For the resistance test for Phytophthora blight of $T_1$ and $T_2$ transformants in pepper, Phytophthora blight fungus was inoculated to seedlings of the $T_1$ and $T_2$ transformants by concentration (density: zoospore $10^3/ml$). Occurrence rate of blight at 5days after inoculation was 4.0 % in T1-1 line and 10.0% in $T_1-2$ line, and its rate for 12 days after inoculation was 52.0% in $T_1-1$ line, 64.0% in $T_1-2$ line, respectively. Therefore, the lower occurrence rate to blight was enable to select resistant transformants in the some inoculation density (zoospore $10^3/ml$), meanwhile 'Kumtap' and 'Subicho' were 100% in highest occurrence rate to blight. For field test, in which blight was commonly occurred, of the Youngyang Pepper Experiment Station, the acquired transformant resisting to blight was similar to characteristics of domestic varieties, 'Subic
ho' for fruit shape, but there are some differences in growth, days to flowering, fruit characteristics. Occurrence of blight in $T_2-1-6$, and $T_2-4-9$ lines was smaller approxmately 30% than commercial varieties, 'Kumtap', although occurrence of blight in field was showed higher difference among tested lines. In this study, we concluded that the transformants showing blight resistance selected from habitual field could be fixed at every generation, and the developed transformation system was also considered to develop transformants in pepper.
A rapid radicle assay for prescreening antagonistic bacteria to Phytophthora capsic4 causal agent of Phytophthora blight of pepper was developed. Sixty-four bacterial strains with in vitro antifungal activity selected out of 1,400 strains isolated from soils of Ansung, Chunan, Koyang, and Paju, Korea in 1998 were used for development of the bioassay. Uniformly germinated pepper seeds dipped in bacterial cells for 3 hours were placed near the edges of growing mycelia of P. capsici on water agar containing 0.02% glucose. Five-week-old pepper plants(cv. Nockwang) were inoculated to compare with results of the radicle assay developed in this study. For plant inoculation, pepper seeds were sown in potting mixtures incorporated with the bacterial strains, then transplanted into steam-sterilized soils 3 weeks later. Plants were hole-inoculated with zoospores of P. capsici 2 weeks after transplanting. Disease incidence and severity were determined in radicle and plant assessments, respectively. In radicle assay, six strains, GK-B15, GK-B25, OA-B26, OA-B36, PK-B09, and VK-B14 consistently showed the significant(P=0.05) disease reduction against radicle infection by the fungus, four of which also did in plant assessments. Strains OA-B36 and GK-B15 consistently reduced the fungal infection in both the radicle assay and the plant assessment. Therefore, prescreening strains using the radicle assay developed in this study followed by plant assay could reduce time and labor, and improved the possibility of selecting antagonistic bacteria for control of Phytophthora blight of peppers.
Antifungal activities of the crude extracts of Anemarrhena asphodeloides. Coptis japonica and Phellodendron amurense were tested against Phvtophthora capsici. and the control effect on red-pepper phytophthora hlight and phytotoxicities of red-pepper were investigated. The results were summarized as follows; Mycelial growth and zoosporangial germination of the red-peppcr phytophthora hlight organism P. capsici were inhihited hy thc crude extracts of plant materials. Methanol extracts or plant materials had hctter antifungal activity than water extracts at hoth a room temperature and a hoiling condition. Antifungal activities of three crude extracts were gradually decreased with prolonged storage period. Red-pepper phytophthora hlight was effectively controlled hy the crude extracts of three plant materials. Of these. the crude extract of C. japonica was marvelously effective. Phytotoxic symptom to red-pepper seedling showed hy water cultural method hut not by pot test. Seed germination and radicle growth of red-pepper were inhihited hy the crude extracts of three plant materials. Phytotoxic symptoms in the leaves and fruits of red-pepper were not ohserved with exogenous foliage application of the three crude extracts.
Previously, Pseudomonas plecoglossicida YJR13 and Pseudomonas putida YJR92 from a sequential screening procedure were proven to effectively control Phytophthora blight caused by Phytophthora capsici. In this study, we further investigated the anti-oomycete activities of these strains against mycelial growth, zoospore germination, and germ tube elongation of P. capsici. We also investigated root colonization ability of the bacterial strains in square dishes, including cell motility (swimming and swarming motilities) and biofilm formation. Both strains significantly inhibited mycelial growth in liquid and solid V8 juice media and M9 minimal media, zoospore germination, and germ tube elongation compared with Bacillus vallismortis EXTN-1 (positive biocontrol strain), Sphingomonas aquatilis KU408 (negative biocontrol strain), and MgSO4 solution (untreated control). In diluted (nutrient-deficient) V8 juice broth, the tested strain populations were maintained at >108 cells/ml, simultaneously providing mycelial inhibitory activity. Additionally, these strains colonized pepper roots at a 106 cells/ml concentration for 7 days. The root colonization of the strains was supported by strong swimming and swarming activities, biofilm formation, and chemotactic activity towards exudate components (amino acids, organic acids, and sugars) of pepper roots. Collectively, these results suggest that strains YJR13 and YJR92 can effectively suppress Phytophthora blight of pepper through direct anti-oomycete activities against mycelial growth, zoospore germination and germ tube elongation. Bacterial colonization of pepper roots may be mediated by cell motility and biofilm formation together with chemotaxis to root exudates.
Proceedings of the Korean Society of Plant Pathology Conference
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1994.06a
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pp.50-61
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1994
Biological control of important fungal diseases such as Phytophthora blight of red pepper, gary mold rot of vegetables, and powdery mildew of many crops was attempted using an antagonistic bacterium, Bacillus sp. AC-1 in greenhouses and fields. The antagonistic bacterium isolated from the rhizosphere soils of healthy red pepper plant was very effective in the inhibition of mycelial growth of plant pathogenic fungi in vitro including Phytophthora capsici, Rhizoctonia solani, Pyricularia oryzae, Botrytis cinerea, Valsa mali, Fusarium oxysporum, Pythium ultimum, Alternari mali, Helminthosporium oryzae, and Colletotrichum gloeosporioides. Culture filtrate of antagonistic Bacillus sp. AC-1 applied to pot soils infested with Phytophthora capsici suppressed the disease occurrence better than metalaxyl application did until 37 days after treatment in greenhouse tests. Treatments of the bacterial suspension on red pepper plants also reduced the incidence of Phytophthora blight in greenhouse tests. In farmers' commercial production fields, however, the controlling efficacy of the antagonistic bacteria was variable depending on field locations. Gray mold rot of chinese chives and lettuce caused by Botrytis cinerea was also controlled effectively in field tests by the application of Bacillus sp. AC-1 with control values of 79.7% and 72.8%, respectively. Spraying of the bacterial suspension inhibited development of powdery mildew of many crops such as cucumber, tobacco, melon, and rose effectively in greenhouse and field tests. The control efficacy of the bacterial suspension was almost same as that of Fenarimol used as a chemical standard. Further experiments for developing a commercial product from the antagonistic bacteria and for elucidating antagonistic mechanism against plant pathogenic fungi are in progress.
Four major diseases of chili pepper including two fungal diseases, anthracnose (Colletotrichum acutatum) and Phytophthora blight (Phytophthora capsici), and two bacterial diseases, bacterial wilt (Ralstonia solanacearum) and bacterial spot (Xanthomonas campestris pv. vesicatoria), were investigated under future climate-change condition treatments in growth chambers. Treatments with elevated $CO_2$ and temperature were maintained at $720ppm{\pm}20ppm$$CO_2$ and $30^{\circ}C{\pm}0.5^{\circ}C$, whereas ambient conditions were maintained at $420ppm{\pm}20ppm$$CO_2$ and $25^{\circ}C{\pm}0.5^{\circ}C$. Pepper seedlings or fruits were infected with each pathogen, and then the disease progress was evaluated in the growth chambers. According to paired t-test analyses, bacterial wilt and spot diseases significantly increased by 24% (p=0.008) and 25% (p=0.016), respectively, with elevated $CO_2$ and temperature conditions. On the other hand, neither Phytophthora blight (p=0.906) nor anthracnose (p=0.125) was statistically significant. The elevated $CO_2$ and temperature accelerated the progress of bacterial wilt by two days and bacterial spot by one day compared to the ambient treatment. Temperature regime studies of the diseases without changes in $CO_2$ confirmed that the accelerated bacterial disease progress was mainly due to the increased temperature rather than the elevated $CO_2$ conditions.
M. Rajkumar;Lee, Kui-Jae;Park, Min-Kyung;Jo, Rae-Yun;Lee, Wang-Hui
Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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2003.10b
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pp.47-47
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2003
Plant growth promoting rhizobacteria (PGPR) have been shown to suppress phytopthora blight. This suppression has been related to both microbial antagonism and induced resistance. The PGPR isolates were screened by dual culture plate method and most of the isolates were showed varyinglevels of antagonism. Among the PGPR isolates pyoverdin, pyochelin and salicylic acid producing strains showed the maximum inhibition of mycelial growth of Phytophthora capsici and increased plant growth promotion in red pepper. PGPR isolatesfurther analysed for its ability to induce production of defence related enzymes and chemicals. The activities such as Phenyle alanin ammonia lyase (PAL), Peroxidase (PO), Polyphenol oxidase (PPO) and accumulation of phenolics were observed in PGPR pretreated red pepper plants challenged with Phytophthora capsici. The present study shows that an addition of direct antagonism and plant growth promotion, induction of defense related enzymes involved to enhance resistance against invasion of P. capsici in red pepper.
Kim, Sang-Dal;Lee, Eun-Tag;Lim, Si-Kyu;Nam, Doo-Hyun;Khang, Yong-Ho
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.13
no.3
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pp.415-421
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2003
A bacterium, Pseudomonas fluorescens 2112, that is antagonistic against a red-pepper blight-causing fungus, Phytophthora capsici, was isolated from the local soil of Gyongju, Korea. This strain formed an orange-colored clear halo zone on chrome azurol S (CAS) blue agar, suggesting the production of a siderophore in addition to an antifungal antibiotic. The optimal culture conditions for siderophore production by P. fluorescens 2112 were 30-h cultivation at $25^{\circ}C$ and pH 6.5 in King's B medium. The presence of $20{\mu}g/ml\;of\;Fe^3+$ ion or EDDHA promoted the production of siderophore in King's B medium. The siderophore was purified from culture broth by CM-Sephadex C-25 and Sephadex G-25 column chromatographies. The UV spectra of the purified siderophore was the same as that of pyoverdins or pseudobactins. The molecular mass was 1,958 Da determined by FAB-rlass spectrometer, and the amino acid composition analysis showed that the purified siderophore consisted of glycine/threonine/serine/glutamic acid/alanine/lysine with the molar ratio of 3:2:1:1:1:1, DL-Threo-${\beta}$-hydroxyaspartic acid and $N^{\delta}$-hydroxyornithine, two of the essential constituents of pyoverdin, were also found. The purified siderophore pyoverdin showed strong in vitro and in vivo antagonistic activities against phytophthora blight-causing P. capsici. Especially in an in vivo pot test, the siderophore protected red-pepper Capsicum annum L. very well from the attack of P. capsici. These results indicated that the purified siderophore of P. fluorescens 2112 played a critical role in the biocontrol of the red-pepper blight disease, equivalent to treatment by P.fluorescens 2112 cells.
Phytophthora blight and anthracnose disease caused by Phytophthora capsici and Collectotrichum gloeosporioides are the most important devastating diseases of red pepper plants, worldwide. Five different bacterial isolates were isolated from the red pepper rhizosphere and non-rhizosphere soil and subsequently tested for antagonistic activity against P. capsisi and C. gloeosporioides. The area of the inhibition zone was taken as a measure for antagonistic activity. Among the 5 isolates tested, S54 exhibited a maximum antagonistic activity under in vitro and in vivo conditions. In greenhouse studies the isolate has successfully reduced the disease symptom. Protect value was 80.8% (Phytophthora blight) and 81.9% (Anthrancnose disease), whereas the infection rate of control plants was 21.3% and 23.2%. Based on the 16S rDNA sequence and API 50CHB Kit analysis the most effective isolate was identified as Bacillus subtilis. The results of the study indicate that the stratin S54 could be used as an potential biological control of Phytophthora blight and anthracnose disease of red pepper.
Ahn, Mun-Il;Do, Ki Seok;Lee, Kyeong Hee;Yun, Sung Chul;Park, Eun Woo
Research in Plant Disease
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v.26
no.4
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pp.229-238
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2020
Field validation of PBcast, an infection risk model for Phytophthora blight of pepper, was conducted through a designed field experiment in 2012 and 2013. Conduciveness of weather conditions at 26 locations in Korea in 2014-2017 was also evaluated using PBcast. The PBcast estimated daily infection risk (IR) of Phytophthora capsici based on weather and soil texture data. In the designed filed experiment, four treatments including routine sprays at 7-day intervals (RTN7), forecast-based sprays when IR reached 200 (IR200) and 224 (IR224), and no spray (CTRL) were compared in terms of disease incidence and number of sprays recommended for disease control. In 2012, IR had reached over 200 twice, but never reached 224. In 2013, IR had reached over 200 three times and once higher than 224. The RTN7 plots were sprayed 17 and 18 times in 2012 and 2013, respectively. Weather conditions throughout the country were generally conducive for Phytophthora blight and 3-4 times of fungicide sprays would have been reduced if the PBcast forecast information was adopted in the decision-making for fungicide sprays. In conclusion, the PBcast forecast would be useful to reduce fungicide applications without losing the disease control efficacy to protect pepper crop from Phytophthora blight.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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