Hyoung Joon Moon;Jin Sik Oh;Woonsung Na;Minjoo Yeom;Sang Yoon Han;Sung Jae Kim;Bong Kyun Park;Dae Sub Song;Bo Kyu Kang
IMMUNE NETWORK
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제16권5호
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pp.311-315
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2016
A pandemic influenza A (H1N1) virus strain was isolated from a pig farm in Korea in December 2009. The strain was propagated in and isolated from both the Madin-Darby canine kidney cell line and embryonated eggs. The partial and complete sequences of the strain were identical to those of A/California/04/2009, with >99% sequence similarity in the HA, NA, M, NS, NP, PA, PB1, and PB2 genes. The isolated strain was inactivated and used to prepare a swine influenza vaccine. This trial vaccine, containing the new isolate that has high sequence similarity with the pandemic influenza A (H1N1) virus, resulted in seroconversion in Guinea pigs and piglets. This strain could therefore be a potential vaccine candidate for swine influenza control in commercial farms.
Pleiomorphic adenoma gene-like1 (PLAGL1) encodes a zinc-finger (ZF) protein with seven ZFs of the C2H2-type which is a regulator of apoptosis and cell cycle arrest, and also regulates the secretion of insulin. In both human and mouse, PLAGL1 is a candidate gene for tumor suppressor and transient neonatal diabetes mellitus (TNDM). In this study, a 2,238 bp fragment covering the complete coding region was obtained and deposited to GenBank (accession number: DQ288899). The reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RT-PCR) indicated that PLAGL1 was expressed almost equally in heart, liver, spleen, lung, kidney, stomach, small intestine, skeletal muscle, fat, uterus and ovary. Comparing the sequences of Large White and Meishan pigs, a C-T transition in exon 6 was found. The polymorphism could be detected by TaqI and was genotyped in five purebreds (Large White, Landrace, Meishan, Tongcheng and Bamei). Association analysis was performed between the polymorphism and carcass traits in 276 pigs of a "Large White${\times}$Meishan" F2 resource population. As a consequence, significant associations of the genotypes with shoulder backfat thickness (SFT) and internal fat rate (IFR) were observed. Pigs with TT genotype had low SFT and high IFR compared with TC or CC genotypes.
Transplantation is considered to be a very useful approach to improve human welfare and to prolong life-span. Heterologous organ transplantation using pig organs which are similar to human beings and easy to make mass-production has known as one of the alternatives. To ensure potential usage of the pig organ for transplantation application, it is essentially required to generate transgenic pig modifying immuno-related genes. Previously, we reported production of heterozygous ${\alpha}1,3$-galactosyltransferase (GalT) knock-out and human membrane cofactor protein (MCP) expressing pig ($GalT^{-MCP/+}$), which is enforced for suppression of hyperacute and acute immunological rejection. In this study, we reported generation of homozygous pig ($GalT^{-MCP/-MCP}$) by crossbreeding $GalT^{-MCP/+}$ pigs. Two female founders gave birth to six of $GalT^{-MCP/-MCP}$, and seven $GalT^{-MCP/+}$ pigs. We performed quantitative real-time PCR, western blot, and flow cytometry analyses to confirm GalT and MCP expression. We showed that fibroblasts of the $GalT^{-MCP/-MCP}$ pig do not express GalT and its product Gal antigen, while efficiently express MCP. We also showed no expression of GalT, otherwise expression of MCP at heart, kidney, liver and pancreas of transgenic pig. Taken together, we suggest that the $GalT^{-MCP/-MCP}$ pig is a useful candidate to apply xenotransplantation study.
급성신손상은 높은 이환율과 치사율을 나타내는 심각한 질환이며, 허혈-재관류에 의한 신손상은 급성신손상의 중요한 원인이 된다. 본 연구는 미니돼지에서 급성신손상을 진단하는데 임상적으로 유용한 바이오마커를 찾아내기 위해 실시되었다. 세 마리의 미니돼지에서 60분간 신동맥을 결찰하여 양측성 신허혈을 유도하였다. 각 미니돼지에서 결찰 전, 결찰 후 0, 1, 3, 5일에 혈액 및 뇨 검체를 채취하였다. 혈청 및 뇨 검체에서 BUN, creatinine, 나트륨 및 요산을 측정한 후 나트륨 및 요산의 분획배설율($FE_{Na}$, $FE_{UA}$)을 산출하였다. 또한 IL-6, IL-18, L-FABA 및 GST를 Western immunoblotting을 실시하여 측정하였다. 결과에서 세 마리 미니돼지 모두 혈청 BUN과 creatinine 농도는 결찰 후 1일째에 유의적으로 증가하였다. 그러나 $FE_{Na}$와 $FE_{UA}$는 현저한 개체차를 보였다. 수술 전과 후를 비교했을 때 허혈 이후의 뇨 검체에서는 IL-6, IL-18, L-FABP 및 GST의 농도가 유의적으로 증가하였다. 결론적으로, $FE_{Na}$와 $FE_{UA}$에 대해서는 추가적인 연구가 필요하다고 생각되며, 혈청 BUN, creatinine과 뇨 IL-6, IL-18, L-FABP 및 GST는 돼지의 허혈-재관류 모델에서 다른 바이오마커와 함께 급성신손상을 진단하는 민감한 바이오마커가 될 수 있을 것이라 생각된다.
To study the effect of dietary docosahexaenoic acid (DHA) enrichment on the expression of hepatic genes in pigs, weaned, crossbred pigs (30 d old) were fed diets supplemented with either 2% tallow or DHA oil for 18 d. Hepatic mRNA was extracted. Suppression subtractive hybridization was used to explore the hepatic genes that were specifically regulated by dietary DHA enrichment. After subtraction, we observed 288 cDNA fragments differentially expressed in livers from pigs fed either 2% DHA oil or 2% tallow for 18 d. After differential screening, 7 genes were found to be differentially expressed. Serum amyloid A protein 2 (SAA2) was further investigated because of its role in lipid metabolism. Northern analysis indicated that hepatic SAA2 was upregulated by dietary DHA enrichment (p<0.05). In a second experiment, feeding 10% DHA oil for 2d significantly increased the expression of SAA2 (compared to the 10% tallow group; p<0.05). The porcine SAA2 full length cDNA sequence was cloned and the sequence was compared to the human and mouse sequences. The homology of the SAA2 amino acid sequence between pig and human was 73% and between pig and mouse was 62%. There was a considerable difference in SAA2 sequences among these species. Of particular note was a deletion of 8 amino acids, in the pig compared to the human. This fragment is a specific characteristic for the SAA subtype that involved in acute inflammation reaction. Similar to human and mouse, porcine SAA2 was highly expressed in the liver of pigs. It was not detectable in the skeletal muscle, heart muscle, spleen, kidney, lung, and adipose tissue. These data suggest that SAA2 may be involved in mediation of the function of dietary DHA in the liver of the pig, however, the mechanism is not yet clear.
Four-and-a-half LIM-only protein 3 (FHL3) is a member of the LIM protein superfamily and can participate in mediating protein-protein interaction by binding one another through their LIM domains. In this study, the 5'- and 3'- cDNA ends were characterized by RACE (Rapid Amplification of the cDNA Ends) methodology in combination with in silico cloning based on the partial cDNA sequence obtained. Bioinformatics analysis showed FHL3 protein contained four LIM domains and four LIM zinc-binding domains. In silico mapping assigned this gene to the gene cluster MTF1-INPP5B-SF3A3-FHL3-CGI-94 on pig chromosome 6 where several QTL affecting intramuscular fat and eye muscle area had previously been identified. Transcription of the FHL3 gene was detected in spleen, liver, kidney, small intestine, skeletal muscle, fat and stomach, with the greatest expression in skeletal muscle. The A/G polymorphism in exon II was significantly associated with birth weight, average daily gain before weaning, drip loss rate, water holding capacity and intramuscular fat in a Landrace-derived pig population. Together, the present study provided the useful information for further studies to determine the roles of FHL3 gene in the regulation of skeletal muscle cell growth and differentiation in pigs.
According to the increase of demand for human organs such as kidney, heart, pancreas, joint, and cornea for therapeutic transplantation, the production of alternative organs based on Gnotobiotic Pigs gains a lot of concerns all over the world. However, it is not common to design and build Gnotobiotic Pigs' facility, and there are only a few those facilities and planning principles for them. Considering the situation above, this paper tries to develop planning guidelines for space organization and circulation system of standardized Germ Free Pig's facility on the bases of case analysis. The results of this study are as follows. At first, four swine farms including a Gntobiotic Pig's facility has been analysed from the point of space organization and circulation system. Secondly, the space zoning of Gnotobiotic Pigs' facility has been proposed into 5 groups : pigs' area, adminstration area, operating room and laboratory, service area, and mechanical area. Space components of each group have been presented also. Finally, circulation system of Gnotobiotic Pigs' facility has been explored from a operational point of view. This, also, includes human circulation, pig's circulation, and goods' circulation. This study has some limitations because it does not consider the SOPs(standard operational policies) of that facility to the fullest measure and does not suggest space area of each part, either. Despite of some weaknesses, it is expected that this study can give some useful guidelines for the design and planning of Germ Free Pigs' facilities.
This study was designed to examine the involvement of lead in function of target organ, and the protective effect of selenium in lead-treated guinea pigs for 8 weeks. The effects of exposure to 0.5% lead acetate(lead) and/or 4ppm sodium selenite(selenium) in feed on serveral aspects were evaluated by measuring thyroid stimulating hormone(TSH), triiodothyronine($T_3$), thyroxine($T_4$), serum biochemical activities, organ weights, and serum and organ lead concentrations in growing animals. The many indicators of endocrine function(TSH, $T_3$, and $T_4$ in serum), enzyme and biochemical activities(${\alpha}$-glutamyltranspeptidase, alkaline phosphatase, lactate dehydrogenase, triglyceride, creatinine, $Ca^{2+}$ in serum), and organ weights(kidney, spleen and testis) were correlated with lead exposure or showed significantly different mean values between the exposed and controls. These changes on some aspects were reversed by combination-fed of selenium, but did not statistically significant. The organ(kidney, liver, spleen, testis and brain) and serum lead concentrations of lead-fed group were clearly higher than that of controls. Selenium supplementation resulted in a significant protection against lead accumulation in liver and testis. These results suggest that lead can cause a toxic effect on several organ and that selenium seems to has a protective effect on specific reaction by lead-induced organic function toxicity.
Kim, Joo-heon;Jeon, Je-cheol;Lee, Sang-kil;Lee, Su-jin;Lee, Younggeon;Won, Jinyoung;Kang, Jae seon;Hong, Yonggeun
대한수의학회지
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제47권4호
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pp.371-378
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2007
To understand the role of $PM_{2X}/P_{2Y}$ receptor in cortex region of kidney and renal artery, molecular and functional analysis of $PM_{2X}/P_{2Y}$ receptor by pharmacophysiological skill in conventional swine tissues were performed. In functional analysis of $P_{2Y}$ receptor for vascular relaxation, 2-methylthio adenosine triphosphate, a strong agonist of $P_{2Y}$ receptor, induced relaxation of noradrenaline (NA)-precontracted renal artery in a dose-dependent manner. Strikingly, relaxative effect of ATP, 2-msATP, agonists of $P_{2Y}$ receptor, abolished by treatment of reactive blue 2, a putative $P_{2Y}$ receptor antagonist. In contrast, no significant differences of gene encoding $PM_{2X}/P_{2Y}$ and protein expression in immortalized suprachiasmatic nucleus from brain, primary isolated vascular smooth muscle cells from renal artery of pigs and HEK293 from human embryonic kidney under with/without adenosine triphosphate were observed. Taken together, the relationship between molecular and functional characteristic of $PM_{2X}/P_{2Y}$ receptors in conventional pig should be considered that they are another important factor which regulate the kidney function in swine. Based on this study, we propose the purinergic receptor as well as adrenergic and cholinergic receptors is an essential component of the renal homeostasis.
In this study, we investigated the suppressive effects of ore minerals on the allergic cell damages and oxidative cell damages. The ore minerals significantly reduced the productions of tumor necrosis factor-alpha (TNF-${\alpha}$) and interleukin-4 (IL-4) in rat basophilic leukemia cells challenged with 2,4-dinitrophenol-bovine serum albumin (DNP-BSA). Lipoxygenase activity was also reduced by the ore minerals. Moreover, the ore minerals showed weak protective effects on the oxidative damage induced by hydrogen peroxide in pig kidney cells and retinal ganglion cells. Photohemolysis of erythrocytes in the presence of rose-bengal as a sensitizer was also inhibited by ore minerals. These results suggest that the ore minerals may be useful as the protectant for allergic and oxidative cell damages.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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