The cultural condition of Enterobacter agglomerans U-1, a polysaccharide producing soil bacterium, was examined. The optimal medium composition was that contains the following components per liter of distilled water; $sucrose(23.75\;g/L),\;peptone(2.06\;g/L),\;yeast\;extract(0.5\;g/L),\;KH_2PO_4(1.0\;g/L)$ and $MgSO_4{\cdot}7H_2O(1.0 g/L)$. The optimum temperature for polysaccharide production was $30^{\circ}C$, where 8.5 g/L of polysaccharide was produced. The apparent viscosity of fermentation broth after 3 days was 240 mPa.s. at $70sec^{-1}$. The product yield and specific productivity were 36% and 142.07 mg/g/h.
Melhylovorus sp. strain SS1 grown on methanol was found to show activities of key enzymes of the linear route, $NAD^+$-linked formaldehyde and formate dehydrogenases, and the cyclic route, hexulose-6-phosphate synthase, glucose-6-phosphate isomerase, glucose-6-phosphate dehydrogenase, and 6-phosphogluconate dehydrogenase, for formaldehyde oxidation. The activities of the cyclic route enzymes were higher than those of the linear route enzymes. The bacterium also exhibited activities of the key enzymes of the ribulose monophosphate and Entner-Doudoroff pathways and transaldolase involved in the formaldehyde assimilation and the enzymes involved in the biosynthesis of extracellular polysaccharide. Cells grown in the presence of 2.3 mM ammonium sulfate were higher in the productivity of extracellular polysaccharide, but lower in the growth yield, than those grown in the presence 7.6 mM ammonium sulfate. The activities of 6-phosphogluconate dehydrogenase, phosphoglucomutase, and UDP-pyrophosphorylase in cells grown under nitrogen-limited condition were higher, but that of 6-phosphogluconate dehydratase/2-keto-3-deoxy-6-phosphogluconate aldolase was lower, than those in cells grown in the presence of sufficient amount of nitrogen source.
Maca roots (Lepidium meyenii) are an important medicinal herb that have long been used by the Andes-indigenous peoples and South Americans. In Korea, recently, it has attracted attention as a health food material because of nutritional values and physiological activities. The purpose of this study was to investigate the industrial applicability of maca (red and golden varieties; R&G) as immunostimulating materials. In the macrophage stimulating assay using RAW 264.7 cells at 125~500 ㎍/mL of non-cytotoxicity doses, G-HW showed the most potent production of TNF-α, IL-6 and nitric oxide compared to red maca or the other extracts. The general component analysis results showed that all extracts comprised more than 90% neutral sugars with small amounts of uronic acid and protein. Meanwhile, component sugar analysis showed the difference in the content of uronic acids of cold- and hot-water extract. Additionally, the further fractionation of G-HW into crude polysaccharide (G-CP) greatly enhanced the macrophage stimulating activity, and G-CP contained macromolecules over 144 kDa, comprised mainly of glucose and galacturonic acid (51.0 and 34.9%). In conclusion, crude polysaccharide from maca showed industrial applicability as immunostimulating material, and especially golden maca showed higher macrophage stimulating activity than red maca.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.33
no.7
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pp.1085-1091
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2004
Bu-Zhong-Yi-Qi- Tang extracts is a traditional oriental medicine in a mixture type exhibiting strong anti-bacterial, analgesic, and chemopreventive activities. In this study, we have evaluated effects of the total and polysaccharide fraction of Bu-Zhong-Yi-Qi- Tang extracts on the T cell proliferation, cytokine production, and induction of IL-2 receptor and MHC class n. For this experiment, we established CD4$^{+}$ CD8$^{[-10]}$ T cell line producing IL-2 and IFN-${\gamma}$ when stimulated with ovalbumin antigen in the presence of antigen presenting cells. The significant effect of Bu-Zhong-Yi-Qi-Tang on antigen-induced T cell proliferation in the presence of antigen presenting cells was observed. The proliferation and IFN-${\gamma}$ production of T cells was increased in a dose dependent manner, and expression of IL-2 receptor on T cells and MHC class n molecule on antigen presenting cells was also induced in the presence of Bu-Zhong-Yi-Qi-Tang polysaccharide fraction. It was demonstrated that polysaccharide fraction of Bu-Zhong-Yi-Qi-Tang stimulates the antigen-induced T cell proliferation and the production of IFN-${\gamma}$ possibly through the increase of IL-2 receptor and MHC class n expression. Therefore Bu-Zhong-Yi-Qi-Tang can be regarded as a natural and useful immunomodulator having a relatively nonotoxic property. Further studies are needed to better characterize the nature of Bu-Zhong- Yi-Qi-Tang extract.
Cordyceps militaris, an entomopathogenic fungus belonging to the class Ascomycetes, has been reported to have beneficial biological activities such as hypoglycemic, anti-inflammatory, antitumor, antimetastatic, hypolipidemic, immunomodulatory, and antioxidant effects. In this study, the crude water-soluble polysaccharide CMP, which was obtained from the fruiting body of C. militaris by hot water extraction and ethanol precipitation, was fractionated by DEAE-cellulose and Sepharose CL-6B column chromatographies. This process resulted in three polysaccharide fractions, termed CMP Fr I, CMP Fr II, and CMP Fr III. Of these fractions, CMP Fr II, with an average molecular mass of 127 kDa, was able to upregulate effectively the phenotypic functions of macrophages such as NO production and cytokine expression. The chemical property of the stimulatory polysaccharide, CMP Fr II, was determined based on its monosaccharide composition, which consisted of glucose (56.4%), galactose (26.4%), and mannose (17.2%). Its structural characteristics were investigated by a combination of chemical and instrumental analyses, including methylation, reductive cleavage, acetylation, Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR), and gas chromatography-mass spectrometry (GCMS). Results indicated that CMP Fr II consisted of the (1${\rightarrow}$4) or (1${\rightarrow}$2) linked glucopyranosyl or galactopyranosyl residue with a (1${\rightarrow}$2) or (1${\rightarrow}$6) linked mannopyranosyl, glucopyranosyl, or galactopyranosyl residue as a side chain. The configuration of the ${\beta}$-linkage and random coil conformation of CMP Fr II were confirmed using a Fungi-Fluor kit and Congo red reagent, respectively.
The antitumor activity of protein-polysaccharide produced by a strain, Vibrio anguilfarum, No. 17 isolated from sea water was investigated. The extracellular protein,polysaccharide used in this experiment was obtained through the cultivation of Vibrio anguillarum No. 17 at $25^{\circ}C$ for 5-7 days in the sea water medium containing 0.5% peptone and 0.1% yeast extract. The compositional monosaccharides of protein-polysaccharide were xylose, mannose, galactose, glucose and fructose in order and its major amino acids were glutamic acid, serine and aspartic acid. The antitumor activity of the protein-polysaccharide at a dose of 0.5mg/kg/day or 5mg/kg/day against Sarcoma-180 in mice were 20.9% and 43.9%, respectively.
To find antitumor components, a protein-bound polysaccharide fraction was obtained by extracting with hot water and precipitating with ethanol from the carpophores and the cultured mycelia of Laccaria laccata. The fraction was examined for antitumor activity against sarcoma 180 implanted in mice. The component extracted from the carpophores showed 75% and 65% tumor inhibition ratios in the doses of 20 mg and 50 mg/kg/day, respectively. The protein bound polysaccharide fraction of the cultured mycelia of L. laccata also showed 57.8% tumor inhibition ratio in the dose of 20 mg/kg/day. The chemical analysis of the protein-bound polysaccharide fraction showed that it contained a polysaccharide and a protein. The hydrolysates of the polysaccharide moiety contained six and one unknown monosaccharides. Fourteen amino acids were identified in the hydrolysates of the protein moiety.
Kim, Jin-Sook;Choi, Eung-Chil;Kim, Hye-Ryoung;Lee, Chong-Kil;Lee, Chong-Ock;Chung, Kyeong-Soo;Shim, Mi-Ja;Kim, Byong-Kak
The Korean Journal of Mycology
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v.11
no.4
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pp.151-157
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1983
To find antitumor components in Korean basidiomycetes, the carpophores of Armillariella mellea which were collected in Gyeong Gi Province were extracted with distilled water at $90{\sim}100^{\circ}C$ for eight hours. The hot water extract was concentrated under reduced pressure, mixed with three-fold volumes of ethanol and allowed to stand at $4^{\circ}C$ overnight. The precipitate was centrifugated and lyophilized to yield a protein-polysaccharide fraction. It was examined for antitumor activity against sarcoma 180 implanted in ICR mice. The fraction showed 75.7%, 83.9%, and 94.1% of tumor inhibition ratios at the doses of 10, 20 and 50 mg/kg/day, respectively. The chemical analysis of the fraction showed that it contained a polysaccharide(41.3%) and a protein (35.0%). The hydrolyzates of the polysaccharide moiety contained fucose (4.5%), xylose (1.1%), galactose (17.4%), glucose (55.4%), mannose(19.4%), and one unknown monosaccharide. The protein moiety contained seventeen amino acids. The protein-polysaccharide from A. mellea was administered, i.p., to mice and caused an influx of polymorphonuclear leukocytes (PMN) at $5{\sim}24$ hours which was followed by an accumulation of macrophages and disappearance of the PMN at $48{\sim}72$ hours.
Microbulbifer agarilyticus GP101 was isolated from the gut of a marine invertebrate Turbo cornutus and capable of degrading polysaccharide such as agar, alginate, and ${\kappa}$-carrageenan constituting algal cell wall. To obtain genomic basis of polysaccharide-degrading activity, we sequenced genome of strain GP101. The genome consists of 4,255,625 bp, 3,458 coding sequences with 55.4% G + C contents. BLASTP search revealed the presence of seven agarases, five alginate lyases, ten glucanases, four chitinases, two xylanases, one ${\kappa}$-carrageenase, and one laminarinase. The genomic data of strain GP101 will provide potential uses in the bioconversion process of diverse polysaccharide into bioenergy and biochemicals.
Yeon Suk Kim;Hyun Young Shin;Won Bi Jeong;Eun Ji Ha;Ja Pyeong Koo;Ji-Young Shin;Kwang-Won Yu
The Korean Journal of Food And Nutrition
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v.37
no.1
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pp.17-29
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2024
To increase industrial applicability of Astragalus membranaceus (AM) as immunostimulating materials, hot-water extract (AME) was prepared from AM and fermented with Kimchi-lactic acid bacteria (Lactobacillus sakei & Leuconostoc mesenteroides) to prepare fermented AM-postbiotics (FAME). Although FAME prepared from AM-postbiotics did not show a significant enhancement in macrophage stimulating activity compared to non-fermented AME, crude polysaccharide (FAME-CP) fractionated by EtOH precipitation from FAME showed significantly higher macrophage stimulating activity than AME-CP. Compared to AME-CP, FAME-CP showed dramatic changes in component sugar and molecular weight distribution. FAME-CP was a polysaccharide with a major molecular weight distribution of 113.4 kDa containing Man (44.2%), Glc (19.3%), Gal (10.2%), GalA (10.2%), and Ara (7.4%) as sugar components. FAME-CP with enhanced macrophage stimulatory activity not only increased expression levels of mRNA genes encoding macrophage-activated factors (iNOS, TNF-α, MCP-1, IL-6, and COX-2), but also led the nuclear translocation of activated p65 and c-Jun. In conclusion, crude polysaccharide from AM-postbiotics fermented with lactic acid bacteria could increase industrial applicability as a functional material with enhanced immunostimulating activity than AME-CP.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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