryophylli Flos in 2 L of ethanol for 48 h. Cell viability was measured by MTT assay, and the protein expression was monitored by Western blot analysis. Apoptosis was determined by terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labeling (TUNEL) assay. Reactive oxygen species (ROS) was measured using fluorescent dye, and reduced glutathione (GSH) was determined with a colorimetric commercial kit. Results : CF protected HaCaT cells from cell death caused by oxidative stress after H2O2 treatment. H2O2 amplified generation of ROS and induced depletion of GSH, whereas these changes in ROS and GSH were inhibited by GF treatment. In addition, H2O2 resulted in apoptosis as assessed by TUNEL assay and the expression of apoptosis regulator proteins. However, cells treated with CF showed a decrease in TUNEL-positive cells and restored the reduced expression of procaspase-9, -3 and PARP. Conclusion : This study showed cytoprotective effects of CF by anti-apoptotic activity while exerting antioxidative activity in H2O2-treated HaCaT cells. These results suggest that CF could be beneficial in skin damage caused by oxidative stress.
Objective : Citrus unshiu peel (Citri Unshius Pericarpium) has been prescribed to suppress coughing and phlegm in Korean medicine. In this study, the effect of ethanol extract of Citrus unshiu peel (CEE) on apoptosis was investigated using cadmium chloride (CdCl2) treated HepG2 cells. Methods : CEE was prepared by extracting 300 g of Citri Unshius Pericarpium in 3 L of ethanol for 72 h. Apoptosis was determined by the TUNEL assay. The mitochondrial membrane potential (MMP) was monitored using the membrane-permeable fluorescent dye Rh123. The expression level of each protein was monitored by Western blot analysis. Results : CEE protected HepG2 cells from apoptosis as determined by the TUNEL assay. A decrease in MMP was observed in cells exposed to cadmium, indicating that mitochondria are involved in the induction of apoptosis. However, CEE recovered the reduction in MMP caused by cadmium. In addition, decreased expression of B-cell lymphoma 2 (Bcl-2), procaspase, and poly(ADP-ribose) polymerase (PARP) by cadmium was increased by CEE. The anti-apoptotic effect of CEE was found to be associated with inhibition of JNK and p38 phosphorylation when examining the expression of phosphorylated MAPK by Western blot. Conclusion : This study showed that CEE exerted anti-apoptotic effects in cadmium-induced HepG2 cells by inhibiting the reduction of MMP and changes in the expression level of apoptotic proteins. These results suggest the potential for CEE to be used for heavy metal-induced liver damage.
Objectives : This study was performed for the investigation of anticancer effects of methanol extract of Rheum Rhizoma (MeOH-RR) on a human liver cancer cell line (HepG2). Methods : To study the cytotoxic effect of MeOH-RR on HepG2 cells, the cell viability was determined by XTT reduction method and trypan blue exclusion assay. The cleavage of poly ADP-ribose polymerase (PARP), a substrate for caspase-3 and a typical sign of apoptosis, and the activation of procaspase-3, -8 and -9 were examined by western blot analysis. Furthermore, MeOH-RR-induced apoptosis was confirmed by DNA fragmentation. The release of cytochrome c from mitochondria to cytosol, the level of Bcl-2 and Bax were examined by western blot analysis. Results : MeOH-RR reduced proliferation of HepG2 cells in a dose-dependent manner at 24 h and 48 h treatment. MeOH-RR induced the activation of caspase-3, -8, and -9 and the cleavage of poly ADP-ribose polymerase (PARP), a substrate for caspase-3. Furthermore, treatment with MeOH-RR resulted in internucleosomal DNA fragmentation, evidenced by the formation of a DNA ladder on agarose gel, a hallmark of cells undergoing apoptosis. MeOH-RR downregulated Bcl-2, upregulated Bax, and increased the release of cytochrome c from the mitochondria into cytosol in a dose-dependent manner. Moreover, MeOH-RP increased caspase-3 activity. Conclusion : There results suggest that MeOH-RR induce apoptosis via mitochondrial pathway and caspase-3-dependent pathway in HepG2 cells. There results suggest that MeOH-RR is potentially useful as a chemotherapeutic agent in human liver cancer.
본 웹사이트에 게시된 이메일 주소가 전자우편 수집 프로그램이나
그 밖의 기술적 장치를 이용하여 무단으로 수집되는 것을 거부하며,
이를 위반시 정보통신망법에 의해 형사 처벌됨을 유념하시기 바랍니다.
[게시일 2004년 10월 1일]
이용약관
제 1 장 총칙
제 1 조 (목적)
이 이용약관은 KoreaScience 홈페이지(이하 “당 사이트”)에서 제공하는 인터넷 서비스(이하 '서비스')의 가입조건 및 이용에 관한 제반 사항과 기타 필요한 사항을 구체적으로 규정함을 목적으로 합니다.
제 2 조 (용어의 정의)
① "이용자"라 함은 당 사이트에 접속하여 이 약관에 따라 당 사이트가 제공하는 서비스를 받는 회원 및 비회원을
말합니다.
② "회원"이라 함은 서비스를 이용하기 위하여 당 사이트에 개인정보를 제공하여 아이디(ID)와 비밀번호를 부여
받은 자를 말합니다.
③ "회원 아이디(ID)"라 함은 회원의 식별 및 서비스 이용을 위하여 자신이 선정한 문자 및 숫자의 조합을
말합니다.
④ "비밀번호(패스워드)"라 함은 회원이 자신의 비밀보호를 위하여 선정한 문자 및 숫자의 조합을 말합니다.
제 3 조 (이용약관의 효력 및 변경)
① 이 약관은 당 사이트에 게시하거나 기타의 방법으로 회원에게 공지함으로써 효력이 발생합니다.
② 당 사이트는 이 약관을 개정할 경우에 적용일자 및 개정사유를 명시하여 현행 약관과 함께 당 사이트의
초기화면에 그 적용일자 7일 이전부터 적용일자 전일까지 공지합니다. 다만, 회원에게 불리하게 약관내용을
변경하는 경우에는 최소한 30일 이상의 사전 유예기간을 두고 공지합니다. 이 경우 당 사이트는 개정 전
내용과 개정 후 내용을 명확하게 비교하여 이용자가 알기 쉽도록 표시합니다.
제 4 조(약관 외 준칙)
① 이 약관은 당 사이트가 제공하는 서비스에 관한 이용안내와 함께 적용됩니다.
② 이 약관에 명시되지 아니한 사항은 관계법령의 규정이 적용됩니다.
제 2 장 이용계약의 체결
제 5 조 (이용계약의 성립 등)
① 이용계약은 이용고객이 당 사이트가 정한 약관에 「동의합니다」를 선택하고, 당 사이트가 정한
온라인신청양식을 작성하여 서비스 이용을 신청한 후, 당 사이트가 이를 승낙함으로써 성립합니다.
② 제1항의 승낙은 당 사이트가 제공하는 과학기술정보검색, 맞춤정보, 서지정보 등 다른 서비스의 이용승낙을
포함합니다.
제 6 조 (회원가입)
서비스를 이용하고자 하는 고객은 당 사이트에서 정한 회원가입양식에 개인정보를 기재하여 가입을 하여야 합니다.
제 7 조 (개인정보의 보호 및 사용)
당 사이트는 관계법령이 정하는 바에 따라 회원 등록정보를 포함한 회원의 개인정보를 보호하기 위해 노력합니다. 회원 개인정보의 보호 및 사용에 대해서는 관련법령 및 당 사이트의 개인정보 보호정책이 적용됩니다.
제 8 조 (이용 신청의 승낙과 제한)
① 당 사이트는 제6조의 규정에 의한 이용신청고객에 대하여 서비스 이용을 승낙합니다.
② 당 사이트는 아래사항에 해당하는 경우에 대해서 승낙하지 아니 합니다.
- 이용계약 신청서의 내용을 허위로 기재한 경우
- 기타 규정한 제반사항을 위반하며 신청하는 경우
제 9 조 (회원 ID 부여 및 변경 등)
① 당 사이트는 이용고객에 대하여 약관에 정하는 바에 따라 자신이 선정한 회원 ID를 부여합니다.
② 회원 ID는 원칙적으로 변경이 불가하며 부득이한 사유로 인하여 변경 하고자 하는 경우에는 해당 ID를
해지하고 재가입해야 합니다.
③ 기타 회원 개인정보 관리 및 변경 등에 관한 사항은 서비스별 안내에 정하는 바에 의합니다.
제 3 장 계약 당사자의 의무
제 10 조 (KISTI의 의무)
① 당 사이트는 이용고객이 희망한 서비스 제공 개시일에 특별한 사정이 없는 한 서비스를 이용할 수 있도록
하여야 합니다.
② 당 사이트는 개인정보 보호를 위해 보안시스템을 구축하며 개인정보 보호정책을 공시하고 준수합니다.
③ 당 사이트는 회원으로부터 제기되는 의견이나 불만이 정당하다고 객관적으로 인정될 경우에는 적절한 절차를
거쳐 즉시 처리하여야 합니다. 다만, 즉시 처리가 곤란한 경우는 회원에게 그 사유와 처리일정을 통보하여야
합니다.
제 11 조 (회원의 의무)
① 이용자는 회원가입 신청 또는 회원정보 변경 시 실명으로 모든 사항을 사실에 근거하여 작성하여야 하며,
허위 또는 타인의 정보를 등록할 경우 일체의 권리를 주장할 수 없습니다.
② 당 사이트가 관계법령 및 개인정보 보호정책에 의거하여 그 책임을 지는 경우를 제외하고 회원에게 부여된
ID의 비밀번호 관리소홀, 부정사용에 의하여 발생하는 모든 결과에 대한 책임은 회원에게 있습니다.
③ 회원은 당 사이트 및 제 3자의 지적 재산권을 침해해서는 안 됩니다.
제 4 장 서비스의 이용
제 12 조 (서비스 이용 시간)
① 서비스 이용은 당 사이트의 업무상 또는 기술상 특별한 지장이 없는 한 연중무휴, 1일 24시간 운영을
원칙으로 합니다. 단, 당 사이트는 시스템 정기점검, 증설 및 교체를 위해 당 사이트가 정한 날이나 시간에
서비스를 일시 중단할 수 있으며, 예정되어 있는 작업으로 인한 서비스 일시중단은 당 사이트 홈페이지를
통해 사전에 공지합니다.
② 당 사이트는 서비스를 특정범위로 분할하여 각 범위별로 이용가능시간을 별도로 지정할 수 있습니다. 다만
이 경우 그 내용을 공지합니다.
제 13 조 (홈페이지 저작권)
① NDSL에서 제공하는 모든 저작물의 저작권은 원저작자에게 있으며, KISTI는 복제/배포/전송권을 확보하고
있습니다.
② NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 상업적 및 기타 영리목적으로 복제/배포/전송할 경우 사전에 KISTI의 허락을
받아야 합니다.
③ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 보도, 비평, 교육, 연구 등을 위하여 정당한 범위 안에서 공정한 관행에
합치되게 인용할 수 있습니다.
④ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 무단 복제, 전송, 배포 기타 저작권법에 위반되는 방법으로 이용할 경우
저작권법 제136조에 따라 5년 이하의 징역 또는 5천만 원 이하의 벌금에 처해질 수 있습니다.
제 14 조 (유료서비스)
① 당 사이트 및 협력기관이 정한 유료서비스(원문복사 등)는 별도로 정해진 바에 따르며, 변경사항은 시행 전에
당 사이트 홈페이지를 통하여 회원에게 공지합니다.
② 유료서비스를 이용하려는 회원은 정해진 요금체계에 따라 요금을 납부해야 합니다.
제 5 장 계약 해지 및 이용 제한
제 15 조 (계약 해지)
회원이 이용계약을 해지하고자 하는 때에는 [가입해지] 메뉴를 이용해 직접 해지해야 합니다.
제 16 조 (서비스 이용제한)
① 당 사이트는 회원이 서비스 이용내용에 있어서 본 약관 제 11조 내용을 위반하거나, 다음 각 호에 해당하는
경우 서비스 이용을 제한할 수 있습니다.
- 2년 이상 서비스를 이용한 적이 없는 경우
- 기타 정상적인 서비스 운영에 방해가 될 경우
② 상기 이용제한 규정에 따라 서비스를 이용하는 회원에게 서비스 이용에 대하여 별도 공지 없이 서비스 이용의
일시정지, 이용계약 해지 할 수 있습니다.
제 17 조 (전자우편주소 수집 금지)
회원은 전자우편주소 추출기 등을 이용하여 전자우편주소를 수집 또는 제3자에게 제공할 수 없습니다.
제 6 장 손해배상 및 기타사항
제 18 조 (손해배상)
당 사이트는 무료로 제공되는 서비스와 관련하여 회원에게 어떠한 손해가 발생하더라도 당 사이트가 고의 또는 과실로 인한 손해발생을 제외하고는 이에 대하여 책임을 부담하지 아니합니다.
제 19 조 (관할 법원)
서비스 이용으로 발생한 분쟁에 대해 소송이 제기되는 경우 민사 소송법상의 관할 법원에 제기합니다.
[부 칙]
1. (시행일) 이 약관은 2016년 9월 5일부터 적용되며, 종전 약관은 본 약관으로 대체되며, 개정된 약관의 적용일 이전 가입자도 개정된 약관의 적용을 받습니다.