A high molecular-weight water-soluble fraction(PO) obtained by the ethanol precipitation of 0.1 N NaOH extracts of the mushroom Pleurotus ostreatus showed 82% anti-complementary activity for complement consumption hemolysis. The PO consisted of 42% carbohydrate (w/w), 50% protein (w/w), and 3% uronic acid (w/w). Fifty-eight percent of the anti-complementary activity decreased by periodate oxidation and 22% by protease digestion, suggesting that the sugar and protein moieties are essential for this activity. Two polysaccharide fractions, PO-IIIa-1 and PO-IIIa-2, with anti-complementary activity were isolated from the PO using DEAE-Sepharose FF followed by Sephadex G-75 and Sepharose CL-6B gel permeation chromatographies. The PO-IIIa-2 was found by HPLC to be nearly homogeneous, with the molecular mass of 531 kDa, and showed 96% $ITCH_{50}$ (inhibition against the total complement hemolysis of deionized water as the control) at a concentration of 1 mg/ml. This fraction contained galactose, mannose, fucose, and glucose with molar ratios of 1.75:1:0.65 and 0.59, respectively. The majority of galactose and mannose units in the PO-IIIa-2 were composed of TGalp1 ->, ->6Galp1->, ->2,6Galp1->, and ->Manp1->. The PO-IIIa-1 (molecular mass of 2000 kDa), exhibiting higher activity than the PO-IIIa-2, was further purified into two fractions, unbound proteoglycan (PO-IIIa-1A) and bound glucomannan (PO-IIIa-lB), by affinity chromatography using ConA-Sepharose CL-4B. The anti-complementary activity of each affinity purified fraction decreased as compared to that of the native PO-IIIa-1 fraction, indicating that the formation of complex between both polysaccharide fractions was necessary for full anti-complementary activity.
This study was carried out to know the possibility of simultaneous utilization of laccase from white-rot fungus with cellulase on enzymatic hydrolysis of cellulosic substrate from autohydrolyzed oak wood. Laccases from 3 white-rot fungi, Pleurotus ostreatus. Ganoderma lucidum, and Phanerochaete chrysosporium, were isolated, purified and measured their activities. The highest activity was shown in Pleurotus ostreatus and the lowest in Phanerochaete chrysosporium. Laccase from Pleurotus ostreatus has optimum pH of 5.94, Km value of 3.209 mM and appeared to be stable at relatively wide pH range, 4.7-8.72. Temperature stability showed that 60% activity was preserved after 40 minutes at $50^{\circ}C$. Laccase from Ganoderma lucidum reached to the maximum activity during 15-20 day incubation. This enzyme has optimum pH of 6.45, Km value of 6.71 mM and pH range of 5.0-9.0 for stabilization. 95% activity was preserved at $30^{\circ}C$ and 58% activity at $50^{\circ}C$. Concerned to the enzymatic hydrolysis of cellulosic substrate with both enzymes, cellulase and laccase, simultaneously, mixed culture filtrates and mycellium extracts were shown higher hydrolysis rates than those of Trichoderma viride. There were no significant differences in the extent of hydrolysis among various mixed culture filtrates and mycellium extracts.
멀칭용 비닐의 규격은 두께 0.03 mm, 폭 180 cm 투명비닐 이었으며, 구명의 크기와 구멍과 구멍 사이의 간격은 10cm로 하여 $1\;m^2$당 25개의 구멍이 들리도록 하였다. 느타리버섯 비닐멀칭 방법은 버섯의 다발을 크게 형성하였고, 버섯다발의 개체수가 약 2.5배 높았으며, 갓의 색깔이 진하였으며, 개체중도 1.2배 높게 나타났다. 비닐멀칭 재배는 균상관리를 용이하게 하였고, 어린버섯이 사멸되지 않았다. 구멍부위에만 버섯이 발생하여 수확시간을 2배 이상 빠르게 하였으며, 노동의 효율을 높였다. 전체 버섯 수량은 $1\;m^2$당 10.8 kg으로 5.7%수량이 증가되었다. 비닐에 덮여있는 버섯균사는 건전하게 백색을 유지하였다. 반변에 관행균상의 버섯균사는 주기가 계속되는 동안 노란색에서 갈색으로 변하였다. 비닐멀칭 균상에서 수확한 버섯 다발 1개의 무게는 283 g(개체수 33)으로 관행 117 g(개체수 15)에 비해 40% 이상 높았다.
생표고버섯을 가해하는 동물로 곤충 5종과 곤충이외의 동물 6종이 조사되었는데 이 중 회색톡톡이(Achon$\kappa$s armatus), 밑빠진버섯벌레(Scaphidium amurense), 민달팽이(Philomycus confusa)가 갓(자실체) 부분에 큰 피해를 주었고, 응애류(Rhizoglyphis spp., Histiostoma spp.)가 주름살 부분에 큰 피해를 주었다. 표고 버섯 골목해충으로 미숙골목에서 곤충 2종, 완숙골목에서 곤충 8종, 기타동물 1종이 조사되었는데 이 중, 미숙골목에서 털두꺼비하늘소(Moechotypa diphysis)와 완숙골목에서 털두꺼비하늘소(Moechotypa diphysis), 흰 개미(Reticu-litermes speratus)등의 발생량이 높고 피해가 컸으며, 특히 털두꺼비하늘소(Moechotypa diphysis) 는 미숙골목으로부터 完熟골목에 이르기까지 피해가 컸다. 느타리버섯 자실체 해충으로서는 곤충류 6종과 기타동물 2종이 조사되었으며, 이 중 곤충류의 갈색버섯파리과(Lycoriella sp.), 혹파리과(씨Icophilla sp.)가 발생량이 많고 피해도 컸다.한편 느타리버섯 균상을 가해하는 해충으로서 곤충 2종과 기타동물 5종이 조사되 었으며 이 중 곤충류의 갈색버섯파리과(Lycoriella sp.)와 응애류의 뿔가루응애과(Histiostoma feroniarum)및 건초응애(Throglyphus bankslongior)가 발생량도 많고 피해도 컸다.
Lentinus edodes 에서 분비된 laccase 를 DEAE Sephadex A-50, Con A-Sepharose, Sephadex G-150 크로마토그래피를 통해서 순수분리하였다. 효소는 분자량이 87 KDa 정도인 하나의 소단위체로 되어 있고, 12.0% 의 당을 함유하고 있었다. 그리고 N-말단 아미노산 서열은 Pleurotus oxtreatus 와 Cloriolus hirsutus 의 laccase 와 유사하였다. 효소의 최적 pH 는 4.8 이고 최적 온도는 $40^{\circ}C$ 이었다. 그리고 본 효소는 pH 7-9 와 $30^{\circ}C$이하에서 비교적 안정하였다. Syringaldazine 에 대한 $K_{M}$ 은 $0.4\mu$ M 이었고 $k_{cat}$ 은$ 77 sec^{-1}$ 이었다. This layer chromatography 에 의한 본 효소의 반응 산물들의 분리양상이 Pleurotus ostreatus 의 laccase 의 경우와 유사하였다.
완효성비료원을 혼합처리해서 배양시 0.1%와 0.5% 첨가구의 경우 잡균오염율은 나타나지 않았고 무처리에 비해서 배양일수가 약간 빨라졌고 초발이 소요일수는 $2{\sim}3$일 정도 빨라졌으며 수량성에 있어서는 수량이 모두 증가하였으나$(10{\sim}28%)$, 첨가량이 증가할수록 수량성과 생체효율성은 감소하는 경향을 보였다. 완효성비료 첨가배지의 화학성분은 첨가량이 많아질수록 총질소, 암모니아태 및 질산태 질소, 칼리, 인산등은 증가하였다. 완효성비료처리배지에서 생산된 버섯자실체의 이화학적 특성은 암모니아태 질소와 질산태 질소의 경우 무처리구 보다 낮은 경향이었으며 다른 무기성분들은 무첨가와 비슷한 경향을 보였다.
1. 느타리버섯 중의 미토콘드리아는 설탕농도 44% 층에서 분리 정제되었다. 2. 파장 변화에 따른 미토콘드리아성 ATPase의 활성도는 580nm의 빛이 조사될 때 가장 크게 증가되었다. 3. 최적 파장 580nm의 빛 조사시간 변화에 따른 활성도는 10초 동안 조사하였을 때 가장 크게 증가하였다. 4. 최적 빛 조사 조건에서 이 효소의 최적 pH는 7.4, 최적 온도는 $60^{\circ}C$였다. 5. 최적 광 조건에서 얻은 이 효소는 $Fe^{3+}$, $Fe^{2+}$, $Ca^{2+}$, $Mg^{2+}$ 및 $K^{+}$ 이온에 의하여 활성화 되었으나 $Na^{+}$ 이온에 의해서는 억제되었다.
본 연구는 느타리 병재배시 배지 조성에 따른 질소원 차이가 자실체 생육과 그에 따른 향미 변화 및 항산화 활성에 미치는 영향을 분석하였다. 포플러 톱밥, 비트펄프, 면실박, 면실피 40:20:20:20로 혼합한 T2에서 156.6 g으로 높은 수량성을 보였으며, 총 폴리페놀 함량 및 ABTS, DPPH 라디칼 소거 활성은 8.25 mg GAE/g, 70%, 49%로 Control과 T1에 비해 높은 라디칼 소거 활성을 나타냈다. 또한, 질소함량에 따라 각기 다른 향기 패턴을 나타내며 변화를 나타내는 것 뿐만 아니라 신맛, 감칠맛, 짠맛 등 맛 패턴에 영향을 미치는 것으로 추정된다.
Induction of laccase isozymes under acidic stresses were determined in Trametes versicolor, Pleurotus ostreatus and Ganoderma lucidum isolated in Korea, and in Lentinus squarrosulrs isolated in Thai. When cultures of these fungi were transferred to acidic liquid media (pH 3.0-4.0), the activities of secreted extralcellular laccases were increased 60% and 400% in T. versicolor and G. lucidum respectively. However, there was no such induction in L. squarrosulus or P. ostreatus. In L. squarrosulus, different laccase isozymes in the electrophoretic mobilities were induced under acidic conditions.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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