Vibrio splendidus biovar II와 V. anguillarum이 우리나라 굴 유생에 있어서 bacillary necrosis를 일으킬 가능성이 있는지를 알아보기 위하여 인위감염을 실시하였다. 부화 후 5일생 유생은 V. splendidus biovar II를 1$1.81{\times}10^{4}$ CFU/$m\ell$ 농도로 인위감염 시켰을 때 8시간 후부터 폐사가 시작되어 16시간에 100% 폐사를 보였다. V. anguillarum을 $1.13{\times}10^{4-5}$ CFU/$m\ell$의 농도로 인위감염 시킨 실험구에서는 20시간 후부터 폐사가 시작 되어 24시간 후 5.55-20%의 폐사율을 보였다. 부화 후 10일생 유생은 V. splendidus biovar II $5.0{\times}10^{5}$ CFU/$m\ell$ 실험구에서 공격 후 8시간째부터 폐사가 나타나기 시작하여 24시간 후 90.47% 폐사하였으나, V. anguillarum 실험구는 $5.08{\times}10^{3-6}$ CFU/$m\ell$의 농도범위에서 폐사가 나타나지 않았다. 그러므로 V. splendidus biovar II는 5일생 유생에 강한 병원성이 있음을 확인하였다. 항균제 처리효과를 구명함으로써 조기 대처방안을 확립하기 위하여 Vibrio를 인위감염 시킨 굴 유생에 폐사가 나타나기 시작할 때 oxytetracycline과 streptomycin을 30 $\mu{g}/m\ell$의 농도로 처리하였다. 그 결과 굴 유생의 유의적인 생존율 증가는 볼 수 없었으나 생존시간이 다소 길어졌으므로 항균제 처리 시점 및 사용농도에 대한 추가연구의 필요성이 제기되었다. 인위감염 실험 시 수조내의 세균농도 분석 결과, V. anguillarum은 $1.13{\times}10^{5}$ CFU/$m\ell$에서 4시간 때 일시적인 증가를 보이다 시간이 경과할수록 $1.7{\times}10^{5}$ CFU/ 로 차츰 감소하는 경향을 보였고, V. splendidus biovar II는 $1.81{\times}10^{4}$ CFU/$m\ell$에서 $1.7{\times}10^{7}$ CFU/로 증가하여 강한 생존력을 보였다. 이와 같은 생존력의 차이는 두 균주간의 병원성 차이를 보이는 결과와 일치하였다. 국내에서는 보고된바 없지만 세계적으로 패류인공종묘에 대량폐사의 원인이 되는 V. splendidus biovar II의 국내산 굴 유생에 대한 병원성이 확인되어 국내에서 도 bacillary necrosis의 발생 가능성이 높음을 알 수 있었다.
Kim, Tae-Yoon;Lee, Jin-Jae;Kim, Bong-Soo;Choi, Sang Ho
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제27권10호
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pp.1753-1762
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2017
Sea cucumber (Apostichopus japonicus) is a popular seafood source in Asia, including South Korea, and its consumption has recently increased with recognition of its medicinal properties. However, because raw sea cucumber contains various microbes, its ingestion can cause foodborne illness. Therefore, analysis of the microbiota in the whole body of sea cucumber can extend our understanding of foodborne illness caused by microorganisms and help to better manage products. We collected 40 sea cucumbers from four different sites in August and November, which are known as the maximum production areas in Korea. The microbiota was analyzed by an Illumina MiSeq system, and bacterial amounts were quantified by real-time PCR. The diversity and bacterial amounts in sea cucumber were higher in August than in November. Alpha-, Beta-, and Gammaproteobacteria were common dominant classes in all samples. However, the microbiota composition differed according to sampling time and site. Staphylococcus warneri and Propionibacterium acnes were commonly detected potential pathogens in August and November samples, respectively. The effect of experimental Vibrio parahaemolyticus infection on the indigenous microbiota of sea cucumber was analyzed at different temperatures, revealing clear alterations of Psychrobacter and Moraxella; thus, these shifts can be used as indicators for monitoring infection of sea cucumber. Although further studies are needed to clarify and understand the virulence and mechanisms of the identified pathogens of sea cucumber, our study provides a valuable reference for determining the potential of foodborne illness caused by sea cucumber ingestion and to develop monitoring strategies of products using microbiota information.
Javed, Imran;Ahmed, Safia;Ali, Muhammad Ishtiaq;Ahmad, Bashir;Ghumro, Pir Bux;Hameed, Abdul;Chaudry, Ghulam Jilani
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제20권1호
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pp.153-160
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2010
The present study was carried out for the isolation of bacteriocin-producing enterococci from indigenous sources. Gram-positive enterococci are known for having the ability to produce enterocins with good antimicrobial potential. A total of 34 strains were isolated from processed dairy products of Pakistan and seven out of them were found to be member of genus Enterococcus on selective enumeration. Biochemical and molecular characterization revealed that four of these isolates (IJ-03, IJ-07, IJ-11, and IJ-12) were Enterococcus faecalis and three (IJ-06, IJ-21, and IJ-31) were Enterococcus faecium. Local processed cheese was the source of all enterococcal isolates, except E. faecium IJ-21 and IJ-31, which were isolated from indigenous yoghurt and butter samples, respectively. Bacterial isolates were sensitive to commonly used antibiotics except methicillin and kanamycin. They also lacked critical virulence determinants, mainly cytolysin (cyl), gelatinase (gel), enterococcal surface protein (esp), and vancomycin resistance (vanA and vanB). Polymerase chain reaction amplification identified that enterocin A and P genes were present in the genome of E. faecium IJ-06 and IJ-21, whereas the E. faecium IJ-31 genome showed only enterocin P genes. No amplification was observed for genes that corresponded with the enterocins 31, AS-48, L50A, and L50B, and ent 1071A and 1071B. There were no signals of amplification found for E. faecalis IJ-11, indicating that the antimicrobial activity was because of an enterocin different from those checked by PCR. Hence, the indigenous bacterial isolates have great potential for bacteriocin production and they had antibacterial activity against a variety of closely related species.
Non-typhoidal Salmonella serovars remain a potential threat to human health and many animals including beef cattle, broiler chickens, and pigs which possible sources of non-typhoidal salmonellosis in human. In this study, the cecal contents of slaughtered pigs were examined for Salmonella serovar prevalence. The characteristics of the isolates, including antimicrobial resistance patterns and virulence genes, were studied along with the reference strain S typhimurium ATCC 13311. Out of 640 sample, 137 Salmonella(21.4%) were isolated and their serovar were identified S typhimurium 83 strains(60.6%), S agona 10 strains(7.3%), S schwarzengrund 4 strains(2.9%), S derby 4 strains(2.9%), S ayinde 1 strains(0.7%), and untypable 35 strains(25.5%). All 83 S typhimurium strains(100%) were multi-drug resistance to at least 7 antibiotics, and 20 strains(24.1%) of 83 isolates were R-type ACSSuT. Examination of virulent gene by PCR revealed that 73 S typimurium field isolates(88%) have a invA gene and 24 strains(28.9%) have a spvC gene. Consequently, S typhimurium infection in slaughtered pigs was relatively to appear high prevalence in their herds which suggested that it should be necessary for herd health monitoring and surveillance.
After four years of cold storage, dimethachlon resistance of two laboratory-induced resistant Sclerotinia sclerotiorum isolates SCG7 and LA50 declined by 99.5% and 98.9%, respectively, and cross resistance to iprodione and procymidone also declined dramatically. Along with the decline of fungicide resistance, osmotic sensitivity to sodium chloride and glucose decreased tremendously; mycelial growth rate, sclerotia number and weight per potato dextrose agar (PDA) plate increased on average by 118.6%, 85. 5% and 64.5%, respectively; and virulence to detached leaves of oilseed rape increased by 72.7% on average. Significant negative correlations were detected between dimethachlon resistance levels and mycelial growth rate on PDA (r = -0.980, P = 0.021), and between resistance levels and lesion diameters on detached leaves of oilseed rape plants (r = -0.997, P = 0.002). These results have profound implications for assessing the potential risk for resistance development to dicarboximide fungicides in S. sclerotiorum.
Cytolysin produced by Vibrio vulnificus has been incriminated as one of the important virulence determinants in V. vulnificus infection. Ion selectivity of cytolysin-induced pores was examined in a CPAE cell, a cell line of pulmonary endothelial cell, using inside-out patch clamp techniques. In symmetrical NaCl concentration (140 mM), intracellular or extracellular application of cytolysin formed ion-permeable pores with a single channel conductance of $37.5{\pm}4.0$ pS. The pore currents were consistently maintained after washout of cytolysin. Replacement of $Na^+$ in bath solution with monovalent ions $(K^+,\;Cs^+\;or\;TEA^+)$ or with divalent ions $(Mg^{2+},\;Ca^{2+})$ did not affect the pore currents. When the NaCl concentration in bath solution was lowered from 140 to 60 and 20 mM, the reversal potential shifted from 0 to -11.8 and -28.2 mV, respectively. The relative permeability of the cytolysin pores to anions measured at $-40\;mV\;was\;Cl^-\;=\;NO_2^-\;{\geq}\;Br^-\;=\;I^-\;> \;SCN^-\;>\;acetate^-\;>\;isethionate^-\;>\;ascorbic acid^-\;>\;EDTA^{2-},$ in descending order. The cytolysin-induced pore current was blocked by $CI^-$ channel blockers or nucleotides. These results indicate that V. vulnificus cytolysin forms anion-selective pores in CPAE cells.
Fusarium graminearum is an important pathogen of cereal crops in many areas of the world causing head blight and ear rot of small grains. In addition to serious economic losses, this fungus produces mycotoxins, such as trichothecenes and zearalenone on diseased crops and has been a potential threat to human and animal health. To massively identify pathogenesis-related genes from F. graminearum, two representative strains (SCKO4 from rice and Z03643 from wheat) were mutagenized using restriction enzyme-mediated integration (REMI). In total, 20,DOD REMI transformants have been collected from the two strains. So far, 63 mutants for several traits involved in disease development such as virulence, mycotoxin production, and sporulation have been selected from 3,000 REMI transformants. Now, selected mutants of interest have being genetically analyzed using a newly developed outcross method (See Jungkwan Lee et al poster). In addition, cloning and characterization of genomic DNA regions flanking the insertional site in the genome of the mutants are in progress.
Dumroese, R. Kasten;Kim, Mee-Sook;James, Robert L.
The Plant Pathology Journal
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제28권3호
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pp.311-316
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2012
Fusarium root disease can be a serious problem in forest and conservation nurseries in the western United States. Fusarium inoculum is commonly found in most container and bareroot nurseries on healthy and diseased seedlings, in nursery soils, and on conifer seeds. Fusarium spp. within the F. oxysporum species complex have been recognized as pathogens for more than a century, but attempts to distinguish virulence by correlating morphological characteristics with results of pathogenicity tests were unsuccessful. Recent molecular characterization and pathogenicity tests, however, revealed that selected isolates of F. oxysporum are benign on Douglas-fir (Pseudotsuga menziesii) seedlings. Other morphologically indistinguishable isolates, which can be virulent, were identified as F. commune, a recently described species. In a replicated greenhouse study, inoculating Douglas-fir seedlings with one isolate of F. oxysporum prevented expression of disease caused by a virulent isolate of F. commune. Moreover, seedling survival and growth was unaffected by the presence of the F. oxysporum isolate, and this isolate yielded better biological control than a commercial formulation of Bacillus subtilis. These results demonstrate that an isolate of nonpathogenic F. oxysporum can effectively reduce Fusarium root disease of Douglas-fir caused by F. commune under nursery settings, and this biological control approach has potential for further development.
Kim, Jung-Beom;Oh, Kyung-Hwan;Park, Mi-Sun;Cho, Seung-Hak
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제23권5호
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pp.731-737
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2013
Seventy-four Shiga toxin-producing Escherichia coli (STEC) isolates belonging to the serotype O91:H21 were isolated from 1,643 asymptomatic human carriers in a STEC outbreak at Gwangju in Korea. Although the isolates did not cause any symptoms, all of them produced Shiga toxins 1 (Stx1) and 2 (Stx2). In order to determine why these strains cause no symptoms, we explored the differences in virulence potential between the asymptomatic STEC O91:H21 isolates and symptomatic STEC O91:H21 strains (ATCC 51435 and ATCC 51434). The asymptomatic STEC O91:H21 isolates showed strongly reduced cytopathic effects compared with the symptomatic strains when intact bacterial cells were used as an inoculant. Moreover, we found a reduced adherence phenotype when testing asymptomatic strains on HeLa cells. Real-time quantitative PCR results suggest that transcriptional repression of the genes encoding type-1 fimbriae occurs in the asymptomatic isolates but not in the symptomatic strains.
Jo, Kyungmin;Kim, Eun Jin;Yu, Hyun Jin;Yun, Cheol-Heui;Kim, Dong Wook
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제27권3호
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pp.610-615
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2017
When Shigella infect host cells, various effecter molecules are delivered into the cytoplasm of the host cell through the type III secretion system (TTSS) to facilitate their invasion process and control the host immune responses. Among these effectors, the S. flexneri effector OspF dephosphorylates mitogen-activated protein kinases and translocates itself to the nucleus, thus preventing histone H3 modification to regulate expression of proinflammatory cytokines. Despite the critical role of OspF, the mechanism by which it localizes in the nucleus has remained to be elucidated. In the present study, we identified a potential small ubiquitin-related modifier (SUMO) modification site within OspF and we demonstrated that Shigella TTSS effector OspF is conjugated with SUMO in the host cell and this modification mediates the nuclear translocation of OspF. Our results show a bacterial virulence factor can exploit host post-translational machinery to execute its intracellular trafficking.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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