The cDNAs derived from the coat protein (CP) genes of six plant RNA viruses, tobacco mosaic virus-pepper strains (TMV-P) and -ordinary strain (TMV-OM), potato virus Y (PVY), turnip mosaic virus (TuMV), cucumber mosaic virus (CMV) and potato leafroll virus (PLRV), were subcloned into the transcription vector, pSPT18, containing SP6 and T7 promoters. The digoxigenin (DIG)-labeled RNA polymerase after linearlization of the cloned pSPTs with XbaI or SacI, and were tested for their sensitivities for the detection of the six viruses. In slot-blot hybridization, dilution end points for the detection of TMV-P and TMV-OM were 10-4, while those of PVY, TuMV and CMV were 10-3. PLRV was detected at the dilution of 10-2. When each RNA probe was applied for the detection of the viruses in the preparations from the leaf disks (8 mm in diameter, and 12 to 15 mg in weight) of infected natural host plants, TMV-P, TMV-OM and TuMV could be detected from one disk, while PVY from 1 or 2 disks. CMV was detected in the preparation from two disks, and PLRV from three disks. With DIG-labeled RNA probe, PVY was detected at 5 days after inoculation, but with ELISA the virus was detected at 8 days after inoculation to tobacco (Nicotiana tabacum cv. Xanthi nc) plants on which symptoms appeared at 9 days after inoculation. No difference was observed in cross reaction between the RNA probes for the detection of TMV-P and TMV-OM.
A total of 163 virus infected pepper plants(Capsicum annuum L.) collected from various pepper growing regions in Korea were investigated on the presence of tobacco mosaic virus (TMV), cucumber mosaic virus (CMV), potato virus X(PVX), potato virus Y(PVY) and alfalfa mosaic virus (AMV) by serological methods. Van Slogteren's microprecipitin test was applied for the testing of TMV, PVX and PVY from infected plants, and Ouchterlony agar double diffusion test was used for CMV and AMV. Results obtained are as follows: 1. TMV, CMV, PVX, PVY and AMV were found to occur on the pepper plants growing in Korea. 2. The prevalence of each of these viruses among the 163 pepper plants investigated was in the order of CMV: 93 plants(57.0%)>TMV: 91 plants (55.8%)>AMV: 58 plants (35.6%)>PVY: 40 plants (24.5%)> PVX:6 plants(3.7%). 3. Among the 163 plants investigated, 72 plants (44%) showed infection with one kind of virus and 91 plants (56%) showed mixed infection with more than two different viruses. In general, heavier damage of the plants was observed from mixed infection. 4. The results of serological identification of pepper viruses coincided with those results obtained by sap inoculation experiment conducted at the Horticultural Experiment Station along with present investigation. Thus the serological techniques applied in this experiment proved to be very reliable for the identification of TMV, CMV, PVX, PVY and AMV from pepper plants infected with these viruses.
Kim, Jaedeok;Yang, Jung wook;Kwak, Hae-Ryun;Kim, Mi-Kyeong;Seo, Jang-Kyun;Chung, Mi-Nam;Lee, Hyeong-un;Lee, Kyeong-Bo;Nam, Sang Sik;Kim, Chang-Seok;Lee, Gwan-Seok;Kim, Jeong-Soo;Lee, Sukchan;Choi, Hong-Soo
The Plant Pathology Journal
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제33권5호
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pp.467-477
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2017
A nationwide survey was performed to investigate the current incidence of viral diseases in Korean sweet potatoes for germplasm and growing fields from 2011 to 2014. A total of 83.8% of the germplasm in Korea was infected with viruses in 2011. Commercial cultivars that were used to supply growing fields were infected at a rate of 62.1% in 2012. Among surveyed viruses, the incidence of five Potyvirus species that infect sweet potato decreased between 2012 and 2013, and then increased again in 2014. Representatively, the incidence of Sweet potato feathery mottle virus (SPFMV) was 87.0% in 2012, 20.7% in 2013 and then increased to 35.3% in 2014. Unlike RNA viruses, DNA viruses were shown to decrease continuously. The incidence of Sweet potato leaf curl virus (SPLCV) was 5.5% in 2003, 59.5% in 2011, and 47.4% in 2012. It then decreased continuously year by year to 33.2% in 2013, and then 25.6% in 2014. While the infection rate of each virus species showed a tendency to decline, the virus infection status was more variable in 2013 and 2014. Nevertheless, the high rate of single infections and mixed infection combinations were more variable than the survey results from 2012. As shown in the results from 2013, the most prevalent virus infection was a single infection at 27.6%, with the highest rate of infection belonging to sweet potato symptomless virus-1 (SPSMV-1) (12.9%). Compared to 2013, infection combinations were more varied in 2014, with a total of 122 kinds of mixed infection.
우리나라 씨감자에 발생하고 있는 잠복성바이러스의 종류와 이들의 감염상태를 조사하기 위하여 감자 원원종포, 원종포 그리고 원예시험장 등에서 수집한 외관상 무병 건전하게 보이는 감자와 외관상 바이러스병징이 뚜렷한 감자를 대상으로 혈청학적방법에 의해 바이러스 검정을 실시했다. 검정대상 바이러스는 Potato Virus X(PVX), Potato Virus S(PVS), Potato Virus M(PVM), 그리고 Potato Virus Y (PVY)의 4종이며, 바이러스의 검정은 van Slogteren의 미량침강법에 따라 실시했다. 결과는 다음과 같다. 1. 씨감자 생산포장에서 수집한 감자잎에서 PVX, PVS, PVM, 그리고 PVY가 검출되었는데 우리나라 감자에서 PVM이 검출되었다는 실험적 보고는 이것이 처음이다. 2. 외관상 건전하게 보이는 씨감자의 거의 $100\%$ PVX와 PVS에 약 $10\%$가 PVX+PVS+PVM에, 약 $4.5\%$가 PVX+PVS+PVY에, 그리고 $1\%$ 정도가 PVX+PVS+PVM+PVY에 각각 혼합감염되어 있었다. 3. PVX와 PVS만이 검출된 식물은 대부분 병징이 음폐되어 있었으나 PVX, PVS와 함께 PVY가 검출된 식물은 대부분 뚜렷한 병징을 나타내고 있었다. 4. 혈청학적 미량탐강법은 육안적인 관찰만으로는 검정이 어려운 PVX, PVS, PVM 및 mild strain의 PVY를 씨감자 생산지에서 대규모의 식물은 대상으로 신속정확히 검정하는데 애우 편리한 방법으로 생각된다.
Deep blue fluorescence of resorcin blue-stained callose was observed only in the potato leafroll virus (PLRV)-infected potato plants, but not in other potato viruses investigated. The plant sections stained with aniline blue showed non-specific fluorescence regardless of PLRV infection, which means that aniline blue is not suitable for the staining of callose induces by PLRV infection. The fluorescence of resorcin blue-stained callose was more easily detectable than autofluorescence by a direct fluorescence detection method because of its deep blue color. The lateral branch of lower leaves was turned out to be the best material for fluorescence observation of all plant parts tested. In comparison of diagnostic efficacy of this technique to enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), PLRV infected potato plants showed corresponding increment of the fluorescence of resorcin blue stained callose as absorption values in ELISA increased. In the future, the criteria measuring the fluorescence objectively are thought to be determined for the practical application to the diagnosis of potato leafroll disease.
For quarantine purpose, we selected five plant RNA viruses including Cucumber vein yellowing virus (CVYV), Cucurbit yellow stunting disorder virus (CYSDV), Potato aucuba mosaic virus (PAMV), Potato yellow dwarf virus (PYDV), and Tomato chlorosis virus (ToCV), which are not reported in Korea and cause serious economic losses to the family Cucurbitaceae or Solanaceae. To detect those viruses, we employed RT-PCR technique with specific oligonucleotide primer pairs and tested their detection efficiency for each virus. To design RT-PCR primers, coat protein was used for CVYV, CYSDV, and ToCV whereas RNA polymerase and nucleocapsid regions were used for PAMV and PYDV, respectively. The development of an RT-PCR based method proved a useful tool for rapid detection and identification of quarantine virus infections.
Andean potato latent virus (APLV)는 Group IV (+) sense ssRNA viruses, Tymovirus속으로 분류되는 식물 병원성 바이러스로, 주로 감자에 감염되며 국내 관리급 검역바이러스로 지정되어 있다. 본 연구에서는 검역현장에서 APLV를 신속 정확하게 진단할 수 있는 2개의 RT-PCR 프라이머 조합[조합 2 (404 bp)와 23 (501 bp)]과 각각의 nested PCR 조합($404{\rightarrow}259bp$ 및 $501{\rightarrow}349bp$)을 선발하였다. 또한, 진단에 양성대조군으로 활용할 수 있는 유전자변형 양성대조구를 개발하여 실험실 오염에 대한 검증이 가능하도록 하였다. 본 연구에서 개발한 PCR 기반 진단시스템은 향후 검역 현장에서 APLV를 검출하여 우리나라 식물검역에 기여할 것이라고 기대된다.
Silva-Beltran, Norma Patricia;Chaidez-Quiroz, Cristobal;Lopez-Cuevas, Osvaldo;Ruiz-Cruz, Saul;Lopez-Mata, Marco A.;Del-Toro-Sanchez, Carmen Lizette;Marquez-Rios, Enrique;Ornelas-Paz, Jose de Jesus
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제27권2호
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pp.234-241
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2017
Potato peels (PP) contain several bioactive compounds. These compounds are known to provide human health benefits, including antioxidant and antimicrobial properties. In addition, these compounds could have effects on human enteric viruses that have not yet been reported. The objective of the present study was to evaluate the phenolic composition, antioxidant properties in the acidified ethanol extract (AEE) and water extract of PP, and the antiviral effects on the inhibition of Av-05 and MS2 bacteriophages, which were used as human enteric viral surrogates. The AEE showed the highest phenolic content and antioxidant activity. Chlorogenic and caffeic acids were the major phenolic acids. In vitro analysis indicated that PP had a strong antioxidant activity. A 3 h incubation with AEE at a concentration of 5 mg/ml was needed to reduce the PFU/ml (plaque-forming unit per unit volume) of Av-05 and MS2 by 2.8 and $3.9log_{10}$, respectively, in a dose-dependent manner. Our data suggest that PP has potential to be a source of natural antioxidants against enteric viruses.
최근 감자 바이러스의 발생 양상은 과거에는 PLRV의 이병율이 높았으나 현재에는 PVY의 발생이 많아지고 있는 추세인데 이는 '대서'와 '추백' 같은 감수성 품종의 재배 면적의 증가와 바이러스 이병율이 높은 재배 환경에서의 채종 때문일 것이다. 특히 2기작 감자 포장에서의 당대 감염율을 보더라도 '대서'와 '추백'의 이병율이 높아 감수성 품종으로 '수미'와 '대지'는 이병율이 비교적 낮아 저항성으로 나타났다. 또한 2기작 감자 재배지대에서 PVY에 감수성인 '추백' 품종의 안전한 씨감자 생산을 위해서 주위에 일반감자 재배가 없는 격리가 양호한 환경에서의 채종과 그렇지 못한 환경에서의 채종을 비교하여 재감염 정도를 조사하였는데 조직 배양후 2세대 걸친 노지 재배에서 바이러스 이병율이 약 3배의 차이를 보여 씨감자 생산에서 채종 환경의 중요성을 입증한 결과로 판명되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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