• 한국동물학회지
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• 제28권3호
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• pp.166-178
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• 1985

한국형 B형 간염바이러스(HBV) DNA의 표면항원 유전자를 포유동물 세포에서 발현시켜 항원의 검출과 유전자의 분자유전학적인 연구를 하기 위하여 pre-surface antigen 지역과 표면항원 유전자 그리고 poly(A) addition site가 포함된 DNA 조각을 simian virus 40(SV 40)의 DNA 복제 원점과 promoter가 포함된 유전자 운반체에 재조함 시켰다. 우선, HBV DNA가 들어있는 pHBV 107을 Bam HI으로 부분절단한뒤 self-ligation시켜 두 HBV DNA가 같은 방향으로 들어간 pHBVD 107을 만들었다. 이 plasmid를 Bgl II로 절단하였을때 pre-surface지역과 표면항원 유전자 그리고 poly(A) addition site가 함께 포함된 2.7 kb의 insert DNA 조각을 얻었다. 유전자 운반체로는 포유동물세포에서 복제할 수 있도록 하기 위하여 SV40의 DNA 복제 원점부위와 72 bp repeats(enhancer)가 포함된 pSVOE를 만든다음 이 vector의 Pvu II 절단자리에 Bam HI linker를 붙여 insert DNA가 vector의 SV40 late promoter지역 가까이에 들어갈 수 있도록 변형시킨 pSVOB를 만들었다. 이상과 같이 만들어진 pre-surface 지역-표면항원유전자-poly(A)-addition site가 포함된 2.7 kb DNA 절편을 pSVOB promoter 뒤의 Bam HI site에 삽입하여 재조합된 plasmid pSVBS를 얻었다. 예비실험으로 pSVBS를 T-antigen이 생산되는 COS cell에 이주시켰더니 $HB_sAg$가 발현됨을 보았다.

• Journal of Nutrition and Health
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• 제32권3호
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• pp.221-229
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• 1999

Certain indigestible oligosaccharides may benefit gastrointestinal tract via fermentation and proliferation of desirable bacterial species. The purose of this study was to elucidate the effect of selected oligosaccharides, such as fructooligosaccharides(FOS), soybean oliosaccharides(SOE), and highly concentrated branched oligosaccharides(HiBOS), on fecal micorflora proliferation, lipid concentration, lipid peroxide formation and antioxidant enzymes acitivies in plasma and liver of the rats. Thirty two male Sprague-Dawley rats were randomly assigned to one of four treatments ; 1) control diet(AIN-93G diet); 2) control diet +5% FOS ; 3) control diet + 5% SOE ; 4) control diet + 5% HiBOS. The duration of the study was 4 weeks. Fecal bifidobacteria concentration were significantly higher (p<0.05) in the HiBOS group compared with the control after 4 weeks of dietary treatment. FOS and SOE groups also had higher fecal bifidobacteria levels than control, but statistical significance was not found. The concentration of plasma total lipid was decreased by oligosaccharide consumption, especially in HiBOS group(p<0.05). The concentration of plasma total triglyceride was significantly lower in all of the oligosaccharide containing groups compared with the control(p<0.05). The plasma total cholesterol concentration tended to be lower in the oligosaccharide consuming groups than control. The concentrations of hepatic total lipid, triglyceride and total cholesterol were not affected by consumption of oligosaccharides. Thiobarbituric acid reactive substance(TBARS) concentrations and antioxidant enzyme activities in plasma and liver were not affected much by experimental diets. There results suggest that dietary oligosaccharides may be beneficial for increasing intestinal bifidobacteria and lowering plasma lipid levels.

• 농업과학연구
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• 제48권2호
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• pp.231-239
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• 2021

This study evaluated the effect of microwave-dried black soldier fly (Hermetia illucens) larvae meal (HILM) as a dietary protein source for broiler diets. A total of 250 male broilers were randomly allocated to five dietary treatment groups (10 replicates and 5 birds·pen^-1) which were respectively fed the following: a control diet (HI0) and four experimental diets in which soybean meal was replaced with 2 (HI2), 4, 6, and 8% HILM. At the end of the study (35 d), blood samples were collected from 10 randomly selected broilers (1 bird per pen) to determine serum parameters. Then, the broilers were slaughtered to determine volatile fatty acid (VFA) profiles in cecal digesta. The average daily gain and average daily feed intake linearly decreased (p < 0.01), and the feed conversion ratio linearly increased (p < 0.05) according to the inclusion level of HILM; however, there were no significant differences between the HI0 and HI2 groups. Dietary HILM increased (p < 0.01) the total VFAs in cecal digesta and decreased (p < 0.05) the triglyceride level in the blood. The broilers fed HILM had lower (p < 0.01) serum phosphorus levels; dietary HILM increased (p < 0.05) the serum calcium level. The total VFAs in cecal digesta were positively influenced by the dietary microwave-dried HILM. However, a low inclusion level (2%) of HILM in broiler diets is proper in terms of growth performance and health.

• 대한바이러스학회지
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• 제29권2호
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• pp.99-105
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• 1999

BamHI restriction pattern and genomic library of Herpes simplex virus type 2 (HSV-2) strain G were constructed, and locations of the glycoproteins gB and gD, and tk genes on the fragments were detected by Southern blot analysis. HSV-2 genomic DNAs were cleaved into twenty-seven fragments by BamHI enzyme in the range of 0.72 to 15.08 (total 150.44 kb), which were cloned into the BamHI site of pBluescript SK(+) to construct genome library of the HSV-2. The library was named by the order of the fragment size from smallest one to largest one. HSV-2 glycoprotein gD gene was located in pHLA2-21 and pHLA2-22 recombinant plasmids, gB gene in pHLA2-24 plasmid, and tk gene in pHLA2-11 clone by Southern blot analysis.

• Tuberculosis and Respiratory Diseases
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• 제44권3호
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• pp.583-591
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• 1997

연구배경 : 만성폐질환 환자들의 운동 능력 감소의 한 기전으로 제시되고 있는 골격근의 기능 저하는 질환의 병태생리에 기인하는 만성적인 저산소증으로 야기되는 산소성 인산화과정의 장애로 인한 근육 대사과정의 변화가 주요 원인으로 알려져 있다. 그러나 저산소증은 없으나 운동시 호흡곤란을 호소하며 운동능력의 감소를 나타내는 만성폐질환 환자들에서도 이러한 근육 대사 과정의 변화가 나타나는지에 대해서는 연구된 바 없다. 이에 저자들은 $^{31}P$ MRS를 이용하여 이들에서 전박 골격근의 대사 변화를 비슷한 연령의 정상인의 대사와 비교 관찰하므로써, 이들에서도 운동 능력 감소의 한기전으로서 역시 골격근의 대사 변화가 관여할 가능성을 알아보고자 하였다. 연구방법 : 6 명의 만성폐쇄성폐질환 남자 환자 및 1명의 폐유육종증 남자 환자와 5명의 비슷한 연령의 건강한 성인 남자들의 전박근을 대상으로 $^{31}P$ MRS 검사를 실시하였다. 환자군의 평균 연령은 $56.7{\pm}12.1$세였으며 대조군의 평균 연령은 $51.6{\pm}13.6$세였다. 각 대상인의 전박 골격근을 대상으로 $^{31}P$ MRS검사를 안정시, 운동시 및 20분간의 회복시에 걸쳐 시행하였으며, 검사 중 계산된 세포내 산소성인산화 능력을 반영하는 Pi/PCr(inorganic phosphate/phosphocreatine)의 비와 세포내 pH(pHi)의 변화를 양군간에 비교하였다. 결 과 : 안정시 골격근 세포내 pHi는 양군간에 차이가 없었으나, 운동시작 2분후 pHi는 환자군이 $6.82{\pm}0.1$, 대조군이 $6.97{\pm}0.05$로 환자군에서 유의하게 낮았다. 그러나 극심한 피로상태에서 pHi는 환자군이 $6.70{\pm}0.10$, 대조군이 $6.78{\pm}0.09$로 환자군이 낮은 경향을 보였으나 통계적으로 유의한 차이는 없었다. 근육세포 내 산소성인산화 능력이 지표인 Pi/PCr은 안정시, 운동중 및 극심한 피로상태에서 모두 양군간에 통계적으로 유의한 차이는 없었다. 회복시 초기 4분간에 걸쳐 관찰한 Pi/PCr의 회복 및 pHi가 안정시 50%수준으로 회복되는데는 시간은 양군간에 차이가 없었으며, 운동지속 시간도 유의한 차이는 없었다.

• Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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• 제31권2호
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• pp.263-269
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• 2018

Objective: Heat stress (HS) triggers oxidative stress and respiratory alkalosis in pigs. The objective of this experiment was to study whether a short-term supranutritional amount of dietary vitamin E (VE) can mitigate oxidative stress and respiratory alkalosis in heat-stressed pigs. Methods: A total of 24 pigs were given either a control diet (17 IU/kg VE) or a high VE (200 IU/kg VE; HiVE) diet for 14 d, then exposed to thermoneutral (TN; $20^{\circ}C$, 45% humidity) or HS ($35^{\circ}C$, 35% to 45% humidity, 8 h daily) conditions for 7 d. Respiration rate and rectal temperature were measured three times daily during the thermal exposure. Blood gas variables and oxidative stress markers were studied in blood samples collected on d 7. Results: Although HiVE diet did not affect the elevated rectal temperature or respiration rate observed during HS, it alleviated (all p<0.05 for diet${\times}$temperature) the loss of blood $CO_2$ partial pressure and bicarbonate, as well as the increase in blood pH in the heat-stressed pigs. The HS reduced (p = 0.003) plasma biological antioxidant potential (BAP) and tended to increase (p = 0.067) advanced oxidized protein products (AOPP) in the heat-stressed pigs, suggesting HS triggers oxidative stress. The HiVE diet did not affect plasma BAP or AOPP. Only under TN conditions the HiVE diet reduced the plasma reactive oxygen metabolites (p<0.05 for diet${\times}$temperature). Conclusion: A short-term supplementation with 200 IU/kg VE partially alleviated respiratory alkalosis but did not reduce oxidative stress in heat-stressed pigs.

• 미생물학회지
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• 제31권2호
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• pp.123-128
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• 1993

해녀콩 뿌리혹의 질소고정 공생균인 Rhizobium sp. SNU003 균주의 게놈내 7.9 kb 의 EcoRI, 6.5kb 의 SalI, 7.3 kb 의 HindIII 와 4.4 kb 의 PstI 절편에 nifHD 가 존재함을 확인하였다. 람다파아지 EMBL3-BamHI arm 을 사용하여 genomic library 를 제조하였으며 이로부터 nif-유전자를 포함하고 있는 9개의 재조합 파아지 클론을 선별하였다. 이들 중 15.3 kb 의 삽입 DNA 를 가지고 있는 Rnif-6 클론은 7.6 kb 의 BamHI/SacI 절편에 nifHD 가 위치하고 있었다. 따라서 이절편을 pUC19 에 sub cloning 하고 제한효소 지도를 작성한 결과 Rhizobium sp. SNU003 의 nifH 와 nifD 는 4.5 kb 의 BamHI/BglII 절편에 연속배열하고 있다.

• Bulletin of the Korean Chemical Society
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• 제25권2호
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• pp.321-324
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• 2004

• International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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• 제25권2호
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• pp.181-185
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• 2012

Chymotrypsin serine protease is one of the main digestive proteases in the midgut of and is involved in various essential processes. In a previous study, a gene encoding a chymotrypsin-like protease, Hi-SP1, was cloned from the larvae of Hermetia illucens and characterized. In this study, we produced the recombinant chymotrypsin-like protease Hi-SP1 in Escherichia coli cells. The molecular weight of the recombinant Hi-SP1 was estimated to be approximately 26 kDa by sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis and Western-blotting. Chymotrypsin activity was detected when AAPF was used as the substrate. Examination of the effects of temperature and pH revealed that the proteolytic activity of recombinant Hi-SP1 decreased markedly at temperatures above $30^{\circ}C$, and the optimum pH was found to be 10.0.

• 생명과학회지
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• 제29권1호
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• pp.18-28
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• 2019

최근 비만에 의해 과발현된 신경세포형 산화질소 생성효소(neuronal nitric oxide synthase, nNOS)가 정서적 행동을 조절하는 중요한 인자라는 보고되었다. 이와 관련한 최근의 연구에서 운동이 비만에 의해 과발현된 nNOS를 억제하고 정서적 우울감과 항불안 효과를 감소시켰다는 연구결과가 보고되었다. 운동은 nNOS를 억제하여 뇌의 기능을 향상시킬 수 있는 효과적인 전략으로 보이지만 운동은 강도에 따라 면역 반응에 큰 차이가 있다. 따라서 본 연구에서는 고지방식이(high-fat diet, HFD)로 유도된 비만 마우스에서 다른 강도의 운동을 실시하여 해마의 nNOS 발현의 차이를 분석하고자 하였다. 실험동물은 C57BL/6 마우스를 사용하였다. 대조군(CON, n=14)을 제외한 마우스(n=35)에게 6주 동안 60%의 고지방식이를 섭취시켜 비만을 유도하였다. 6주간의 비만유도 기간이 종료된 후 CON과 비만이 유도된 동물 각각 7마리씩 희생하여 비만유도를 확인하는데 사용되었다. 나머지 동물은 8주간의 운동중재 연구에 이용되었다. 이 때 CON을 제외하고 비만이 유도된 동물들은 고지방대조군(HFD) 그리고 저강도운동군(HFD-LI, n=7) 중강도운동군(HFD-MI, n=7) 그리고 HFD-고강도(HFD-HI, n=7)로 나누어졌다. HFD-LI는 12 m/min으로 75분, HFD-MI는 15 m/min으로 60분 그리고 HFD-HI는 18 m/min으로 50분 동안 동물용 트레드밀에서 운동이 수행되었다(동등한 운동량, 900 m). 해마(hippocampus)의 nNOS 단백질의 발현은 CON에 비해 HFD에서 유의하게 높았고(p<0.01), CON과 운동을 실시한 모든 그룹과 차이가 없었다. 하지만 HFD-LI에 비해 HFD-HI가 유의하게 nNOS 발현이 낮았다(p<0.05). 대뇌피질에서는 CON에 비해 HFD에서 유의하게 높았으나(p<0.01), 다른 그룹 간에 차이는 없었다. nNOS의 생성을 조절할 수 있는 인산화된 Akt (pAkt)의 발현이 CON과 HFD에 비해 운동을 실시한 나머지 그룹 모두에서 유의하게 높았다. 대뇌피질에서의 pAkt의 발현에서는 차이가 모든 그룹 간에 차이가 없었고, 소뇌에서는 CON에 비해 HFD-HI에서 유의하게 높았다(p<0.05). 소뇌에서는 각 그룹 간에 차이가 없었다. 결론적으로 nNOS는 고지방식이와 비만에 의해 과발현된 것으로 보여지고 이를 운동을 통하여 낮출 수 있는 것으로 보여지며, 이 때 운동량이 같다는 가정하에 상대적으로 높은 강도가 효과적일 가능성이 있다.