Piperlonguminine (PL), an important component of Piper longum fruits, is known to exhibit anti-hyperlipidemic, antiplatelet and anti-melanogenic activities. Here, the anticoagulant activities of PL were examined by monitoring activated-partial-thromboplastin-time (aPTT), prothrombin-time (PT), and the activities of thrombin and activated factor X (FXa). The effects of PL on the expressions of plasminogen activator inhibitor type 1 (PAI-1) and tissue-type plasminogen activator (t-PA) were also tested in tumor necrosis factor-${\alpha}$ (TNF-${\alpha}$) activated HUVECs. The results showed that PL prolonged aPTT and PT significantly and inhibited the activities of thrombin and FXa. PL inhibited the generation of thrombin and FXa in HUVECs. In accordance with these anticoagulant activities, PL prolonged in vivo bleeding time and inhibited TNF-${\alpha}$ induced PAI-1 production. Furthermore, PAI-1/t-PA ratio was significantly decreased by PL. Collectively, our results suggest that PL possesses antithrombotic activities and that the current study could provide bases for the development of new anticoagulant agents.
기계판막을 이용한 승모판치환술을 시행 받은 환자가 임신과 연관되어 장기간의 헤파린 피하주사를 이용한 항응고 치료를 받는 중에, 반복적인 인공판막 혈전증을 포함하는 항응고제로 인한 다양한 합병증이 관찰되었다. 이는 안티트롬빈 III의 결핍으로 인한 헤파린 저항성에 의한 것으로 판단되었고, 유로키나아제 또는 조직플라즈미노겐활성제(tissue plasminogen activator, tPA)를 이용한 혈전용해치료를 통하여 산모와 태아 모두 안전하게 치료할 수 있었다.
기내에서의 발아 및 형질전환 활성을 지닐 수 있는 백합 (Lilium longiflorum) 화분의 장기보존조건을 얻기 위하여 용매를 이용한 연구를 수행하였다. 화분의 용이한 수집을 위하여 용매를 사용했을 때, petroleum ether, n-heptane, benzene 등의 경우 화분의 기내발아에는 영향을 미치지는 않았으나 수집과 정 후 바로 화분건조 및 냉동 보관함으로써 발아활성을 유지 할 수 있었다. 이들의 활성유지는 또한 vacuum infiltration 및 Agrobacterium을 이용한 형질전환에 따른 외래유전자인 tissue plasminogen activator의 발현에 의하여 확인하였다.
CHO (Chinese hamster ovary) cells were transfected with plasmids containing both cis-acting HRE (hypoxia response element) and CMV-promoter that controls tissue-type plasminogen activator (t-PA). CHO cells with HRE produced 16.2 fold higher t-PA concentration than CHO cells without HRE. It was noted that hypoxia strongly induced CHO cell apoptosis. which resulted in decrease of cell viability and protein production. In this study. by introducing Bcl-2, anti-apoptotic gene, we tried to recover cell viability and increase the protein production. When batch culture of both control cells without transfection of Bcl-2 and cells transfected with Bcl-2 were performed in the absence of CoCl ι hypoxia mimic condition. the cells with Bcl-2 were effected specific cell growth rates, maximum cell density. Immunoblotting assay showed Bcl-2 was recombinant with HRE dependent t- P A expression cassette, and their expression level was depended on hypoxia. By introducing Bcl-2, both cell viability and maximum cell density could be increased.
Tumor necrosis factor (TNF)-${\alpha}$ is chronically elevated in adipose tissues of obese rodents and humans. Increased levels of TNF-${\alpha}$ have been implicated in both the induction of atherogenic adipokines, such as plasminogen activator inhibitor (PAI)-1, and the inhibition of the anti-atherogenic adipokine, adiponectin. In this study, we investigated the effects of trans-stilbene, piceatannol, rhaponticin, and piceid on the TNF-${\alpha}$-induced atherogenic changes of adipokines in 3T3-L1 cells. Exposure to TNF-${\alpha}$ for 24 hr increased PAI-1 secretion and decreased adiponectin secretion. Among stilbenoids, piceatannol significantly inhibited the increased secretion of PAI-1 induced by TNF-${\alpha}$. Adiponectin secretion decreased by TNF-${\alpha}$ was recovered after trans-stilbene and rhaponticin treatments. Our results showed that stilbenoids exerted different effects on TNF-${\alpha}$-induced changes in adipokines secretion in 3T3-L1 adipocytes according to their structural characteristics.
Plasminogen activator (PA)-plasmin system in follicular fluid is involved in the process leading to follicular rupture at ovulation. It is well known that PA is closely associated with cellular differentiation and tissue remodeling on evidences from the study of normal and malignant tissues. This study was designed to ascertain a potential role of PA in the ovarian folliculogenesis. Immature Sprague-Dawley rats were injected with pregnant mare serum gonadotropin, followed by injection of serine protease inhibitor (SPI; mixture of 1 mol/L benzamidine and 1 mol/L amino-caproic acid) into the unilateral ovarian bursa. In the control study, mechanical effect of bursal injection and contralateral ovarian effect SPI were ruled out. Total antral follicular areas relative to total ovarian cross-sectional areas was siginificantly lower in SPI-injected ovary than in saline-injected ovary. SPI injection decreased the relative antral follicular area by 33 % respectively. Electron microscopic finding of granulosa cell in the atretic follicle showed the presence of pyknotic nucleus, blurring of neucleolemma, degeneration of mitochondria and dilation of endoplasmic reticulum. After induction of ovulation with hCG, the number of oocytes released was significantly decreased in SPI-injected oviduct than in saline-injected oviduct. From above results, author discussed that PA may play a role not only in ovulation but also in some processes of folliculogenesis.
Cyclopia subternata is a medicinal plant commonly used in traditional medicine to relieve pain. Here, the anticoagulant effects of scolymoside, an active compound in C. subternata, were examined by monitoring activated partial thromboplastin time (aPTT), prothrombin time (PT), and the activities of thrombin and activated factor X (FXa). The effects of scolymoside on plasminogen activator inhibitor type 1 (PAI-1) and tissue-type plasminogen activator (t-PA) expression were evaluated in tumor necrosis factor (TNF)-α-activated human endothelial cells. Treatment with scolymoside resulted in prolonged aPTT and PT and the inhibition of thrombin and FXa activities and production. In addition, scolymoside inhibited thrombin-catalyzed fibrin polymerization and platelet aggregation. Scolymoside also elicited anticoagulant effects in mice, including a significant reduction in the PAI-1 to t-PA ratio. Collectively, these findings indicate that scolymoside possesses anticoagulant activities and could be developed as a novel anticoagulant.
PAI-1 (plasminogen activator inhibitor-1), leptin, and resistin are synthesized and secreted by Int cells of rodents and have recently been postulated to be an important link to obesity. This study was conducted to identify the nutritional regulation of PAI-1, leptin, and resistin gene expression in 0b/ob mice. The mice were divided into four groups according to nutritional status: control, 48 hour fasting, 48 hour-fasting/12 hour-refeeding, and 48 hour-fasting/24 hour-refeeding. The mRNA levels of each peptide were measured by semi-quantitative RT-PCR. In visceral fat tissue, the level of PAI-1 mRNA increased markedly when 48h-fasted animals were refed with a high carbohydrate-low fat diet. However, lasting/refeeding did not appreciably change PAI-1 mRNA levels in subcutaneous fat tissue. Similar results were obtained for resistin mRNA levels in both types of fat tissues. These findings suggest that visceral adipose tissue might be more sensitively involved in the nutritional regulation of PAI-1 and resistin gene expression compared to subcutaneous fat tissue. The level of leptin mRNA decreased markedly in the 48h-fasted animals, and increased markedly when 48h-fasted animals were refed with a high carbohydrate-low fat diet. The nutritional regulation of leptin mRNA showed similar patterns in both types of fat tissues. In conclusion, the nutritional regulation of gene expression encoding PAI-1, resistin, and leptin from adipocytes may vary according to the type of adipose tissue.
Binding of urokinase-type plasminogen activator to its cellular receptor accelerate production of plasmin from plasminogen on the cell surface. Plasmin can digest extracellular matrix components and basement membranes through activating certain proMMPs, which is related to the invasiveness to the cells. Plasmin also acts the regulation of blood coagulation and relates closely to cardiovascular diseases such as stroke and coronary occlusion. Therefore, its inhibitors may be useful as antimetastatic agents and to the treatment of cardiovascular diseases. To search for plasmin inhibitors from plant resources, we screened plasmin inhibitory activities with 76 methanol extract of plant species. Among them, three plant samples showed strong inhibitory activities (>70%) and thirteen plant samples showed more than 50% inhibitory activities of plasmin. Their inhibitory activities were not directly related with uPA inhibitory activites and cell viability.
본 연구는 본태성 고혈압 쥐인 SHR을 이용하여 복분자 완숙과 에탄올 50% 추출물의 혈압 강하 효과 및 그와 관련된 인자들[endothelial nitric oxide synthase(eNOS), homocysteine, plasminogen activator inhibitor-1(PAI-1), albumin, creatinine, blood lipid 등]에 미치는 영향을 조사하였다. 본태성 고혈압 쥐에게 복분자 완숙과 에탄올 50% 추출물을 12주간 투여한 결과 수축기 혈압이 고혈압대조군에 비하여 약 12% 억제되었다. 또한 eNOS 유전자 발현을 유의하게 증가하였으며 혈청 homocysteine 및 PAI-1의 활성이 눈에 띄게 감소됨을 확인하였다. 또한 심근 호산성 세포수를 감소시켜 심장의 손상 및 병변을 경감시키는 효과가 있음을 확인하였다. 그러나 혈중 지질 및 혈청 albumin, creatinine의 농도에는 각 군 간의 변화가 뚜렷하게 나타나지 않았다. 본 연구 결과 복분자 완숙과 에탄올 50% 추출물은 혈관의 손상을 야기할 수 있는 homocysteine이나 PAI-1과 같은 염증성 인자로부터 혈관을 보호하고 이를 통해 eNOS의 유전자 발현을 개선시킴으로써 혈압의 조절에 영향을 미치는 것으로 나타났으며, 향후 심혈관계 질환의 개선에 도움이 되는 식품소재로서의 가능성이 있음을 확인하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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