An in silico approach was developed to survey the genes expressed in four internal organs of pig: liver, kidney, spleen and small intestine. The major procedures of the approach included: (1) BLAST searching against GenBank "est_others" database using human cDNA sequences as queries to screen the porcine orthologous expressed sequence tags (ESTs), (2) classifying the porcine ESTs records by resources according to certain criteria and (3) analyzing data for ESTs specifically expressed in each organ. In order to do so, four Java programs were developed. Based on the ESTs available in the GenBank database, it was found that there were at least 2,100 genes expressed in these four organs, including 128 in the liver, 81 in the kidney, 780 in the spleen, and 1,423 in the small intestine respectively (a few genes co-expressed in these tissues). Gene expression patterns, such as co-expressed genes, preferentially expressed genes and basic active genes were also compared and characterized among these organs. This study provides a comprehensive model on how to use the bioinformatics approach and Genbank databases to facilitate the discovery of new genes in livestock species.
Wang, Y.F.;Yu, M.;Liu, B.;Fan, B.;Wang, H.;Zhu, M.J.;Li, K.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.17
no.7
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pp.897-902
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2004
PSMC5 subunit, which belongs to the 26S proteasomal subunit family, plays an important role in the antigen presentation mediated by MHC class I molecular. Full-length cDNA of porcine PSMC5 was isolated using the in silico cloning and rapid amplification of cDNA ends (RACE). Amino acid was deduced and the primary structure was analyzed. Results revealed that the porcine PSMC5 gene shares the high degree of sequence similarity with its mammalian counterparts at both the nucleotide level and the amino acid level. The RT-PCR was performed to detect the porcine PSMC5 expression pattern in seven tissues and the result showed that high express level was observed in spleen, lung, marrow and liver while the low express level was in muscle. The full-length genomic DNA sequence of porcine PSMC5 gene was amplified by PCR and the genomic structure revealed that this gene was comprised by 12 exons and 11 introns. Best alignment of the cDNA and genomic exon DNA sequence presents 4 mismatches and this information potentially bears further study in gene polymorphisms.
Kim, Jae-Hoon;Hwang, Eui-Kyung;Kim, Yong-Joo;Sohn, Hyun-Joo
Korean Journal of Veterinary Pathology
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v.1
no.2
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pp.125-134
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1997
Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus infection (PRRSV) was confirmed by serology histopathology immunohistochemistry and bacteriologic examination in young pigs. Four suckling and six weaned piglets submitted from three different farms showed coughing sneezing labored rapid abdominal respiration lethargy and anorexia. Grossly apical and cardiac lung lobes appeared mottled with pale to dark tan discoloration. Submandibular and bronchial lymph nodes were tan and enlarged. All piglets were seropositive for PRRSV antibodies by the indirect immunofluorescent antibody(IFA) test. Microscopically lung lesions were characterized by hyperplasia and hypertrophy of type 2 pneumocytes infiltration of mononuclear cells in alveolar intersitium accumulation of necrotic debris in alveolar spaces accompanied by proliferation of alveolar multinucleated syncytial cells. Using immunohistochemical technique PRRSV antigens were demonstrated in alveolar macrophages and type 2 pneumocytes in histologic lung tissue sections. Also PRRSV antigens were detected in brain lymph nodes spleen and heart. Additionally piglets showed nonsuppurative meningoencephalitis mandibular necrotic lymphadenopathy splenic atrophy and myocardial necrosis.
The full-length cDNA of the porcine peroxisomal ${\Delta}^3$,${\Delta}^2$-enoyl-CoA isomerase (PECI) gene encodes a monofunctional peroxisomal ${\Delta}^3$,${\Delta}^2$-enoyl-CoA isomerase. Cloning and sequencing of the porcine PECI cDNA revealed the presence of an 1185-base pair open reading frame predicted to encode a 394-amino acid protein by the 5'rapid amplification of cDNA ends (5'RACE) and EST sequences. The porcine PECI gene was expressed in seven tissues (heart, liver, spleen, lung, kidney, skeletal muscle, fat) which was revealed by reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RT-PCR). The porcine PECI was mapped to SSC71/2 p11-13 using the somatic cell hybrid panel (SCHP) and the radiation hybrid panel (RH) (LOD score 12.84). The data showed that PECI was closely linked to marker S0383. A C/T single nucleotide polymorphism in PECI exon 10 (3'UTR) was detected as a PvuII PCR-RFLP. Association analysis in our experimental pig population showed that different genotypes of PECI gene were significantly associated with the Average Backfat thickness (ABF) (p<0.05) and Buttock backfat thickness (p<0.01).
Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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1993.04a
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pp.157-157
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1993
TMI는 알라닌과 글리신이 풍부한 18개의 아미노산으로 이루어져 분자량이 약 1,400Da인 물질이었으며, 가수분해 효소 처리후 억제력의 변화를 보이지 않았고, Porcine liver, spleen, testis에서 정제한 PM II에 대하여 TMI가 비상경적 억제작용을 하는 것으로 나타났으며, Ki value는 각각 300 nM, 250 nM 297 nM이었다. 그리고 돼지 간장에서 부분정제한 PM I, PM II, PM III, phospholipid methytransferase에 대한 정제된 TMI의 영향을 조사해 보면 각각 33%, 47%, 31%, 35%의 억제효과를 나타내었다.
To study the effect of dietary docosahexaenoic acid (DHA) enrichment on the expression of hepatic genes in pigs, weaned, crossbred pigs (30 d old) were fed diets supplemented with either 2% tallow or DHA oil for 18 d. Hepatic mRNA was extracted. Suppression subtractive hybridization was used to explore the hepatic genes that were specifically regulated by dietary DHA enrichment. After subtraction, we observed 288 cDNA fragments differentially expressed in livers from pigs fed either 2% DHA oil or 2% tallow for 18 d. After differential screening, 7 genes were found to be differentially expressed. Serum amyloid A protein 2 (SAA2) was further investigated because of its role in lipid metabolism. Northern analysis indicated that hepatic SAA2 was upregulated by dietary DHA enrichment (p<0.05). In a second experiment, feeding 10% DHA oil for 2d significantly increased the expression of SAA2 (compared to the 10% tallow group; p<0.05). The porcine SAA2 full length cDNA sequence was cloned and the sequence was compared to the human and mouse sequences. The homology of the SAA2 amino acid sequence between pig and human was 73% and between pig and mouse was 62%. There was a considerable difference in SAA2 sequences among these species. Of particular note was a deletion of 8 amino acids, in the pig compared to the human. This fragment is a specific characteristic for the SAA subtype that involved in acute inflammation reaction. Similar to human and mouse, porcine SAA2 was highly expressed in the liver of pigs. It was not detectable in the skeletal muscle, heart muscle, spleen, kidney, lung, and adipose tissue. These data suggest that SAA2 may be involved in mediation of the function of dietary DHA in the liver of the pig, however, the mechanism is not yet clear.
Guan, H.P.;Fan, B.;Li, K.;Zhu, M.J.;Yerle, M.;Liu, Bang
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.19
no.7
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pp.931-937
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2006
The full-length cDNA of the porcine SMPX gene was obtained by the rapid amplification of cDNA ends (RACE). The nucleotide sequences and the predicted protein sequences share high sequence identity with both human and mouse. The promoter of SMPX was sequenced and then analyzed to find the promoter binding sites. The reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RT-PCR) revealed that SMPX has a high level of expression in heart and skeletal muscle, a very low expression in lung and spleen and no expression in liver, kidney, fat and brain. Moreover, SMPX has a differential expression level in skeletal muscle, the expression in 65-day embryos being higher than other stages. The porcine SMPX was mapped to SSCXp24 by using a somatic cell hybrid panel (SCHP) and was found closely linked to SW1903 using the radiation hybrid panel IMpRH. An A/G single nucleotide polymorphism (PCR-RFLP) in the 3'-untranslated region (3'-UTR) was detected in eight breeds. The analysis of allele frequency distribution showed that introduced pig breeds (Duroc and Large White) have a higher frequency of allele A while in the Chinese indigenous pig breeds (Qingping pig, Lantang pig, YushanBlack pig, Large Black-White pig, Small Meishan) have a higher frequencies of allele G. The association analysis using an experimental population (188 pigs), which included two cross-bred groups and three pure-blood groups, suggested that the SNP genotype was associated with intramuscular fat content.
Multiplex PCR and immunohistochemistry were used to detect and differentiate between porcine circovirus (PCV) type-I and the PCV associated with postweaning multisystemic wasting syndrome (PMWS). Unique DNA product to PCV type-II was confirmed the some organs including lymph nodes, tonsil and spleen from eight pigs in Jeju by multiplex PCR. In this study, the samples were tested by a multiplex PCR assay to determine the type of PCV in each case; all cases were PCV type-II positive. PCV type-II was identified not only in typical PMWS cases, but also in field cases submitted with various clinical histories, some of which were not suggestive of PMWS. Immunohistochemically PCV type-II antigen was detected in macrophage-like cells in the tonsil, liver, lymph nodes and spleen, while some hepatocytes and renal tubular epithelial cells were also positive to the virus. This study suggested that PCV type-II is one of the causative agents of PMWS as well as the major type of PCV in the affected pigs in Jeju.
A 7-year-old Jeju native boar was requested to the Veterinary Pathology Laboratory of Cheju National University with a clinical signs of anorexia, melena, lethargy and sudden death. At necropsy, four coalescing firm masses were occupied in the abdominal cavity between ventral surface of stomach and pancreas. Individual mass was a yellowish white in color and up to 6 cm in diameter. These masses were not encapsulated and bulged from the cut surface. Liver and spleen were enlarged and pale nodules were presented in these tissues. Some yellowish white nodules up to 5 mm in diameter were scattered in kidneys. Histopathologically, lymphoblastic tumor cells were occupied in the abdominal masses, multifocal areas of liver, kidneys, and spleen. Morphologically lymphoblastic tumor cells were round to oval in shape, and medium to large in size. They had round to oval nuclei, moderate amount of eosinophilic cytoplasm, and many mitotic figures. Immunohistochemistry revealed that tumor cells were CD3-positive and $CD79{\alpha}$-negative, consistent with T-cell lineage. Based on gross, microscopic findings and immunohistochemistry, this case was diagnosed as porcine multi-centric T cell lymphosarcoma. In animals, as in human, the T-cell lymphomas are generally more aggressive than B cell types and respond less well to therapy. In our best knowledge, this is the first report for porcine T cell lymphosarcoma in Korea.
Jun, Moo Hyung;Chung, Un Ik;Park, Bong Kyun;Kim, Kyo Joon;Lee, Hun Jun
Korean Journal of Agricultural Science
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v.12
no.1
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pp.153-161
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1985
As a preliminary step for production of large quantities of porcine leucocyte interferon(Por IFN-${\alha}$), various factors such as the sources of leucocytes, inducers and culture conditions were investigated. In addition, an assay system for the potency of porcine interferon was developed in a micro-system by using porcine kidney cell line, PK-15, and vesicular stomatitis virus. By the experiments, it was found that the porcine leucocyte interferon was synthesized more effectively in the leucocyte suspension with the higher viability and the lesser erythrocyte contamination. Regarding cell sources, the peripheral leucocytes produced a consistently higher unit of interferon than the spleen cells. When the efficiency of inducers was compared, the Sendai virus at the concentration of 125 HA unit/ml was found to be more effective for porcine leucocyte interferon production than the Newcastle disease virus. Average potency of 9 batches of the crude interferon measured by the established assay system was 1,200 unit/ml.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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