본 연구는 황백에 함유되어 있는 주요 화합물인 berberine, palmatine, limonin 및 rutaecarpine의 CYP2D6 및 p-glycoprotein 활성에 대한 저해정도를 탐색함으로써, 황백을 다른 양약과 병용시 약물상호작용을 유발할 수 있는 가능성을 평가하고자 하였다. 인체 간 마이크로좀 시료에 CYP2D6 동효소의 기질약물인 dextromethorphan과 NADPH 재생성계 및 저해제 ($200{\mu}M$)를 첨가한 후 반응시켜 생성된 대사물을 LC/MS/MS를 이용하여 정량하여 CYP2D6 동효소 활성의 변화를 평가하였다. 또한 약물수송단백인 p-glycoprotein의 활성은 L-MDR1 세포주를 이용한 calcein AM 축적 실험을 통하여 평가하였다. 그 결과 식물 알카로이드인 berberine에서 강력한 CYP2D6 활성 저해능을 관찰하였으며, 저해 효과는 농도 의존적으로 증가하였으며, mechanism-based 저해 기전을 나타내었다. 그러나 limonine과 rutaecarpine은 CYP2D6 저해 활성을 보이지 않았고, p-glycoprotein 기능에 대해서는 평가한 어떤 화합물도 저해 활성을 나타내지 않았다. 황백의 주요 성분인 berberine의 CYP2D6 활성 저해능을 고려할 때, 황백을 CYP2D6 기질약제와 병용시 약물상호작용을 유발할 가능성을 보여준다. 이러한 황백의 CYP2D6를 매개로한 임상적인 약물상호작용 가능성은 임상시험을 통하여 추가적인 검정이 필요할 것으로 사료된다.
Background: To date, the anti-wrinkle efficacy of phellodendri cortex has not been defined. In this study, we investigated the nitric oxide (NO) production and elastase inhibitory activities of 80% methanol extract of Phellodendri cortex and its ethyl acetate fraction. Methods and Results: We prepared 80% methanol extract, and its fractions from phellodendri cortex. The treatment of RAW 264.7 cell with $25{\mu}g/m{\ell}$ 80% methanol extract and ethyl acetate fraction resulted in no toxicity. We conducted assays of nitric oxide (NO) production and elastase inhibition. In the NO production assay, the ethyl acetate fraction showed an inhibitory effect approximately 17 times stronger than the 80% methanol extract. In elastase inhibitory assay, the ethyl acetate fraction also showed a stronger effect than the 80% methanol extract. In order to standardize the extract and fraction, we used TLC to separate the extract and observed the plate under UV light. We confirmed that the known pharmacological ingredients berberine, and palmatine in the 80% methanol extract and the ethyl acetate fraction. Conclusions: These results indicated that phellodendri cortex extract and its ethyl acetate fraction produced strong inhibitory effect on elastase and NO production.
This study was carried out to investigate the tracheal muscle relaxation of water extracts of three kinds of Coptis rhizoma and also compare their effects with berberine and palmatine, which are the important alkaloid components of Coptis rhizoma, in isolated rat tracheal smooth muscle. As a result Coptis chinenis showed significant tracheal muscle relaxation on KCI-induced contraction and more markedly on carbachol-induced contraction in dose-dependent manner. Coptis japoinin exhibited also tracheal muscle relaxation on both contraction with slightly weaker activities than those of Coptis chinensts. The activities of the root hair of Coptis chinensis were the most weakest in three rhizomas. Berberine and palmatine had strong tracheal muscle relaxation, especially, on carbachol-induced contraction, however, their activities on KCI-induced contraction were weaker than that of Coptis chinenis. The inhibitory effects of three kinds of Coptis rhizoma on the contraction by KCI and carbachol were investigated to explain the process of their tracheal muscle relaxation. All rhizomas inhibited the contraction by both agents, among them, Coptis japonica showed the most significant effect, so indicating that the tracheal muscle relaxation of Coptis rhizoma may be concerned with the blocking of muscarine receptor and $Ca^{2+}$channel.
The effects of bioactive fractions containing protoberberine alkaloids from Coptis japonica on monoamine oxidase (MAO) activity were investigated. The MAO was obtained from the mitochondrial fraction of mouse brain. The butanol fraction from Coptis japonica was fractionated into separate bioactive fraction (Fr I-IV) by silica gel column chromatography. MAO activity was strongly inhibited by Fr III and IV, which mainly contain protoberberine alkaloids such as berberine, palmatine and coptisine. These results indicated that the protoberberine alkaloids from Coptis japonica had an inhibitory effect on MAO activity.
Park, Young-Goo;Choi, Myung-Suk;Yang, Jae-Kyung;Paik, Ki-Hyon
Journal of the Korean Wood Science and Technology
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제29권3호
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pp.92-98
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2001
Allelopathic effects of the cork tree (Phellodendron amurense Rupr.) on several crops and soil miro-organisms were assessed using germination bioassay and antimicrobial assay, and allelochemicals were identified. In a germination bioassay, extract of cork tree inhibited at high concentration on germination of several crop seeds such as cabbage, lettuce, and cucumber. However, aqueous extracts inhibited powerfully growth of test organisms such as Streptococus aureus, S. aureus, S. typhimurium, and E. coli as bacteria, and Candida albicans as yeast, and Botrytis cineria and Alternata alternaria as fungi.. The cork tree extract showed strong antimicrobial activities against isolated soil fungi. The allelochemicals were separated using Silica gel, Sephadex LH-20 gel column chromatography and HPLC. The substances were analyzed by UV spectrometry and EI-mass spectrometry. The active allelochemicals were identified as isoquinoline alkaloids, berberine and palmatine.
The Phellodendri Cortex of Phellodendron amurense (Rutaceae) is known to contain a number of isoquinoline alkaloid, and berberine, palmatine, jateorrhizine, phellodendrine and magnoflorine are the major constituents of protoberberine alkaloids. For the determination of protoberberine alkaloids from Phellodendri Cortex and berberine chloride from the preparation, the new spectrophotometric method was developed with a simple and selective sample clean-up using thiocyanatocobaltate[II] complex ion. Samples were extracted with 0.1 mM hydrochloric acid, potassium biphthalate reagent, thiocyanatocobaltate reagent and 1.2-dichloroethane for 60 min. The absorbance of protoberberine alkaloid complexes in 1.2-dichloroethane solution was measured at 625 nm. Calibration curve for berberine was linear over the concentration range of 0.05~0.30 mg/ml 1.2-dichloroethane. The method proved to be rapid, simple and reliable for the determination of protoberberine alkaloids from Phellodendri Cortex and berberine chloride from the preparation.
The Coptis Rhizome is known for containing a number of isoquinoline type alkaloids. Berberine, coptisine and palmatine are the major constituents of alkaloids. The alkaloids were isolated and determined by forming complex from Coptis japonica (Ranunculaceae). For the determination of these alkaloids, a new spectrophotometric method was developed with a simple and selective sample clean-up using thiocyanatocobaltate[II] complex ion. The absorbance of alkaloidal complex in l,2-dichloroethane solution was measured at 625 nm. A calibration curve for the alkaloids isolated from Coptis Rhizome was linear over the concentration range of 0.2-0.3 mg/mι. The method proved to be rapid, simple and reliable for the isolation and the determination of the alkaloids in Coptis Rhizome.
반하백출천마탕은 다양한 약리활성을 가진 전통한방처방이다. 본 연구는 한방처방의 품질관리를 위한 기초자료로서, 고성능액체 크로마토그래피 (RP-HPLC)을 이용한 반하백출천마탕에서 12종 지표성분 Homogentisic acid, Hesperidin, Naringin, Alisol A, Atractylenolide II, Atractylenolide III, Ginsenoside Rg1, Formononetin, Gastrodin, Berberine, Palmatine, 6-gingerol를 동시분석 하였다. 표준액은 상업용 $C_{18}$ 역상 컬럼과 이동상으로 물(0.1% TFA)과 아세토나이트릴을 사용하여 기울기용매조성법인 유속은 1.0mL/min, 주입부피는 $10{\mu}L$, 컬럼오븐 온도 $40^{\circ}C$, 파장 200, 220, 280, 340nm에서 수행되었다. 이 결과 모든 표준성분의 검량선은 우수한 직선성 $r^2$ >0.999으로 나타내었다. 또한 검출한계(LOD)와 정량한계(LOQ)는 $0.012{\sim}0.878{\mu}g/mL$ 및 $0.009{\sim}0.290{\mu}g/mL$, 정밀성 intra-day와 inter-day는 0.07~1.21%및 0.20~0.90%, 회수율은 97.17~108.40%, 각각의 함량은 매우 미미한 변화를 타나내었다. 이 연구결과는 실험적으로 입증된 동시분석법의 확립에 따라 반하백출천마탕의 품질평가를 효율적으로 보여주었다.
자음강화탕(Jaeumgangwha-tang, JGT)은 전통적인 한방처방으로, 만성 기관지염과 염증 질환 등을 치료하는데 사용된다. 자음강화탕을 10종의 균주로 발효한 후, HPLC-DAD를 이용하여 발효 전, 후의 자음강화탕에서 생물활성을 가지는 5-hydroxymethylfurfural(5-HMF), paeoniflorin, nodakenin, hesperidin, nodakenetin, palmatine, berberine, glycyrrhizin을 지표성분으로 설정하고 변화를 관찰하였다. 8종의 지표성분에 대하여 정성, 정량적인 동시분석을 수행하였고 머무름 시간($t_R$)과 UV 최대 흡수파장을 비교하였다. 이 결과 paeoniflorin이 6.95 mg/g으로 자음강화탕의 주성분으로 확인되었다. Lactobacillus fermentum KFRI 145으로 발효된 자음강화탕에서 nodakenetin의 함량이 $0.47{\pm}0.01mg/g$으로 관측되어 nodakenetin이 발효 후의 자음강화탕에서 발효 전보다 2,250% 증가한 것을 확인하였다. 또한 Lactobacillus acidophilus KFRI 162으로 발효된 자음강화탕에서 paeoniflorin과 hesperidin을 제외한 가장 많은 화합물들이 증가하는 것을 확인하였다.
황련해독탕(HHT)은 기력을 회복하며 여러 만성질환을 예방하고 치료하기 위해 예로부터 사용되어온 약재로, 본 연구는 인삼에서 분리한 유산균 Leuconostoc mesenteroides (L. mesenteroides)을 이용해 황련해독탕 발효물(FHHT)을 제조하고 항산화, 항주름 및 미백 효과를 조사하였다. 황련해독탕 발효물은 황련해독탕을 70% 에탄올로 추출한 후에 L. mesenteroides를 접종하여 발효 제조하였다. 발효 전 황련해독탕과 황련해독탕 발효물에서 2가지 지표 성분 berberine과 palmatine을 high-performance liquid chromatography (HPLC)을 이용하여 retention times ($t_R$)과 UV spectra를 확인함으로써 정성 및 정량 분석하였다. 세포 생존율 실험 결과, 발효 전후 황련해독탕 모두 독성이 확인되지 않았고 DPPH 라디칼 소거능 실험은 발효물의 $SC_{50}$ 값이 $68.85{\mu}g/mL$로 발효 전보다 우수한 효능을 나타내었다. Procollagen type I의 생성량 측정 실험에서도 역시 황련해독탕 발효물은 발효 전보다 더 높은 발현량을 나타내었으며, 세포 독성을 나타내지 않는 농도에서 흑색종 세포인 B16F10을 이용한 멜라닌 생성 억제 활성 실험 결과, 황련해독탕 발효물은 강한 멜라닌 생성 억제 효과를 나타내었다($IC_{50}=9.82{\mu}g/mL$). 이상의 결과들로부터 황련해독탕 발효물이 항산화 효능, 항주름 효능뿐만 아니라 미백 효능을 갖는 화장품 원료로서 개발 가능성이 있음이 시사되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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