• Molecules and Cells
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• 제19권3호
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• pp.375-381
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• 2005

Phospholipase C-${\beta}$ (PLC-${\beta}$) hydrolyses phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate and generates inositol 1,4,5-trisphosphate in response to activation of various G protein-coupled receptors (GPCRs). Using glial cells from knock-out mice lacking either PLC-${\beta}1$ [PLC-${\beta}1$ (-/-)] or PLC-${\beta}3$ [PLC-${\beta}3$ (-/-)], we examined which isotype of PLC-${\beta}$ participated in the cellular signaling events triggered by thrombin. Generation of inositol phosphates (IPs) was enhanced by thrombin in PLC-${\beta}1$ (-/-) cells, but was negligible in PLC-${\beta}3$ (-/-) cells. Expression of PLC-${\beta}3$ in PLC-${\beta}3$ (-/-) cells resulted in an increase in pertussis toxin (PTx)-sensitive IPs in response to thrombin as well as to PAR1-specific peptide, while expression of PLC-${\beta}1$ in PLC-${\beta}1$ (-/-) cells did not have any effect on IP generation. The thrombin-induced $[Ca^{2+}]_i$ increase was delayed and attenuated in PLC-${\beta}3$ (-/-) cells, but normal in PLC-${\beta}1$ (-/-) cells. Pertussis toxin evoked a delayed $[Ca^{2+}]_i$ increase in PLC-${\beta}3$ (-/-) cells as well as in PLC-${\beta}1$ (-/-) cells. These results suggest that activation of PLC-${\beta}3$ by pertussis toxin-sensitive G proteins is responsible for the transient $[Ca^{2+}]_i$ increase in response to thrombin, whereas the delayed $[Ca^{2+}]_i$ increase may be due to activation of some other PLC, such as PLC-${\beta}4$, acting via PTx-insensitive G proteins.

• Pediatric Infection and Vaccine
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• 제24권1호
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• pp.37-43
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• 2017

목적: 백일해는 백신접종으로 예방이 가능한 질환이지만 세계적으로 증가하고 있고, 국내에서도 환자가 증가하고 있는 추세이다. 저자들은 최근 창원 지역에서 발생한 백일해 환자의 역학적인 특징과 임상 양상을 알아보고자 이 연구를 실시하였다. 방법: 2015년 7월부터 2016년 3월까지 호흡기 증상을 주소로 창원파티마병원 소아청소년과에 내원하는 환자 중 1주 이상의 기침을 하면서 발작적인 기침, 기침 후 구토, 흡기 시 '흡' 소리(whooping), 야간 기침이 동반된 환자들을 대상으로 호흡기 검체를 채취하여 백일해에 대한 배양, 중합연쇄반응검사를 실시하였고, 혈액의 항백일해 독소 항체검사(anti-pertussis toxin of ELISA kit, IBL International GmbH)를 실시하였다. 기저에 질환이 있거나 최근 1년 안에 DTaP 혹은 Tdap 백신 접종을 한경우에는 제외하였다. 결과: 연구 기간 동안 대상 환자 50명 중 진단된 환자는 37명이었다. 이 중 중합연쇄반응검사에서 양성인 환자는 2명이었고 혈청검사에서 양성인 환자는 37명이었다. 환자의 연령은 생후 1개월부터 15세였다. 항생제 사용 후 모든 환자가 합병증 없이 회복되었다. 결론: 2015년 7월부터 2016년 3월까지 창원 지역에 백일해의 유행이 있었으며, 이 연구 결과는 향후 국내에서 발생하는 백일해 역학 연구에 도움이 될 것으로 판단한다.

• 대한약리학회지
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• 제29권2호
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• pp.253-261
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• 1993

Streptozotocin으로 당뇨병을 유발시킨 흰쥐를 모델로 하여 당뇨병으로 인한 인슐린의 antilipolytic action을 매개하는 insulin-sensitive cyclic nucleotide phosphodiesterase의 역할의 변화 가능성을 연구하였다. 흰쥐의 epididymal adipose tissue로부터 분리한 지방세포를 여러 약물과 toxin으로 전처치한 다음, insulin을 처치 또는 처치하지 않고 $37^{\circ}C$에서 15분 동안 incubation하였다. 그리고 나서 differential centrifugation으로 3 fractions로 분리한 다음 cAMP phosphodiesterase activity를 assay하였다. Insulin에 의한 PDE activities의 증가는 당뇨병군과 대조군 모두 crude microsomal (P2) fraction에서만 볼 수 있었다. P2 fraction을 2 nM insulin, $100\;{\mu}M$ isoproterenol, 또는 두 약물을 함께 처치하여 나타난 maximal effect는 두 군 모두에서 유의한 차이가 없었다. 그러나 basal PDE activities는 당뇨병균이 대조군에 비해 증가한 것으로 나타났다. 당뇨병군의 P2 fraction의 insulin-sensitive PDE activities는 $A_{1}$ adenosine receptor agonist 인 PIA에 의해서 영향을 받지 않은 반면, 대조군의 경우 PIA에 의해 basal PDE activities와 같게 감소하였다. 그리고 지방세포의 pertussis toxin에 대한 sensitivity는 당뇨병군이 대조군보다 더욱 민감하였다. 그러나 cholera toxin에 대한 sensitivity는 당뇨병군과 대조군 사이에 큰 차이를 볼 수 없었다. 이러한 결과로 보아 streptozotocin으로 당뇨병을 유발시킨 흰쥐의 지방세포에서, adenosine receptor와 같은 inhibitory receptor를 경유한 signalling의 감소는 $G_{i}$ proteins의 소실 또는 기능의 감소와 관련이 있으며, 또한 basal state에서 insulin-dependent PDE의 활성을 증가시키는 것으로 사료된다.

• Animal cells and systems
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• 제2권1호
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• pp.93-97
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• 1998

Coelomoic fluid protein (CP), a vitellogenin contained in the coelomic fluid of polychaetes, is transported by receptor-mediated endocvtosis that is controlled by GTP-binding proteins. Transport of 125l-CP was markedly inhibited by AlF4 and toxins such as cholera toxin and pertussis toxin. These effects appear to be mediated by cAMP, since 125l-CP transport was also greatly inhibited by dibutyryl cAMP. The results strongly suggest that hetero trimeric G-protein is involved in the regulation of 125l=CP transport through the activation of adenylyl cyclase. Immunoblotting tests with antibodies against Gsa and Gia subunits showed a Gsa subunit of 45 kDa in the membrane of oocytes of intermediate and large size classes and a Gia subunit of 41 kDa only in the oocytes of the intermediate size class.

• Pediatric Infection and Vaccine
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• 제19권2호
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• pp.55-60
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• 2012

목적: 우리나라의 백일해에 대한 연령별 방어면역 상태를 평가하고자 면역혈청학적 연구를 시행하였다. 방법: 국내 4개 대학병원에 방문한 건강한 소아, 청소년 및 성인을 대상으로 하였다. 대상을 연령에 따라 7개 연령군으로 구분하였고 ELISA 방법을 이용하여 백일해의 항체가를 측정하였다. 연령군별 기하 평균항체가와 각 연령군별 양성 항체가를 보이는 피험자의 비율을 조사하였다. 제조사의 지침대로, 항체가가 24.0 EU/mL 이상인 경우를 양성으로 판정하였다. 결과: 전체 1,605명의 피험자가 연구에 참여하였고, 기하 평균항체가는 $56.16{\pm}50.54EU/mL$였다. 연령군별로는 11세 미만 소아 연령군($64.78{\pm}53.24EU/mL$)이 가장 높은 기하 평균항체가를 보였다(P<0.001). 양성 항체가를 보인 피험자의 비율은 전체 대상의 68.2%였고, 11세 미만 소아 연령군(76.5%)이 가장 높은 비율을 보였다(P<0.001). 결론: 소아 연령군과 비교하여, 청소년과 성인 연령군에서 백일해에 대한 낮은 기하 평균항체가를 나타냈으며 양성 항체가를 갖는 피험자의 비율이 낮다는 것을 확인하였다.

• The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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• 제13권1호
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• pp.9-14
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• 2009

We cultured canine kidney(MDCK) cells stably expressing aquaporin-2(AQP2) on collagen-coated permeable membrane filters and examined the effect of extracellular ATP on arginine vasopressin(AVP)-stimulated fluid transport and cAMP production. Exposure of cell monolayers to basolateral AVP resulted in stimulation of apical to basolateral net fluid transport driven by osmotic gradient which was formed by addition of 500 mM mannitol to basolateral bathing solution. Pre-exposure of the basolateral surface of cell monolayers to ATP(100 ${\mu}M$) for 30 min significantly inhibited the AVP-stimulated net fluid transport. In these cells, AVP-stimulated cAMP production was suppressed as well. Profile of the effects of different nucleotides suggested that the $P2Y_2$ receptor is involved in the action of ATP. ATP inhibited the effect of isoproterenol as well, but not that of forskolin to stimulate cAMP production. The inhibitory effect of ATP on AVP-stimulated fluid movement was attenuated by a protein kinase C inhibitor, calphostin C or pertussis toxin. These results suggest that prolonged activation of the P2 receptors inhibits AVP-stimulated fluid transport and cAMP responses in AQP2 transfected MDCK cells. Depressed responsiveness of the adenylyl cyclase by PKC-mediated modification of the pertussis-toxin sensitive $G_i$ protein seems to be the underlyihng mechanism.

• Clinical and Experimental Pediatrics
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• 제50권4호
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• pp.355-362
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• 2007

목 적 : 3가 항원 DTaP 백신을 3회 기초 접종 받은 건강한 국내 영아에서 면역원성 및 안전성을 평가하고자 하였다. 방 법 : 2004년 4월부터 2005년 4월까지 5개 연구 참여 대학병원에서 제태기간 32주 이상에서 태어난 건강한 영아에게 생후 2, 4, 6개월에 3가 항원 DTaP 백신($Infanrix^{(R)}$)을 대퇴부 전외측에 접종하여 접종 전 혈청과 3차 접종 1개월 후 혈청에서 디프테리아, 파상풍, PT, FHA, PRN 항원에 대한 항체를 측정하여 면역원성을 평가하였고, 접종 후 3일 내에 발생이 예상되는 국소 및 전신 이상반응을 적극 관찰하였고 3주내에 발생한 모든 이상반응을 관찰하여 안전성 평가를 실시하였다. 한편, 2가 항원 DTaP 백신을 접종 받은 14명을 대조군으로 설정하여 연구군과 동일한 방법으로 면역원성을 평가하여 비교하였다. 결 과 : 60명에서 실시된 연구군의 면역원성 평가에서 디프테리아, 파상풍, FHA, PRN 항원에 대한 항체 양전율은 100%이었고, PT 항원에 대한 항체 양전율은 98.3%이었다. 한편 대조군에서 디프테리아, 파상풍, PT, FHA 항원에 대한 항체 양전율은 100%이었으나 PRN 항원에 대한 항체 양전율은 50%이었다. 147명에서 확인된 이상반응 평가에서 연구 기간동안 연구 백신과 인과관계가 있는 중증 이상반응은 없었고, 3일 내에 특이한 치료 및 처치가 없이 자연 소멸되는 국소 및 전신 이상반응만 관찰되었으며 접종 차수별 이상반응의 증가도 없었다. 결 론 : 이상의 결과를 볼 때에 3가 항원 DTaP 백신($Infanrix^{(R)}$)은 국내 영아 기초 접종에 유효한 백신임을 확인할 수 있었고, 국내에서 가장 많이 사용되고 있는 2가 DTaP 백신에 비해 PRN항원에 대한 항체의 면역원성이 높은 이점이 있음을 확인하였다. 그러나 향후 더욱 많은 대상을 통한 연구가 이루어져 이런 결과를 재입증하여야 할 것이고, 추가 접종에 대한 동일한 연구도 요구된다.

• The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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• 제6권3호
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• pp.139-142
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• 2002

To examine intracellular signaling of human $S1P_3\;(hS1P_3),$ a sphingosine 1-phosphate (S1P) receptor in plasma membrane, $hS1P_3$ DNA was transfected into RH7777 rat hepatoma cell line, and the inhibition of forskolin-induced cAMP accumulation and activation of MAP kinases by S1P were tested. In $hS1P_3$ transformants, S1P inhibited forskolin-induced activation of adenylyl cyclase activity by about 80% and activated MAP kinases in dose-dependent and pertussis-toxin (PTX) sensitive manners. In oocytes expressing $hS1P_3$ receptor, S1P evoked $Cl^-$ conductance. These data suggested that PTX-sensitive G proteins are involved in $hS1P_3-mediated$ signaling, especially the positive action of S1P in cell proliferation. The potential advantages of rat hepatoma cells for the research of sphingosine 1-phosphate receptor are discussed.

• Biomolecules & Therapeutics
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• 제14권2호
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• pp.110-113
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• 2006

We tested effect of sarcotride A, a bioactive cyclitol derivative from a marine sponge, on membrane potential in C6 glioma cells. Membrane potential was estimated by measuring fluorescence change of DiBAC-loaded glioma cells. Sarcotride A increased membrane potential in a concentration-dependent manner. We tested effects of pertussis toxin, U73122, EIPA, and $Na^+-free$ media on sarcotride A-induced increase of membrane potential to investigate involvement of G proteins, phospholipase C, $Na^+/H^+$ exchanger, and $Na^+$ channels. However, we were not able to observe any significant effect of those pharmacological inhibitors, excluding the involvement of the molecules as candidate targets or signaling molecules of sarcotride A-induced increase of membrane potential. Further investigation is necessary to elucidate action mechanism of sarcotride A.

• Journal of Ginseng Research
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• 제20권2호
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• pp.159-167
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• 1996

To study the effects of ginseng saponin components on the signal transduction in the ac tivation of murine macrophages, phagocytosis and Intracellular calcium concentration of peritoneal exuded mouse macrophages were examined. The phagocytosis was increased significantly after treatment with total saponin, diol-saponin, $Rg_1$ and $Rg_2$, but triol-saponin was unable to increase phagocytosis. The phagocytosis were increased when H7, a PKC inhibitor, was pretreated and increased significantly by saponin fractions except total saponin. Pertussis toxin, which inactivates G-protein, decreased the phagocytosis. But the phagocytosis was restored to the control level by saponin fractions and the phagocytosis was increased significantly by $Rg_2$ and $Rg_2$. The triol saponin increased phagocytosis approximately by 2-fold as compared with the TMB-8 treated group. Peritoneal exuded macrophages displayed a prominent rise in cytosolic calcium following treatment with triol-saponin, $Rg_1$, $Rg_2$ and $Rg_2$. Incubation of macrophages with PT resulted in an inhibition of cytosolic calcium mobilization, but increased cytosolic calcium mobilization with saponin fraction.