The preS2 wequence of an adr hepatitis B virus was cloned and expressed in Escherichia coli as a $\beta$-galactosidase fusion polypeptide. Recombinant preS2 product interacted with the preS2-specific monoclonal antibody H8 which was induced by surface antigen particles isolated from a Korean gepatitis patient. The H8 showed only a minor cross-reactivity with recombinant preS2 product of adw2 subtype. Determination of nucleotide sequence of the adr preS2 revealed that twelve amino acid residue substitutions between adr and adw2 subtype sequences. The antigenic determinant to H8 must include some of these differences.
A DNA sequence encoding the adr subtype preS2 region of hepatitis B virus envelope protein was fused to 5' end of lacZ gene yielding a plasmid pTSZ, in order to produce a preS2-$\beta$-galactosidase fusion protein. Serial deletions from 3' and 5' end of preS2 were constructed in plasmids, which were expressed and their antigenicities were examined with the monoclonal antibody H8. Deletions from amino and carboxy terminal to certain points did not affect the antigenicity, but the longer deletions destroyed the antigenicity. End points of deleted preS2 sequence were determined by DNA sequencing. As a result, each end of preS2 epitope was located in the region of amino acid residue 130-132 and 140-142, respectively. Residue 143 may be supplementary for antigenic epitope since the deletion from carboxy terminal to residue 143 revealed partial defect of antigenicity. In the interval of antigenic epitope the amino acid differences between adr and adw2 subtype occurred ar residue 130, 132, and 141. This result indicated that one or more of the three residues are responsible for the binding specificity of monoclonal antibody H8 to adr subtype preS2 fusion protein.
Ko, Young Min;Kim, Sung Tae;Ko, Jae Hyuck;Ahn, Byung Tae;Chalapathy, R.B.V.
Current Photovoltaic Research
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v.10
no.2
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pp.39-48
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2022
A Se-containing Cu/SnSe2/ZnSe precursor was employed to introduce S to the precursor to form Cu2ZnSn(S,Se)4 (CZTSSe) film. The morphology of CZTSSe films strongly varied with two different pre-annealing environments: S and N2. The CZTSSe film with S pre-annealing showed a dense morphology with a smooth surface, while that with N2 pre-annealing showed a porous film with a plate-shaped grains on the surface. CuS and Cu2Sn(S,Se)3 phases formed during the S pre-annealing stage, while SnSe and Cu2SnSe3 phases formed during the N2 pre-annealing stage. The SnSe phase formed during N2 pre-annealing generated SnS2 phase that had plate shape and severely aggravated the morphology of CZTSSe film. The power conversion efficiency of the CZTSSe solar cell with S pre-annealing was low (1.9%) due to existence of Zn(S.Se) layer between CZTSSe and Mo substrate. The results indicated that S pre-annealing of the precursor was a promising method to achieve a good morphology for large area application.
Epitope tagging is the process of fusing a set of amino acid residues that are recognized as an antigenic determinant to a protein of interest. Tagging a protein with an epitope facilitates various immunochemical analyses of the tagged protein with a specific monoclonal antibody. The monoclonal antibody H8 has subtype specificity for an epitope derived from the preS2 region of hepatitis B virus surface antigen. Previous studies on serial deletions of the preS2 region indicated that the preS2 epitope was located in amino acid residues 130~142. To test whether the amino acid sequence in this interval is sufficient to confer on proteins the antigenicity recognizable by the antibody H8, the set of amino acid residues in the interval was tagged to the amino terminal of ${\beta}$-galactosidase and to the carboxyl terminal of the truncated $p56^{lck}$ fragment. The tagged ${\beta}$-galactosidase, expressed in Escherichia coli, maintained the enzymatic activity and was immunoprecipitated efficiently with H8. The tagged $p56^{lck}$ fragment, synthesized in an in vitro translation system, was also immunoprecipitated specifically with H8. These results demonstrate that the amino acid sequence of the preS2 region can be used efficiently for the epitope tagging approach.
Journal of The Korean Association For Science Education
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v.31
no.2
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pp.164-180
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2011
In this study, pre-service elementary teachers (n=68) participated in an inquiry of exploring children's science ideas as group work. After conducting interviews with children, the pre-service teachers analyzed their science ideas on specific concept and propose a teaching plan based on their findings. This paper aimed to find the positive learning experiences of the pre-service teachers by looking into their inquiry process. Questionnaire, researcher's journal, classroom videos and final reports were collected and analyzed for this multiple case study. Four representative groups were chosen and interviewed after submitting their final reports for in-depth understanding of their inquiry process. The positive learning experiences found in the process of their inquiry into children's science ideas were as follows: (1) exploring children's ideas have brought the opportunity for enhancing pre-service teachers' science content knowledge. (2) the pre-service teachers developed their ability in creating questions that probe into children's understanding. (3) the pre-service teachers recognized that children have various incomplete and unstable science ideas. (4) the pre-service teachers could suggest teaching strategy based on their findings.
Many studies have provided evidences that hepatitis B surface antigen (HBsAg) including preS region could be an ideal candidate for a new hepatitis B virus (HBV) vaccine with higher efficacy. We established CHO cell lines, IY-CHO-2 and IY-CHO-11 expressing high levels of HBsAg containing preS2 and S protein by stable transfection method. These cell lines expressed the correct size (about 1 kb in length) of HBsAg mRNA as expected. The purified protein from the culture supernatants of the clones showed the same sizes as those expressed in native hepatitis B virus (24 kDa, 27 kDa, 34 kDa and 36 kDa). Antibody productivity of CHO-derived HBsAg protein at lower dose challenge was higher than the protein containing S region alone expressed in yeast system. These results indicate that CHO-derived HBsAg protein containing preS2 and S region can be effectively used for a better immune response as a HBV vaccine.
Objective: This study aimed to reveal pre-service early childhood teachers' perception of children's environmental education using concept mapping and demonstrating its importance. Methods: Based on Kane and Trochim's(2007) procedure, 33 pre-service early childhood teachers conducted brainstorming and statement writing, and then the importance of selected statements were rated by 202 pre-service early childhood teachers. Selected statements were analyzed through multidimensional scaling and hierarchical cluster analysis. Results: Pre-service early childhood teachers perceived children's environmental education as concept mapping with 2-dimensions and eight clusters. The following eight clusters were established (1) daily practice through hands on experience, (2) nature environment, (3) recognizing and coping with environmental issues, (4) environmental preservation practices, (5) environmental sensitivity and consideration, (6) purpose of children's environmental education, (7) necessity for children's environmental education (8) Practice through connection with child's home and community. And then among the eight clusters, the most important was recognized as 'daily practice through hands on experience', and among the statements 'young children learn through the method of playing in nature and experience nature' was considered the most important. Conclusion/Implications: Based on these results, we discuss the importance of children's environmental education of pre-service early childhood teachers and how to support to develop teacher's training program.
Viral surface proteins are known to play an essential role in attachment of the virus particle to the host cell membrane. In case of the hepatitis B virus (HBV) several reports have described potential receptors on the target cell side, but no definite receptor protein has been isolated yet. As for the viral side, it has been suggested that the preS region of the envelope protein, especially the preS1 region, is involved in binding of HBV to the host cell. In this study, preS1 region was recombinantly expressed in the form of a maltose binding protein (MBP) fusion protein and used to identify and visualize the expression of putative HBV receptor(s) on the host cell. Using laser scanned confocal microscopy and by FACS analysis, MBP-preS1 proteins were shown to bind to the human hepatoma cell line HepG2 in a receptor-ligand specific manner. The binding kinetic of MBP-preS1 to its cellular receptor was shown to be temperature and time dependent. In cells permeabilized with Triton X-100 and treated with the fusion protein, a specific staining of the nuclear membrane could be observed. To determine the precise location of the receptor binding site within the preS1 region, several short overlapping peptides from this region were synthesized and used in a competition assay. In this way the receptor binding epitope in preS1 was revealed to be amino acid residues 27 to 51, which is in agreement with previous reports. These results confirm the significance of the preS1 region in virus attachment in general, and suggest an internalization pathway mediated by direct attachment of the viral particle to the target cell membrane.
The purpose of this study was to investigate the measurement equivalence and to suggest application ways in teaching aptitude and personality test results for pre-service mathematics teachers between a graduate school of education and a college of education. This study analyzed the scores of the teaching aptitude and personality test of 36 pre-service mathematics teachers enrolled in a graduate school of education and 111 pre-service mathematics teachers in a college of education by performing a multivariate generalizability analysis. The main results were as follows. First, graduate's pre-service mathematics teachers had a higher level of teaching aptitude and personality than that of college's pre-service mathematics teachers based on the total scores. In addition, graduate's pre-service mathematics teachers had higher levels of teaching aptitude and personality than those of college's pre-service mathematics teachers except for a creativity application domain based on the sub-domain scores. Second, cognitive domains were measured more precisely but affective domains were measured less precisely for graduate's pre-service mathematics teachers than for college's pre-service mathematics teachers. Third, regardless of school levels, Cronbach's ${\alpha}$ values, which might be overestimated by applying the classical test theory, were higher than dependability coefficients. Fourth, this study showed a somewhat negative result in ensuring the measurement equivalence for a problem solving exploration domain. However, regardless of school levels, this study indicated that the overall measurement was generally reliable on composite scores. Based on these results, it was confirmed that multivariate generalizability methodologies' approach can be useful for exploring the measurement equivalence issues. Finally, this study suggests how to utilize the results of the test, how to apply a multivariate generalizability analysis for detecting the measurement equivalence, and how to develop future research based on limitations.
The initiation of eukaryotic DNA replication requires assembly of the pre-replicative complex (Pre-RC) through the concerted action of Orc, Cdc6, Cdt1 and Mcm2-7 complex during G1 phase. The pre-RC assembly licenses individual replication origins for the initiation of DNA replication and sufficient number of the pre-RC is essential for proper progression of S phase. However, it is not well known how cells recognize the completion of the pre-RC assembly before G1-S transition. In order to understand the cellular responses to the defects in pre-RC assembly, we depleted the known components of pre-RC proteins using the small interference RNAs in HeLa cells. Although the defects of pre-RC assembly by the depletion of the pre-RC proteins such as Orc2, Cdt1, Mcm2 & Mcm10 did not elicit the activation of Chk1- or Chk2-dependent checkpoint pathways, these cells still showed significant decrease in the cellular level of Cdc25A proteins. These results suggests that a novel checkpoint pathway exist in HeLa cells, which is not dependent upon Chk1 or Chk2 proteins and play essential roles in the cellular responses to the defects in the pre-RC assembly. Also, among those four proteins tested in this study, the depletion of Mcm10 and Cdt1 proteins significantly increased the apoptotic cell death in HeLa cells, suggesting that these proteins not only play roles in the pre-RC assembly, but also are involved in the checkpoint responses to the defects in the pre-RC assembly.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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