Thiobacillus neopolitanus R-10, which produces a active thiosulfate oxidase was isolated from nightsoil. The optimal culture conditions of Thiobacillus neopolitanus R-10 for the production of enzyme was determined as followed: 0.8% $Na_2S_2O_3$, 0.2% $KH_2PO_4$, 0.2% $K_2HPO_4$, 0.04% $Na_2CO_3$, 0.02% $MgSO_4$.$7H_2O$, 2ml trace elements solution, ann PH 6.5 at 3$0^{\circ}C$ and 72hr cultivation. The oxidase was successively purified 83 folds yield by ${(NH_2)}_2SO_4$ fractionation, DEAE-Cellulose, Sephadex A-50 column chromatogrophy and gel Sephadex G-150 gel filteration with yield of 5.9%. The molecular weight of purified enzyme was estimated to be 43.000 dalton by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis and gel filteration column chromatography The enzyme activity was highest at 40t and PH 7.0 The enzyme activity was relatively high by $\beta$-mercaptoethanol but strongly inhibited by cysteine.
The aim of the study was to optimize harvesting method for concentrating microalgae from microalgae mass culture. It is well known that the mass density of microalgae is usually very low and these are small size (5-20 ${\mu}m$) in the culture medium. It is essential that microalgae is harvested and concentrated economically for economical biodiesel production from microalgae. In this study, to determine optimized conditions for microalgae harvesting by chemical flocculation. Flocculation of three algae, Chlorella ellipsoidea, Dunaliella bardawil, and Dunaliella tertiolecta, was performed using various chemical flocculants, such as inorganic flocculants (aluminium sulfate, aluminium potassium sulfate, ferrous sulfate, ferric sulfate, ferric chloride, calcium hydroxide, sodium carbonate, sodium nitrite, and sodium aluminate), organic flocculant (polyacrylamide), and biopolymer flocculants (chitosan and starch). The results indicated that aluminium based inorganic flocculants is suitable for microalgae harvesting such as Chlorella ellipsoidea, Dunaliella bardawil, and Dunaliella tertiolecta. The results also recommended that flocculant doses, agitation speed, agitation time, sedimentation time for economical microalgae harvesting method using chemical flocculants.
Objectives : Sweet bee venom(SBV) is pure melittin, the main component of bee venom, made by removing another components through gel filtration chromatography and propionic acid/urea polyacrylamide gel electrophoresis. In the using SBV, 2 patients were experienced anaphylaxis by SBV. So, we reported the process of anaphylaxis and consider these situation. Methods : We observed 2 patients suffered from anaphylaxis after treated with SBV in the Korean Medical Hospital, Sangji University. Results : Though SBV was removed allergen from bee venom, it is not possible to complete prevention of anaphylactic shock in the clinics. So, Korean medical doctor using BV or SBV must be prepare the system consider a countermeasure by anaphylaxis.
The detection, characterization and use of quantitative traits loci, QTL, have significant potential to improve the efficiency of selective breeding of species. Therefore, a population with 59 advanced backcross lines($BC_2F_5$), derived from a cross between IR64 and Tarome molaei, were studied in Tonekabon Rice Research Station of Iran in order to map QTLs for panicle length, number of grain per panicle, and panicle grain sterility in rice. The parental screening wtih 235 SSR markers in agarose and polyacrylamide gels revealed 114 markers with clear polymorphic bands. To search for QTLs associated with panicle length, number of grain per panicle, and panicle grain sterility, we constructed a genetic linkage map using 114 microsatellite markers. Positive and negative transgressive segregations were observed in $BC_2F_5$ lines for all traits. Using multiple interval mapping(MIM), a total of 20 putative QTLs were detected, of which eight were for panicle length, three for number of grains, and nine for panicle grain sterility. The maximum number of QTLs were mapped on chromosomes 1 and 2 with eight QTLs. These QTL markers could possible be utilized for marker-assisted selection.
The reproduction of animals is a means to maintain their species. The golden hamsters are seasonal breeders, and their reproduction is regulated by the photoperiod. The shifts of the sexual functions imply the changes of the protein expression, and those are reflected by the proteome. Thus the present study was to examine via two dimensional polyacrylamide gel electrophoresis (2d PAGE), the physiological changes and the alterations of protein expressions in hypothalamus upon the reproductive situation related to the pineal gland. Among the pineal intact animals, the reproductive functions were sustained in animals housed in long photoperiod (LP) but regressed in animals housed in short photoperiod. And those pinealectomized animals showed high sexual activities regardless of photoperiod. Ultimately they were branched into dichotomy, sexually active and inactive animals. Apart from the changes of physiological parameters upon the reproductive conditions, there were obvious differences in proteins extracted from the hypothalamus. The hypothalamus of LP animals presented high levels of enzymes which are involved in the production of energy, glycolysis and Krebs cycle. The increased energy might be related to the GnRH synthesis in hypothalamus and indirectly to the constant cell divisions in spermatogenesis. Taken together, the impacts of the photoperiodic information controlling reproduction could be observed through 2d PAGE. Therefore, the present results suggest the potential of biomarkers collectively to diagnose the fertility and the infertility by way of proteomics in organs with regard to the reproductive system, further could be applied to diagnose various diseases.
In this study, comparative replicational properties of Hyphantria cunea nucleopolyhedrovirus (HycuNPV) in Lymantria dispar (IPLB-LdElta) and Spodoptera frugiperda (IPLB-Sf21) cell lines were investigated. Our microscopic observations showed that cytopathic effects (CPEs) in LdElta cells appeared 12 h later than those in Sf21 cells. Whereas polyhedral inclusion bodies (PIBs) formed at 48 h postinfection (p.i.) in LdElta cells, it formed at 36 h p.i. in Sf21 cells. Extracellular virus production determined according to the 50% tissue culture infective dose ($TCID_{50}$) method in LdElta cells started about 12 h later when compared with Sf21 cells. Titers of extracellular virus in LdElta and Sf21 cells were calculated as $1.77{\times}10^9$ plaque forming units (PFU)/ml and $5.6{\times}10^9PFU/ml$, respectively, at 72 h p.i. We also showed that viral DNA replication began at 12 h p.i. in both cell lines. Viral protein synthesis was determined by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) and polyhedrin synthesis was observed at 12 h p.i. in both cell lines. The results indicate that while the synthesis of macromolecules is 12 h later and production of extracellular virus is almost 3-fold lower in LdElta cells compared with those in Sf21 cells, the LdElta cell line is still a productive cell line for infection of HycuNPV.
A bacterial strain LC-413, producing an extracellular inulin fructotransferase (depolymerizing) which converts inulin into di-D-fructofuranose dianhydride (DFAIII), was isolated from soil. Inulin fructotransferase from the isolate identified as a strain Flabobacterium sp. was purified from the culture broth by ammonium sulfate precipitation, followed by column chromatograpies on DEAE-Toyopearl 650 M and phenyl-Toyopearl 650 M. The purified enzyme gave a single band on an electrophoretic disc-gel. The molecular weight of the enzyme was estimated to be 44, 000 Da by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis, and 45, 000 Da by gel filtration, suggesting the monomeric state of the enzyme. The isoelectric point of the enzyme was about pH 4.5. The optimal pH and temperature for the enzyme reaction were 6.0 and $50^{\circ}C$, respectively. The purified enzyme digested inulin into di-D-fructofuranose-l, 2': 2, 3'-dianhydride, confirming the enzyme was an inulin fructotransferase (inulinase II).
This study was carried out to isolate and characterize the Lactobacillus plantarum with bile salt deconjugation activity that was isolated from Kimchi. Some isolates were selected and identified as L. plantarum by 16S rRNA gene sequence and sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) analysis of whole cell protein patterns. They were assayed to determine their capacities to express bile salt hydrolase (BSH) activity. Among the identified strains, L. plantarum CIB 001 showed the highest level of BSH activity. Then, resistance to gastric acidity and bile condition were analyzed for further characterization. This strain was able to maintain viability for 1h at pH 2.0 and to survive in a MRS (deMan, Rogosa, and Sharpe) broth with 1.0% of bile acids. L. plantarum CIB 001 would potentially be useful in the food industry as probiotics.
Abiotic stress is the primary cause of crop loss worldwide, reducing average yields for most major crop plants by more than 50%. In addition, future agricultural production and management will encounter multifaceted challenges from global climate change. Therefore, it is necessary to study the molecular response of crop plants to the stresses in order to develop appropriate strategies to sustain food production under adverse environmental conditions. We carried out a large scale proteomic analysis of soybean plants in response to various abiotic stresses, including drought, salinity, waterlogging and their interactions. Proteins were analyzed by two dimensional polyacrylamide gel electrophoresis followed by matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight (MALDI-TOF) mass spectrometry. The identified proteins are involved in a wide range of cellular functions. In addition to the well known stress-associated proteins, we identified several novel proteins, which were not reported before. In many cases our proteomic data bridges the gap between mRNA and metabolite data. Our studie provides new insights into identification of abiotic stress responsive proteins in soybean, and demonstrates the advantages of proteomic analysis in dissecting metabolic and regulatory networks.
In order to increase the nutritional quality of soybean meal (SBM) as an animal feed, Bacillus subtilis TP6, a previously isolated strain from an Indonesian traditional fermented soybean food, Tempeh, was used as a starter organism for solid-state fermentation. In the pre-treated SBM with water content of 60% (v/w), B. subtilis TP6 was grown to a maximum viable cell number of $3.5{\times}10^9CFU/g$. Compared to control, crude protein in Bacillus fermented SBM was increased by 16%, while raffinose, stachyose, and trypsin inhibitors were reduced by 31, 37, and 90%, respectively. The Sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis analysis showed that proteins in the fermented SBM were remarkably hydrolyzed into smaller molecular masses, resulting in a decrease in large sized proteins. Our data suggested that B. subtilis fermentation could increase the nutritive value of SBM through reduction of anti-nutritive factors and improvement of protein quality by hydrolysis of soy protein. In addition, B. subtilis TP6 produced a functional ingredient, poly-${\gamma}$-glutamic acid which has various health benefits.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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