Plant cell culture provides a viable alternative over whole plant cultivation for the production of secondary metabolites. In order to successfully cultivate the plant cells at large scale, several engineering parameters such as, cell aggregation, mixing, aeration, and shear sensitivity are taken into account for selection of a suitable bioreactor. The media ingredients, their concentrations and the environmental factors are optimized for maximal synthesis of a desired metabolite. Increased productivity in a bioreactor can be achieved by selection of a proper cultivation strategy (batch, fed-batch, two-stage etc.), feeding of metabolic precursors and extraction of intracellular metabolites. Proper understanding and rigorous analysis of these parameters would pave the way towards the successful commercialization of plant cell bioprocesses.
A perfusion culture of transgenic Nicotiana tabacum cell suspensions, transformed to express recombinant glucuronidase (GUS), was successfully performed in a 5-1 stirred tank bioreactor. With 0.1 $day^{-1}$ of perfusion rate, the maximum dry cell weight (DCW) reached to 29.5 g/l in 16 days, which was 2.1-fold higher than the obtained in batch culture (14.3 g/l). In terms of the production of GUS, the volumetric activity could be increased up to 12.8 U/ml by using perfusion, compared with 4.9 U/ml in batch culture. The specific GUS activities in both perfusion and batch cultures were maintained at similar levels, 200-400 U/g DCW. Consequently, a perfusion culture could be a good strategy for the enhanced production of recombinant proteins in a plant cell culture system.
The adventitious root of Panax ginseng C.A. Meyer is regarded as an efficient alternative to cell culture or hairy root culture for biomass production due to its fast growth and stable metabolite production. To determine optimal culture conditions for the bioreactor culture of ginseng roots, experiments have been conducted on physical and chemical factors such as bioreactor type, dissolved oxygen, gas supply, aeration, medium type, macro- and micro-elements, medium supplement during culture period, sucrose concentration, osmotic agents, medium pH and light. Elicitation is a key step to increase ginsenoside accumulation in the adventitious roots but biomass growth is severely inhibited by elicitor treatment. To obtain high ginsenoside content with avoiding biomass decrease, we applied two-stage bioreactor culture system. Ginseng adventitious roots were cultured for 40 days to maximize biomass increase followed by elicitation for 7 days to enhance ginsenoside accumulation. We also experimented on types and concentrations of jasmonate to determine optimal elicitation methods. In this paper, we discussed several factors affecting the root propagation and ginsenoside accumulation. Based on the results obtained from previous experiments we have established large-scale bioreactor system (1 ton-10 ton) for the efficient production of ginseng adventitious roots and bioactive compounds including ginsenoside. Still, experiments are on going in our laboratory to determine other bioactive compounds having effects on diet, high blood pressure, DPPH elimination and increasing memories.
Traditional culture technology of medicinal plants mainly depends on the field culture, which has many problems. With progress of modern culture technology, it has become possible to produce valuable secondary metabolites from medicinal plants. In this paper, we discuss about the pigment and saikosaponin production from too medicinal plants, Carthamus tinctorius and Bupleurum falcatum, through bioreactor culture system. A two-stage bioreactor culture system was established for the production of yellow and red pigments and saikosaponins by cell suspension cultures of Carthamus tinctorius and Bupleurum falcatum. In Carthamus tinctorius, balloon type airlift bioreactors and column type airlift bioreactors were employed for the tell culture and for the pigment production, respectively. The greatest pigment production was obtained on White medium supplemented with 4 mg/L kinetin, high levels of sucrose concentration and photosynthetic photon flux. In Bupleurum falcatum, adventitious roots were cultured in balloon type airlift bioreactors and the root growth was greatest on SH medium containing 5 mg/L IBA and 0.2 mg/L kinetin. HPLC analysis showed that the contents of main active saikosaponins a, c, and d in adventitious roots were almost the same as those in field cultured root.
Isoflavonoid production in cell cultures of Pueraria tuberosa as influenced by an angiospermic parasite, Cuscuta reflexa, was studied. During the time course, maximum isoflavonoid content was recorded when Cuscuta elicitor was added on day 15 of culture. Among various concentrations of elicitor tried, $1g\;l^{-1}$ of Cuscuta elicitor was found to be the most effective. The optimized elicitation conditions were used in vessels of varying capacity where maximum yield of ${\sim}91mg\;l^{-1}$ of isoflavonoid was recorded in a 2-l bioreactor which was about 19% higher than the control cultures. In this case, puerarin content increased up to $11mg\;l^{-1}$ which was 580% higher that the value recorded in the control cultures. In the bioreactor, 8 days of elicitation was optimal for the high accumulation of isoflavonoid, giving productivity of ${\sim}4mg\;l^{-1}\;day^{-1}$. The study showed persistent high isoflavonoid yield even during scale-up. Use of a preparation of Cuscuta reflexa as an elicitor is reported for the first time. The increase in isoflavonoid content was elicitor dose-dependent and can be explored to trigger high yields of isoflavonoid/secondary metabolites in production.
Kim, Mee-Kyung;Hong, Jun-Hyeok;Kim, Youn-Kwon;Ahn, Tae-Seok;Shin, Eung-Bai
Journal of Korean Society of Environmental Engineers
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v.28
no.3
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pp.240-248
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2006
In this study, a retrofitting BNR process that was modified for the economical applicability was proposed and evaluated in the pilot plant($50m^3/d$). At the same time the bacterial community structure was investigated in the pilot plant by using FISH(fluorescent in situ hybridization) method. Economically 16% of the initial construction cost for the proposed process(introduction of a biological nutrient removal process of $60,000m^3/d$ scale basis) was reduced due to the absence of a bioreactor. Water treatment efficiencies and maintenance facilities of the modified process were satisfied with the strengthened discharge permits in Korea throughout a long term pilot plant operating including a winter season. Bacterial populations in the pilot plant and in the control plant(A2/O process, B SIP(Sewage Treatment Plant)) were remained uniformly during the test period, but bacterial structure in the bioreactor was changed drastically. Proportions of ${\beta}$-proteobacteria group including soil bacteria which play a important role in wastewater treatment increased $25{\sim}607%$ in population.
This experiment was carried out to know the effect of media and agar concentrations, aeration and growth regulators on rooting and acclimatization of the shoots harvested from bioreactor culture in Rehmannia glutinosa. Half MS media with 1.2% agar improved rooting and acclimatization of shoots. Shoots were effectively acclimatized and rooted well in case of aeration by using membrane filtered vessels. Shoots acclimatized in vessel with membrane Inter were healthier and had higher ex vitro survival rate than those without membrane Inter on plug tray. Addition of paclobutrazol 0.3-0.4 mg/L, to acclimatization media enhanced shoots growth and root development.
Medicinal plants are high-value natural resources that have been used as precautionary drugs by many people globally. The increasing global demand for bioactive compounds from medicinal plants has led to the overexploitation of many valuable species. One widely used approach to overcome this problem is the use of adventitious root cultures as a propagation strategy. This review examines the scientific research published globally on the application of adventitious root cultures for many medicinal plants. Adventitious roots generated under aseptic environments in suitable phytohormone-augmented medium exhibit high growth rates and production of important secondary metabolites. Parameters such as medium properties and composition, growth hormone type, and elicitation strategies for in vitro grown adventitious roots of medicinal plants, are the main topics discussed in this review. We also examine current developments in bioreactor system cultivation for plant bioactive compounds using adventitious root cultures, a technology with possible commercial applications, via several studies on adventitious root culture of medicinal plants in which bioreactor systems play a role. In conclusion, the development of adventitious root cultures for medicinal plants is highly useful because of their capability for vegetative propagation and germplasm preservation.
Domestic sewerage treatment plant is operated by activated sludge method and its modified method by using microorganism. In most cases, a method of using microorganism is directly controlled by the operator based on individual judgment through factors of DO, pH and ORP. In addition, under aerobic condition in bioreactor, energy consumption including excessive air injection is learned to be somewhat plenty. In order to solve this problem, in most of the process, improvement of internal recycling and activated environmental factor of microorganism were researched extensively. However, as factors are changed depending on various conditions, it is not sufficient as an indicator of judgment. As such, a research on operation of bioreactor that measures metabolic change in short time by directly measuring activated condition of microorganism using NADH fluorometer is required in reality.It is considered that the method like this could supplement problem of energy consumption being occurred in the existing treatment method and operational optimization of bioreactor would be enabled by controlling optimal air volume. Therefore, in this study, in order to obtain optimal operational indicator of bioreactor, proper air volume control test was performed and through batch test and site evaluation, possibility of NADH sensor being utilized as operational control indicator of bioreactor is intended to be analyzed. In order to compare with measured value, DO, ORP that are operational control indicator of existing bioreactor were used. As MLSS concentration was increased through batch test, NADH value was increased and site evaluation also showed similar tendency to batch test. Resultantly, it could be confirmed that changing level of NADH fluorometer was a sensor that could measure bioreactor condition effectively and optimized scale of bioreactor is considered to be utilized.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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