Antigen-specific T cell clones were obtained from mice immunized with Fusobacterium nucleatum ATCC 10953(F .nucleatum) and/or Porphyromonas gingi valis 381(P. gingivalis). 10 Balb/c mice per group were immunized with F. nucleatum followed by P. gingivalis, or with P. gingivalis alone by intraperitoneal injection of viable microorganisms. Spleen T cells were isolated and stimulated in vitro with viable P. gingivalis cells to establish P. gingivalisspecific T cell clones. T cell phenotypes and cytokine profiles were determined along with T cell responsiveness to F .nucleatum or P. gingivalis. Serum IgG antibody titers to F. nucleatum or P. gingivalis were also determined by ELISA. All the T cell clones derived from mice immunized with F. nucleatum followed by P. gingivalis demonstrated Th2 subsets, while those from mice immunized with P. gingivalis alone demonstrated Th1 subsets based on the flow cytometric analysis and cytokine profiles, All T cells clones from both groups were cross-reactive to both P. gingivalis and F. nucleatum antigens. Phenotypes of T cell clones were all positive for CD4. Mean post-immune serum IgG antibody levels to F. nucleatum or P . gingivalis were significantly higher than the pre-immune levels(p <0.01, respectively). There were no significant differences in the antibody titers between the two groups. It was concluded that P. gingivalis-specific T cells initially primed by cross-reactive F. nucleatum antigens were polarized to Th2 subsets, while T cells stimulated with P. gingivalis alone maintained the profile of Th1 subset.
Ji, Min-Kyung;Park, Sang-Won;Lee, Kwangmin;Kang, In-Chol;Yun, Kwi-Dug;Kim, Hyun-Seung;Lim, Hyun-Pil
The Journal of Advanced Prosthodontics
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v.7
no.2
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pp.166-171
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2015
PURPOSE. The aim of this study was to evaluate antibacterial activity and osteoblast-like cell viability according to the ratio of titanium nitride and zirconium nitride coating on commercially pure titanium using an arc ion plating system. MATERIALS AND METHODS. Polished titanium surfaces were used as controls. Surface topography was observed by scanning electron microscopy, and surface roughness was measured using a two-dimensional contact stylus profilometer. Antibacterial activity was evaluated against Streptococcus mutans and Porphyromonas gingivalis with the colony-forming unit assay. Cell compatibility, mRNA expression, and morphology related to human osteoblast-like cells (MG-63) on the coated specimens were determined by the XTT assay and reverse transcriptase-polymerase chain reaction. RESULTS. The number of S. mutans colonies on the TiN, ZrN and $(Ti_{1-x}Zr_x)N$ coated surface decreased significantly compared to those on the non-coated titanium surface (P<0.05). CONCLUSION. The number of P. gingivalis colonies on all surfaces showed no significant differences. TiN, ZrN and $(Ti_{1-x}Zr_x)N$ coated titanium showed antibacterial activity against S. mutans related to initial biofilm formation but not P. gingivalis associated with advanced periimplantitis, and did not influence osteoblast-like cell viability.
Phagocytosis is a fundamental process in which phagocytes capture and ingest foreign particles including pathogenic bacteria. Several oral pathogens have anti-phagocytic strategies, which allow them to escape from and survive in phagocytes. Impaired bacteria phagocytosis increases inflammation and contributes to inflammatory diseases. The purpose of this study is to investigate the influences of various agents on oral pathogenic phagocytosis. To determine phagocytosis, Streptococcus mutans, Fusobacterium nucleatum, Aggregatibacter actinomycetemcomitans and Porphyromonas gingivalis were stained with 5-(and-6)-carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester (CFSE), and was measured using flowcytometery and confocal microscopy. The influencing factors on phagocytosis were evaluated through the pretreatment of ROS inhibitor (N-acetyl-L-cysteine (NAC)), lysozyme, potassium chloride (KCI) and adenosine triphosphate (ATP) in THP-1 cells. Expression of pro-inflammatory cytokines was determined by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). The phagocytosis of various bacteria increased in a MOI-dependent manner. Among the tested bacteria, phagocytosis of P. gingivalis showed the highest fluorescent intensity at same infection time. Among the tested inhibitors, the NAC treatment significantly inhibited phagocytosis in all tested bacteria. In addition, NAC treatment indicated a similar pattern under the confocal microscopy. Moreover, NAC treatment significantly increased the bacteria-induced secretion of $IL-1{\beta}$ among the tested inhibitors. Taken together, we conclude that the phagocytosis occurs differently depending on each bacterium. Down-regulation by ROS production inhibited phagocytosis and lead increased of oral pathogens-associated inflammation.
Park, Taehun;Cho, Jeong Hun;Sung, Youngeun;Cho, Jun-Cheol;Shin, Kyeho
Journal of the Society of Cosmetic Scientists of Korea
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v.40
no.2
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pp.187-193
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2014
Dental caries are one of the most common oral diseases and Streptococcus mutans (S. mutans) plays an important role in the initiation and progression of dental caries. Oral malodor is primarily the result of microbial metabolism such as Porphyromonas gingivalis (P. gingivalis) that produce volatile sulfur compounds (VSCs), causing oral malodor. Prevotella intermedia (P. intermedia) is known as typical periodontopathic bacteria, and periodontal disease is chronic inflammatory disease that leads to damage of gingival connective tissue and alveolar bone, eventually loss of teeth. In this study, we investigated antimicrobial effect of mouthwash containing cetylpyridinium chloride (CPC), sodium fluoride (NaF), green tea water extract and pine needles water extract against cariogenic and periodontopathic bacteria sucn as S. mutans, P. gingivalis and P. intermedia. As a result, the reduction ratios of S. mutans and P. gingivalis were 4.00 Log and 4.68 Log reduction for 30 s, and P. intermedia were 2.40 Log reduction for 30 s and 2.70 Log reduction for 60 s. Dentocult SM Strip mutans (SM Strip) provides easy detection of visual data showing a significant inhibition on S. mutans. In conclusion, we expected that mouthwash containing CPC, NaF, green tea water extract and pine needles water extract could help preventing the dental disease like dental caries and oral malodor.
The treatment and prevention of periodontitis is focused on the reduction and the elimination of pathogenic bacteria, especially A. actinomycetemcomitans and black pigmented bacteria such as P. gingivalis. To prevent recurrent disease, the recolonization of these bacteria should be inhibited in the periodontal pocket. Since the replacement therapy was introduced in periodontics by Hillman et al, Jeong et al reported that hydrogen peroxide-producing Lactobacillus acidophilus V-20 completely inhibited P. gingivalis and A. actino - mycetemcomitans in vitro and mouth gargling with Lactobacillus acidophilus V-20 in periodontitis patients during the maintenance phase improved clinical condition and reduced the No. of P. gingivalis and A. actinomycetemcomitans at 4 weeks of treatment. Prior to replacement therapy with bacteria, dynamics of microbial colonization should be considered. This study was performed to evaluate the change in the viable cell number of Lactobacilli and P. gingivalis after oral administration of L. acidophilus V-20. In periodontal health, gargling increased the No. of Lactobacilli in saliva, buccal mucosa, supragingival plaque from the first week, which maintained for 2-3 weeks after gargling stop, and then returned to the undetectable baseline level at the ninth week. In the periodontal pocket of moderate periodontitis patients, daily irrigation for 1 week and weekly irrigation for subsequent 3 weeks decreased the viable cell number of P. gingivalis during the period of irrigation and increased the number of Lactobacilli, which was maintained from the second to the seventh week. L. acidophilus V-20 was isolated for the first 2 weeks of oral administration, and the 3 different strains of Lactobacilli were isolated continuously for remaining period and identified as L. ali - mentarius, L. casei subspecies casei and L. fructosus. The first two Lactobacilli strains completely inhibited P. gingivalis in vitro and all the isolated Lactobacilli strains reduced the artificial plaque formation by 55-63%. These results showed that mouth gargling or pocket irrigation with L. acidophilus V-20 increased the No. of intraoral Lactobacilli and caused to decrease in the No. of P. gingivalis. This suggests that the replacement therapy by these Lactobacilli might be useful in the maintenance care of periodontal patients.
Song, YuRi;Kim, SeYeon;Park, Mee Hee;Na, Hee Sam;Chung, Jin
International Journal of Oral Biology
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v.42
no.1
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pp.17-23
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2017
Background: Periodontitis is generally a chronic disorder characterized by the breakdown of tooth-supporting tissues. P. gingivalis, a Gram-negative anaerobic rod, is one of the major pathogens associated with periodontitis. Frequently, P. gingivalis infection leads to cell death. However, the correlation between P. gingivalis-induced cell death and periodontal inflammation remains to be elucidated. Among cell deaths, the death of immune cells appears to play a significant role in inflammatory response. Thus, the aim of this study was to examine P. gingivalis-induced cell death, focusing on autophagy and apoptosis in THP-1 cells. Methods: Human acute monocytic leukemia cell line (THP-1) was used for all experiments. Autophagy induced by P. gingivalis in THP-1 cells was examined by Cyto ID staining. Intracellular autophagic vacuoles were observed by fluorescence microscopy using staining Acridine orange (AO); and 3-methyladenine (3-MA) was used to inhibit autophagy. Total cell death was measured by LDH assay. Cytokine production was measured by an ELISA method. Results: P. gingivalis induced autophagy in an MOI-dependent manner in THP-1 cells, but 3-MA treatment decreased autophagy and increased the apoptotic blebs. P. gingivalis infection did not increase apoptosis compared to the control cells, whereas inhibition of autophagy by 3-MA significantly increased apoptosis in P. gingivalis-infected THP-1 cells. Inhibition of autophagy by 3-MA also increased total cell deaths and inflammatory cytokine production, including $IL-1{\beta}$ and $TNF-{\alpha}$. Conclusion: P. gingivalis induced autophagy in THP-1 cells, but the inhibition of autophagy by 3-MA stimulated apoptosis, leading to increased cell deaths and pro-inflammatory cytokines production. Hence, the modulation of cell deaths may provide a mechanism to fight against invading microorganisms in host cells and could be a promising way to control inflammation.
Park, Min Jeong;Kim, Hye Soo;Kim, Han Bi;Lee, Sang Gyun;Cho, Soo Jeong
Journal of Life Science
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v.32
no.10
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pp.792-802
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2022
In this study, the antioxidant and antibacterial activities of Sophora japonica extracts were investigated to determine the potential of S. japonica as a functional food and medicinal materials. S. japonica was divided into flowers, fruits, and branches, and ethanol extraction was used. The total polyphenol and flavonoid contents were significantly higher in the flower and fruit extracts than in the branch extracts, but the ABTS and DPPH radical scavenging activity and ORAC value were higher in the branch extracts. Among the ethanol extracts of S. japonica, branch extracts showed strong antibacterial activity against Porphyromonas gingivalis, and the MIC was 0.2 mg/ml. Branch extracts showed bacteriostatic activity against P. gingivalis at a concentration of 0.4 mg/ml or less and bactericidal activity at a concentration of 0.6 mg/ml or more. Biofilm biomass production and cell growth of P. gingivalis in the culture medium treated with the branch extract at a concentration of 0.2-2.0 mg/ml were significantly decreased in a concentration-dependent manner. In addition, the mRNA expression of fimA and mfa1 associated with fimbriae formation in these cultures was suppressed in a concentration-dependent manner. Based on these results, S. japonica branch extracts can be used as functional food and medicinal materials, as demonstrated by their antioxidant and antibacterial activities against P. gingivalis and the inhibition of biofilm formation resulting from P. gingivalis.
본 연구는 P. gingivalis biofilm을 쥐에 면역했을 경우 숙주의 면역체계중에서 T 임파구가 어떻게 반응하는가를 비교연구한 것으로 P. gingivalis biofilm은 단일 세균으로 구성된 것과, F. nucleatum과 복합된 것 공히 T 임파구가 유리하는 cytokine 중에서 IFN-gamma의 현저한 감소를 초래하는 것으로 판명되어, 향후 숙주 면역방어체계에 미치는 영향을 연구하는 중요한 지침자료를 제공해 주었다.
There are normal inhabitants doing medically useful functions in the body. There are many kinds of bacteria performing specific functions in the oral cavity. Two strains of lactic acid bacteria were isolated from normal inhabitants of children 's oral cavity, which inhibited the the production of halitosis by anaerobic bacteria. The authors identified the isolates by the lest using API 50 CHL medium kit. 1. Two isolates were Gram-positive bacilli and produced hydrogen peroxide. 2. The optical density was 1.286 in the supernatant of Fusobacterium nucleatum after vortexing for 30 minutes, whereas in the supernatant of combined Fusobacterium nucleatum and each isolate, they were reduced to 0.628 and 0.497, which the percentages of coaggregation between them were 29.4% and 57.8%, respectively. 3. The optical density of Fusobacterium nucleatum precipitate was 1.794 in the culture media containing cysteine and $FeSO_4$, being reduced to 1.144 and 0.915 in the coaggregated precipitates of Fusobacterium nucleatum and each isolate. 4. The optical density of Porphyromonas gingivalis precipitate was 1.932 in the culture media, being reduced to 1.170 and 1.266 in the coaggregated precipitates of Porphyromonas gingivalis and each isolate. 5. When two isolates were tested with API 50 CHL medium kit, those were identified as Lactobaciallius salivarius and Lactobacillus delbrueckii subsp. lactis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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