The distribution and activities of hydrolytic enzymes (cellulolyti, hemicellulolytic,pectinolytic and others) in the rumen compartments of Hereford bulls fed 100% alfalfa hay based diets were evaluated. The alfalfa proportion in the diet was gradually increased for two weeks. Whole rumen contents were processed into four fractions: Rumen contents including both the liquid and solid fractions were homogenized and centrifuged, and the supernatant was assayed for enzymes located in whole rumen contents (WRE); rumen contents were centrifuged and the supernatant was assayed for enzymes located in rumen fluids (RFE); feed particles in rumen contents were separated manually, washed with buffer, resuspended in an equal volume of buffer, homogenized and centrifuged and supernatant was assayed for enzymes associated with feed particles (FAE); and rumen microbial cell fraction was separated by centrifugation, suspended in an equal volume of buffer, sonicated and centrifuged, and the supernatant was assayed for enzymes bound with microbial cells (CBE). It was found that polysaccharide-degrading proteins such as $\beta$-1,4-D-endoglucanase, $\beta$-1,4-D-exoglucanase, xylanase and pectinase enzymes were located mainly with the cell bound (CBE) fraction. However, $\beta$-D-glucosidase, $\beta$-D-fucosidase, acetylesterase, and $\alpha$-L-arabinofuranosidase were located in the rumen fluids (RFE) fraction. Protease activity distributions were 37.7, 22.1 and 40.2%, and amylase activity distributions were 51.6, 18.2 and 30.2% for the RFE, FAE and CBE fractions, respectively. These results indicated that protease is located mainly in rumen fluid and with microbial cells, whereas amylase was located mainly in the rumen fluid.
Glucose, arabinose and total non-cellulosic neutral sugar contents of alcohol-insoluble substance were increased during maturation of persimmon, but arabinose, galactose and total non-cellulosic neutral sugar contents were decreased in soft persimmon. The main non-cellulosic neutral sugars of cell wall were galactose, arabinose and glucose. Arbinose and galactose contents were decreased during maturity and this tend was remarkable in soft persimmon. Pectic fraction contained $70{\sim}82%$ of uronic acid, and galactose, arabinose and uronic acid of pectic fraction were decreased. The main non-cellulosic neutral sugars of hemicelluloses were glucose, xylose, and galactose. Galactose was decreased during maturation and postharvest, and contents of non-cellulosic neutral sugar were decreased in soft persimmon.
Fucoidan is a uniquely-structured sulfated fucose-rich polysaccharide derived from brown algae. Recently, the abalone glycosidase-digested fucoidan extract (fucoidan extract) derived from seaweed Cladosiphon novae-caledoniae Kylin (Mozuku) draws much attention because of its clinical anti-cancer effect in Japan. Here, we report the cancer cells-specific apoptosis inducing effects of the fucoidan extract. The fucoidan extract suppressed the growth of various anchorage-dependent and -independent cancer cells. The fucoidan extract contained low molecular weight components, which induced apoptosis of human leukemic HL 60 cells but not of human lymphocytes. It was shown that the fucoidan extract lead caspase 3/7 activation and loss of mitochondrial membrane potential in HL 60 cells. Another function of the fucoidan extract was also observed. It has been known that sugar chain expression on the surface of cancer cell membrane changes dependent on their malignancy. The analysis on sugar chain expression profiling using FITC-labeled lectins revealed that the expression of concanavalin A (Con A) binding sugar chain was enhanced by the treatment of human lung adenocarcinoma A549, human uterine carcinoma HeLa and human fibrosarcoma HT1080 cells with the fucoidan extract. Con A-induced apoptosis of cancer cells was stimulated in a dose-and time-dependent manner by the treatment with the fucoidan extract but not of human normal fibroblast TIG-1 cells.
Self-organized nanogels were prepared from pullulan/biotin conjugates (PU/Bio) for the development of an effective anticancer drug delivery system. The degree of biotin substitution was 11, 19, and 24 biotin groups per 100 anhydroglucose units of pullulan. The physicochemical properties of the nanogels (PU/Bio1, 2 and 3) in aqueous media were characterized by dynamic light scattering, transmission electron microscopy, and fluorescence spectroscopy. The mean diameter of all the samples was less than 300 nm with a unimodal size distribution. The critical aggregation concentrations (CACs) of the nanoparticles in distilled water were $2.8{\times}10^{-2},\;1.6{\times}10^{-2}$, and $0.7{\times}10^{-2}mg/ml$ for the PU/Bio1, 2, and 3, respectively. The aggregation behavior of the nanogels indicated that biotin can perform as a hydrophobic moiety. To observe the specific interaction with a hepatic carcinoma cell line (HepG2), the conjugates were labeled with rhodamine B isothiocyanate (RITC) and their intensities measured using a fluorescence microplate reader. The HepG2 cells treated with the fluorescence-labeled PU/Bio nanoparticles were strongly luminated compared with the control (pullulan). Confocal laser microscopy also confirmed internalization of the PU/Bio nanogels into the cancer cells. Such results demonstrated that the biotin in the conjugate acted as both a hydrophobic moiety for self-assembly and a tumor-targeting moiety for specific interaction with tumor cells. Consequently, PU/Bio nanogels would appear to be a useful drug carrier for the treatment of liver cancer.
A novel agarolytic bacterium, KY-YJ-3, producing extracellular agarase, was isolated from the freshwater sediment of the Sincheon River in Daegu, Korea. On the basis of Gram-staining data, morphology, and phylogenetic analysis of the 16S rDNA sequence, the isolate was identified as Cellvibrio sp. By ammonium sulfate precipitation followed by Toyopearl QAE-550C, Toyopearl HW-55F, and MonoQ column chromatographies, the extracellular agarase in the culture fluid could be purified 120.2-fold with a yield of 8.1%. The specific activity of the purified agarase was 84.2 U/mg. The molecular mass of the purified agarase was 70 kDa as determined by dodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE). The optimal temperature and pH of the purified agarase were $35^{\circ}C$ and pH 7.0, respectively. The purified agarase failed to hydrolyze the other polysaccharide substrates, including carboxymethyl-cellulose, dextran, soluble starch, pectin, and polygalacturonic acid. Kinetic analysis of the agarose hydrolysis catalyzed by the purified agarase using thin-layer chromatography showed that the main products were neoagarobiose, neoagarotetraose, and neoagarohexaose. These results demonstrated that the newly isolated freshwater agarolytic bacterium KY-YJ-3 was a Cellvibrio sp., and could produce an extracellular ${\beta}$-agarase, which hydrolyzed agarose to yield neoagarobiose, neoagarotetraose, and neoagarohexaose as the main products.
So, Mi-Jung;Kim, Boh-Kyung;Choi, Mi-Jin;Park, Kun-Young;Rhee, Sook-Hee;Cho, Eun-Ju
Preventive Nutrition and Food Science
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v.12
no.4
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pp.191-196
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2007
We investigated radical scavenging effects and protective activities of fucoidan and alginic acid, active polysaccharide components from brown seaweeds, against peroxyl radical-induced oxidative stress under in vitro and cellular system. Fucoidan exerted strong radical scavenging effects against nitric oxide (NO) and superoxide anion $(O_2)$. On the other hand, alginic acid did not show inhibitory activity against NO and relatively weak $O_2{^-}$ scavenging effect. Additionally, alginic acid exhibited higher hydroxyl scavenging activity than fucoidan. Both fucoidan and alginic acid significantly enhanced cell viability against oxidative stress induced by 2,2'-azobis(2-amidinopropane)dihydrochloride (AAPH). At $1000{\mu}g/mL$ concentration of fucoidan and alginic acid, the viability was increased from 16.4% to 85.9% and 67.7%, respectively. In addition, fucoidan and alginic acid ameliorated the lipid peroxidation in LLC-PK1 cell induced by AAPH in a dose-dependent manner. In particular, fucoidan showed stronger inhibitory effect than alginic acid in the cellular system. The present study suggests that fucoidan and alginic acid may be promising antioxidants against oxidative stress induced by free radicals.
Kim, Kyung-Tack;Lee, Young-Chul;Cho, Chang-Won;Rhee, Young-Kyoung;Bae, Hye-Min
Journal of Ginseng Research
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v.34
no.1
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pp.1-7
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2010
The quality attributes of coffee treated with different concentrations of white ginseng extract were examined. Increased concentration of white ginseng extract was associated with higher color values (Hunter L. a, b scale). The crude saponin contents of untreated roasted coffee beans (control) and those coated with $5^{\circ}$ Brix (WGC-1) and $20^{\circ}$ Brix white ginseng extract (WGC-2) were 8.29%, 8.74%, and 8.93%, respectively. The total ginsenoside contents of WGC-1 and WGC-2 were 0.3 mg/g and 0.6 mg/g, respectively. In the case of major ginsenosides, the contents of ginsenosides $Rg_1,\;Rg_2,\;Rb_1,\;Rb_2,\;Rg_2,\;Rh_1$, and $Rg_3$ increased directly with the concentration of white ginseng extract. Total sugar and acidic polysaccharide contents also increased directly with the concentration of white ginseng extract. The coffee beans coated with ginseng extract scored significantly higher ginseng taste scores than the control (p<0.005) in sensory evaluation. In terms of coffee taste, WGC-2 had significantly lower scores than the commercial coffee bean. In the consumer sensory evaluation, overall preference did not differ significantly among the treatments.
This study investigated the immune-enhancing effects of polysaccharides extracted from Gloiopeltis furcata (red seaweed) with different molecular weights. A crude polysaccharide mixture was hydrolyzed using acid treatment (0.1 N HCl) and three molecular weight fractions were generated and filtered using centrifugation: (${\leq}10kDa$, 10 to 100 kDa, and 100 kDa. Nitric oxide (NO) production in RAW264.7 cells treated with $0.01-0.5{\mu}g/mL$ polysaccharides ${\geq}100kDa$ was $12.28-19.05{\mu}M$. Treatment with polysaccharides ${\geq}100kDa$ increased cytokine levels, including TNF-${\alpha}$ and IL-6 levels, in a dose-dependent manner. Polymerase chain reaction analysis also revealed marked increases in iNOS and COX-2 mRNA expression levels. These findings lead us to conclude that macrophage activation induced by polysaccharides ${\geq}100kDa$ was greater than that induced by polysaccharides ${\leq}10kDa$ or between 10 and 100 kDa. The polysaccharides ${\geq}100kDa$ extracted from Gloiopeltis furcata investigated herein are potentially useful as natural immune-enhancing agents. These findings provided further insights into the potential use of ${\geq}100kDa$ as immunopotentiator or new function food.
The structural and physicochemical properties of dried aloe vera gel by DIS (dewatering impregnation soaking) process under optimum conditions were investigated. FT-IR spectra for dried samples of DIS aloes showed the typical patterns of standard aloe polysaccharide, and surface structures by SEM (scanning electron microscopy) were similar to a gel-like structure. In case of physicochemical properties of dried aloe samples by DIS process, solubilities and swelling powers of control (not osmotic treated aloe), DIS (S) and DIS (G), samples treated by osmotic solution of 60% sucrose/0.25% NaCl and 50% glucose/0.5% NaCl, were 48.3-57.3% and 8.3-11.7%, respectively, showing no significant differences among samples, but swelling power of DIS (PEG), sample treated by using 50% polyethylene glycol as an osmotic agent was about 5 times higher that of control. Also, water holding capacities of control, DIS (S) and DIS (G) were similar to each other, but that of DIS (PEG) was about 5 times higher that of control. Oil holding capacities of control and DIS aloes maintained the 50.9-86.4% levels of water holding capacities showing no significant differences among samples. Rehydration ratio of DIS (PEG) aloes were significantly dependent on the temperature of rehydrated solvent (water), and rehydration ratio of not-fileted aloe was about two folds higher than that of fileted aloe.
Cho, Ik Sung;Oh, Hye Min;Cho, Myeong Ok;Jang, Bo Seul;Cho, Jung-Kyo;Park, Kyoung Hwan;Kang, Sun-Woong;Huh, Kang Moo
Biomaterials Research
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v.22
no.4
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pp.249-258
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2018
Background: Mucoadhesive polymers, which may increase the contact time between the polymer and the tissue, have been widely investigated for pharmaceutical formulations. In this study, we developed a new polysaccharide-based mucoadhesive polymer with thermogelling properties. Methods: Hexanoyl glycol chitosan (HGC), a new thermogelling polymer, was synthesized by the chemical modification of glycol chitosan using hexanoic anhydride. The HGC was further modified to include thiol groups to improve the mucoadhesive property of thermogelling HGC. The degree of thiolation of the thiolated HGCs (SH-HGCs) was controlled in the range of 5-10% by adjusting the feed molar ratio. The structure of the chemically modified polymers was characterized by $^1H$ NMR and ATR-FTIR. The sol-gel transition, mucoadhesiveness, and biocompatibility of the polymers were determined by a tube inverting method, rheological measurements, and in vitro cytotoxicity tests, respectively. Results: The aqueous solution (4 wt%) of HGC with approximately 33% substitution showed a sol-gel transition temperature of approximately $41^{\circ}C$. SH-HGCs demonstrated lower sol-gel transition temperatures ($34{\pm}1$ and $31{\pm}1^{\circ}C$) compared to that of HGC due to the introduction of thiol groups. Rheological studies of aqueous mixture solutions of SH-HGCs and mucin showed that SH-HGCs had stronger mucoadhesiveness than HGC due to the interaction between the thiol groups of SH-HGCs and mucin. Additionally, we confirmed that the thermogelling properties might improve the mucoadhesive force of polymers. Several in vitro cytotoxicity tests showed that SH-HGCs showed little toxicity at concentrations of 0.1-1.0 wt%, indicating good biocompatibility of the polymers. Conclusions: The resultant thiolated hexanoyl glycol chitosans may play a crucial role in mucoadhesive applications in biomedical areas.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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