Preliminary Studies on Production of Porcine Leucocyte Interferon

돼지 Leucocyte Interferon 생산(生産)에 대한 기초연구(基礎硏究)

As a preliminary step for production of large quantities of porcine leucocyte interferon(Por IFN-${\alha}$), various factors such as the sources of leucocytes, inducers and culture conditions were investigated. In addition, an assay system for the potency of porcine interferon was developed in a micro-system by using porcine kidney cell line, PK-15, and vesicular stomatitis virus. By the experiments, it was found that the porcine leucocyte interferon was synthesized more effectively in the leucocyte suspension with the higher viability and the lesser erythrocyte contamination. Regarding cell sources, the peripheral leucocytes produced a consistently higher unit of interferon than the spleen cells. When the efficiency of inducers was compared, the Sendai virus at the concentration of 125 HA unit/ml was found to be more effective for porcine leucocyte interferon production than the Newcastle disease virus. Average potency of 9 batches of the crude interferon measured by the established assay system was 1,200 unit/ml.

고단위(高單位)의 porcine leucocyte interferon(For IFN-${\alpha}$)을 대량생산(大量生産)하기 위한 기초연구(基礎硏究)로써 백혈구(白血球) 분리법(分離法), 백혈구(白血球)의 성상(性狀) 및 inducer에 따른 IFN 생산효과(生産效果) 시험(試驗)을 하였고 Por IFN-${\alpha}$의 역가측정(力價測定)을 micro-system에 확립(確立)하기 위해 시험(試驗)을 수행(遂行)하였던 바 다음과 같은 결과(結果)를 얻었다. 1. 돼지 말초백혈구(末梢稍白血球)를 분리(分離)하기 위해서 4 가지 방법(方法)을 응용(應用)하던 바 백혈구(白血球) 분리법(分離法)은 buffy coat 方法에서 가장 높았으나 적혈구(赤血球) 혼입율(混入率)이 높았고 Ficoll-paque 방법(方法)에서는 백혈구(白血球) 분리율(分離率)은 중등도(中等度)였으나 적혈구(赤血球) 혼입율(混入率)은 가장 낮았다. 2. 말초백혈구(末梢白血球)와 비장세포(脾臟細胞)의 활성도(活性度)는 IFN 생산(生産)에 영향(影響)을 주었으며 세포활성도(細胞活性度)가 높을수록 IFN 생산효능(生産效能)이 높았으며, 적혈구(赤血球)의 혼입도(混入度)가 높을수록 IFN 생산효능(生産效能)은 낮았다. 말초백혈구(末梢白血球)는 비장세포(脾臟細胞)에 비해 1.7배(倍)의 높은 IFN 생산효과(生産效果)가 인정(認定)되었다. 3. Inducer로 사용(使用)된 Sendai virus(Cantell 주(株))는 Newcastle disease virus(Lasota 주(株)) 보다 IFN 생산효과(生産效果)가 5.5 배(倍) 높았다. 4. 본(本) 시험(試驗)에서 확립(確立)된 micro-IFN assay 법(法)의 재현성(再現性)을 검사(檢査)한 바 4회반복시험(回反復試驗)에서 편차(偏差)는 0.05~0.21로 나타났다. 5. 시험생산(試驗生産) 9롯트의 IFN 역가(力價)는 330 내지 4,700 unit/ml로써 평균(平均) 1,200 unit/ml이었다.