Agricultural antibiotics are widely used to inhibit the growth of phytopathogenic bacteria involved in plant diseases. However, continuous antibiotic overuse in crop production may lead to the development of antibiotic resistance in phytopathogenic bacteria. This study was conducted to evaluate the resistance to three different agricultural antibiotics (oxytetracycline+streptomycin, streptomycin, and validamycin A) in 91 strains of phytopathogenic bacteria including Pectobacterium carotovorum, Pseudomonas syringae pv. actinidiae, Clavibacter michiganensis subsp. michiganensis, C. michiganensis subsp. capsici, and Xanthomonas arboricola pv. pruni. Bacterial growth in the presence of various concentrations of validamycin A was also assessed spectrophotometrically by analyzing the optical density. All strains did not grow when the cells were exposed to oxytetracycline+streptomycin or 100× of streptomycin. However, among the 91 strains, 4% and 2% strains showed bacterial growth at the concentrations of 1× and 10× of streptomycin, respectively. Furthermore, 97%, 93%, and 73% strains were resistant to the 1×, 10×, and 100× of validamycin A, respectively, and especially, P. carotovorum contained the highest resistance to the validamycin A. Minimum bactericidal concentration values of validamycin A did not correlate with the patterns of agricultural antibiotic resistance. Further studies are needed to understand the incidence and development of antibiotic resistance in phytopathogenic bacteria.
Antimicrobial peptides (AMPs) are considered to be a promising alternative to conventional antibiotics for future generations. We identified four novel hexapeptides with antimicrobial activity: KCM11 (TWWRWW-$NH_2$), KCM12 (KWRWlW-$NH_2$), KCM21 (KWWWRW-$NH_2$), and KRS22 (WRWFIH-$NH_2$), through positional scanning of a synthetic peptide combinatorial library (PS-SCL). The ability of these peptides to inhibit the growth of a variety of bacteria and unicellular fungi was evaluated. KCM11 and KRS22 preferentially inhibited the normal growth of fungal strains, whereas KCM12 and KCM21 were more active against bacterial strains. Bactericidal activity was addressed in a clear zone assay against phytopathogenic bacteria, including Pectobacterium spp., Xanthomonas spp., Pseudomonas spp., etc. KCM21 showed the highest activity and was effective against a wide range of target organisms. Application of KCM21 with inoculation of Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum on detached cabbage leaves resulted in an immune phenotype or a significant reduction in symptom development, depending on the peptide concentration. Cytotoxicity of the four hexapeptides was evaluated in mouse and human epithelial cell lines using an MTT test. The results revealed a lack of cytotoxic effects.
Phytopathogenic bacteria causing soft-rot many vegetables; extracellular enzymes produced by them, pectate lyase(Pel) is important pathogenicity facotrs which cause tissue maceration and cell death. Ten of seventeen plant pathogenic bacteria showed weak Pel activity, four of them showed low Pel activity and Erwinia acrotovora subsp. carotovora, E. chrysanthemi, Pseudomonas marginalis and Xanthomonas campestris pv. campestris showed high Pel activity in the polygalacturonate yeast extract agar (PAY) plate. High Pel activity of the four bacteria species produced the highest Pel activity when pectin or polygalacturonic acid (PGA) was added to minimal salts (MS) medium. Pel activity of the four bacterial species was the highest at 2$0^{\circ}C$ among different temperature conditions. The rate and amount of maceration of potato tuber tissue were highest at 2$0^{\circ}C$ in E. carotovora subsp. carotovora, E. chrysanthemi and P. marginalis, while those were the highest at $25^{\circ}C$ in X. campestris pv. campetris.
Proceedings of the Korean Society of Plant Pathology Conference
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2004.10a
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pp.65-67
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2004
During initial interactions of bacteria with their host plants, most plants recognize the bacterial infections and repel the pathogen by plant defense mechanism. The most active plant defense mechanism is the hypersensitive response (HR) which is the localized induced cell death in the plant at the site of infection by a pathogen. A primary locus induced in gram-negative phytopathogenic bacteria during this initial interaction is the Hrp locus. The Hrp locus is composed of a cluster of genes that encodes the bacteral Type 111 machinery that is involved in the secretion and translocation of effector proteins to the plant cell. DNA sequence analysis of hrp gene in phytopathogenic bacteria has revealed a Hrp pathogenicity is]and (PAI) with a tripartite mosaic structure. For many gram-negative pathogenic bacteria, colonization of the host's tissue depends on the type III protein secretion system (TTSS) which secrets and translocates effector proteins into the host cell. Effectors can be divided into several groups including broad host range effectors, host specific effectors, disease specific effectors, and effectors inhibit host defenses. The role of effectors carrying LRR domain in plant resistance is very elusive since most known plant resistance gene carry LRR domain. Host specific effectors such as several avr gene products are involved in the determination of the host specificity. Almost all the phytopathogenic Xanthomonas spp. carry avrBs1, avrBs2, and avrBs3 homologs. Some strains of X. oryzae pv. oryzae carry more than 10 copies of avrBs3 homologs. However, the functions of all those avr genes in host specificity are not characterized well.;
Fitriana, Yuyun;Tampubolon, Desi Apriani Teresa;Suharjo, Radix;Lestari, Puji;Swibawa, I Gede
The Plant Pathology Journal
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v.38
no.5
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pp.449-460
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2022
This study was performed to reveal phenotypic characters and identity of symbiont bacteria of Nasutitermes as well as investigate their potential as antagonist of plant pathogenic fungi. Isolation of the symbiont bacteria was carried out from inside the heads and the bodies of soldier and worker termite which were collected from 3 locations of nests. Identification was performed using phenotypic test and sequence of 16S ribosomal DNA (16S rDNA). Antagonistic capability was investigated in the laboratory against 3 phytopathogenic fungi i.e., Phytophthora capsici, Ganoderma boninense, and Rigidoporus microporus. Totally, 39 bacterial isolates were obtained from inside the heads and the bodies of Nasutitermes. All the isolates showed capability to inhibit growth of P. capsici, however, 34 isolates showed capability to inhibit growth of G. boninense and 32 isolates showed capability to inhibit growth of R. microporus. Two bacterial strains (IK3.1P and 1B1.2P) which showed the highest percentage of inhibition were further identified based on their sequence of 16S rDNA. The result showed that 1K3.1P strain was placed in the group of type strain and reference strains of Lysinibacillus fusiformis meanwhile 1B1.2P strain was grouped within type strain and reference strains Paenibacillus alvei. The result of this study supply valuable information on the role of symbiont bacteria of Nasutitermes, which may support the development of the control method of the three above-mentioned phytopathogenic fungi.
Trichoderma harzianum is an aggressive causal agent of green mold disease on mushroom cultivation. Some bacterial strains isolated, from oyster mushroom compost in Wonju, were found to have in vitro antifungal activity against Trichoderma harzianum ATCC 6385, 6504, and our isolates Trichoderma spp. Y and G. Further in vitro antifungal studies on several strains of phytopathogenic fungi showed that all of 12 phytopathogenic fungal strains were significantly inhibited by the isolated antifungal bacteria in Petri dishes. Of these, KATB 99121 showed the broadest inhibiting effect and displayed as negative coagulase, negative sulfide production and rod shape. KATB 99121 was resistant to ampicillin, chlorampenicol, and kanamycin. Identification of isolates was determined by Biolog GN system, and KATB 99121 was identified as Photobacterium logei because of 96 probability, 0.65 similarity, and 4.97 disturbance. With electron microscopy, thin section of KATB 99121 strain revealed typical rod-like shaped cell (0.6-0.8${\mu}{\textrm}{m}$$\times$1.5-2.0${\mu}{\textrm}{m}$) with prokaryotic structure and organization.
The culture filtrate of Lentinula edodes shows potent antimicrobial activity against the plant pathogenic bacteria Ralstonia solanacearum. Bioassay-guided fractionation was conducted using Diaion HP-20 column chromatography, and the insoluble active compound was not adsorbed on the resin. Further fractionation by high-performance liquid chromatography (HPLC) suggested that the active compounds were organic acids. Nine organic acids were detected in the culture filtrate of L. edodes; oxalic acid was the major component and exhibited antibacterial activity against nine different phytopathogenic bacteria. Quantitative analysis by HPLC revealed that the content of oxalic acid was higher in the water extract from spent mushroom substrate than in liquid culture. This suggests that the water extract of spent L. edodes substrate is an eco-friendly control agent for plant diseases.
Lee, Yong Se;Ho Young Lee;Chang Ho Lee;Hee Sung Park
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.5
no.6
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pp.346-352
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1995
For isolation of antibiotic-producing bacteria antagonistic to Fusarium oxysporum, a total of 327 microorganisms were screened from sesame-growing soils collected at various locations in Korea by the modified Herr's triple-agar-Iayer technique. Among the 36 bacterial isolates further screened by the dual culture test on tryptic soy agar, 10 were tested to show their antagonistic activity against 14 plant pathogenic fungi. Bacterial culture filtrates were shown either to inhibit some phytopathogenic fungal growth or to suppress F. oxysporum infection of sesame plants maintained in the green house. An isolate, B23, with the most prominent antagonistic activity was identified as Bacillus subtilis.
Nguyen, Hoa Thi;Yu, Nan Hee;Park, Ae Ran;Park, Hae Woong;Kim, In Seon;Kim, Jin-Cheol
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.27
no.10
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pp.1763-1772
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2017
This study aimed to isolate and characterize antibacterial metabolites from Pharbitis nil seeds and investigate their antibacterial activity against various plant pathogenic bacteria. The methanol extract of P. nil seeds showed the strongest activity against Xanthomonas arboricola pv. pruni (Xap) with a minimum inhibition concentration (MIC) value of $250{\mu}g/ml$. Among the three solvent layers obtained from the methanol extract of P. nil seeds, only the butanol layer displayed the activity with an MIC value of $125{\mu}g/ml$ against Xap. An antibacterial fraction was obtained from P. nil seeds by repeated column chromatography and identified as pharbitin, a crude resin glycoside, by instrumental analysis. The antibacterial activity of pharbitin was tested in vitro against 14 phytopathogenic bacteria, and it was found to inhibit Ralstonia solanacearum and four Xanthomonas species. The minimum inhibitory concentration values against the five bacteria were $125-500{\mu}g/ml$ for the n-butanol layer and $31.25-125{\mu}g/ml$ for pharbitin. In a detached peach leaf assay, it effectively suppressed the development of bacterial leaf spot, with a control value of 87.5% at $500{\mu}g/ml$. In addition, pharbitin strongly reduced the development of bacterial wilt on tomato seedlings by 97.4% at $250{\mu}g/ml$, 7 days after inoculation. These findings suggest that the crude extract of P. nil seeds can be used as an alternative biopesticide for the control of plant diseases caused by R. solanacearum and Xanthomonas spp. This is the first report on the antibacterial activity of pharbitin against phytopathogenic bacteria.
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