BAE MYUNG AE;JUN DO YOUN;KIM KYUNG MIN;KIM SANG KOOK;CHUN JANG SOO;TAUB DENNIS;PARK WAN;MOON BYUNG-JO;KIM YOUNG HO
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제15권4호
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pp.756-766
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2005
The signaling mechanism underlying aburatubolactam C-induced FasL upregulation was investigated in human Jurkat T cells. After treatment with aburatubolactam C, the src-family PTKs $p56^{lck}\;and\;p59^{fyn}$, and MAP kinases ERK2 and JNK1, were activated prior to FasL upregulation; Both $p56^{lck}\;and\;p59^{fyn}$ were directly activated 2.4- and 2.2-fold, respectively, in vitro by aburatubolactam C. The aburatubolactam C-induced cellular changes, including the activation of ERK2 and INK1, and FasL upregulation, were completely prevented by the PTK inhibitor genistein. The activation of protein kinase C (PKC$\delta,\;\epsilon\;and\;\mu$ was also induced following aburatubolactam C treatment. Although the activation of $p56^{lck}$ and tyrosine phosphorylation of the cellular proteins were not blocked by the PKC inhibitor GFl09203X, the activation of ERK2 was completely abrogated, along with a detectably enhanced JNK1 activation; FasL upregulation, and apoptosis. However, the FasL upregulation and apoptosis were significantly inhibited by the PKC activator PMA, with a remarkable increase in the ERK2 activation. The cytotoxic effect of aburatubolactam C was reduced in the presence of the anti-Fas neutralizing antibody ZB-4. Although ectopic expression of Bcl-2 failed to completely block the cytotoxicity of aburatubolactam C, it was clearly suppressed. The c-Fos mRNA expression was upregulated in a biphasic manner, where the second phasic expression overlapped with the FasL upregulation. Accordingly, these results demonstrate that aburatubolactam C-induced apoptosis is exerted, at least in part, by FasL upregulation dictated by activation of the PTK ($p56^{lck}\;and\;p59^{fyn}$) /JNKI pathway, which is negatively affected by the concurrent activation of the PKC/ERK2 pathway proximal to PTK activation.
1992년 3월부터 1993년 2월 사이에 영남대학교 의과대학 정신과 외래를 방문한 ADHD 환자 56명 (남 : 38, 여 : 18)을 대상으로 Edelbrock에 의해 개발된 CAP평가척도를 사용하여 methylphenidate의 약물 효과를 투여후 7일째와 28일째에 교사와 부모의 평가를 비교하고 ADHD와의 동반 장애를 알아보아 다음과 같은 결과를 얻었다. 총 56명의 대상자 중 ADHD 단일장애를 가진 경우는 20명 (35.7%)이었고, 동반장애가 한가지인 경우는 31명 (55.4%) 이며 두가지인 경우는 5명 (8.9%)이었다. 7일째와 28일째 교사의 평가에서 약물투여 전에 비해 유의한 증상의 호전이 있었고 (P<0.05), 7일째에 비해 28일째에 유의한 증상의 호전이 있었으며 (P<0.05). 부모평가에서는 약물투여전에 비해 28일째 유의한 증상의 호전이 있었으며 (P<0.05), 7일째에 비해 28일째 유의한 증상의 호전이 있었다 (P<0.05). 일요일 오전에 일회 약물 투여후 오전이 오후에 비해 유의한 증상의 호전이 있었으며 (P<0.05). 같은 용량의 약물투여에 따른 교사와 부모평가 비교에서는 교사가 7일째 평가한 점수가 부모가 일요일 오전에 평가한 점수보다 유의하게 낮았으며 (P<0.05), 28일째 비교에서도 교사가 유의하게 낮았다 (P<0.05). 각 그룹간의 치료효과에 관한 비교연구에서 ADHD단독군 (1군)과 틱과 습관성장애가 공존하는 군 (2군)과 발달성 장애공존군 (3군) 모두에서 2군과 3군의 7일째 부모평가점수가 유의한 증상의 개선이 없었던 것을 제외 하고는 유의한 증상의 호전이 있었다 (P<0.05). 또 행동장애와 반항성 장애공존군 (4군)의 경우 부모가 평가한 7일째와 28일째 비교한 경우에 유의한 증상의 호전이 있었던 것 (P<0.05)을 제외하고는 모두 증상의 호전이 없었던 것으로 나타났다.
Src-Homology 2 (SH2) domains have a capacity to bind phosphotyrosine-containing sequence context and play essential roles in various cellular signaling pathways. Due to the specific nature of the binding between SH2 domains and their counterpart proteins, inhibitors of SID domain binding have drawn extensive attention as a potential candidate for therapeutic agents. Here, we describe the binding assay system to screen for the ligands or blockers of the SH2 domains with an emphasis on the $p56^{lck}$ SH2 domain. In our assay system, SID domains expressed and purified as fusion proteins to Glutathione-S-transferase (GST) were covalently attached to 96-well microtitre plates through amide bond formation, which were subsequently allowed to bind the biotinylated phosphotyrosine (pY)containing synthetic pep tides. The binding of biotinylated pY peptides was detected by the horseradish peroxidase (HRP)-conjugated streptavidin. Using the various combinations of SH2 domain-pY peptides, we observed that: (1) The binding of pY-peptides to its counterpart SH2 domain is concentration-dependent and saturable; (2) The binding is highly specific for a particular combination of SH2 domain-pY peptide pair; and (3) The binding of Lck SH2-cognate pY-peptides is specifically competed by the nonbiotinylated peptides with expected relative affinity. These results indicate that the established assay system detects the SH2-pY peptide interaction with reproducible sensitivity and specificity and is suitable for screening the specific inhibitors of $p56^{lck}$ SH2 function.
Objective: To explore whether monoclonal antibodies against stathmin and the chemotherapuetic agent paclitaxel have synergenic effects in inhibiting growth and inducing apoptosis in human QG-56 cells. Methods: QG-56 cells were treated with monoclonal antibodies against stathmin or paclitaxel alone or in combination, with untreated cells used as controls. After 24, 48, 72 and 96 hours the cell growth condition was observed under an inverted microscope and inhibition was studied by MTT assay; apoptosis was analyzed by flow cytometry. Results: The populations decreased and cell shape and size changed after the various treatments. Monoclonal antibodies against stathmin and paclitaxel used alone or incombination inhibited the proliferation of QG-56 cells, especially in combination with synergism (P<0.05). Combined treatment also resulted in a significantly higher apoptosis rate than in the other groups (P<0.05). Conclusions: Monoclonal antibodies against stathmin and paclitaxel used alone or in combination can inhibit proliferation of QG-56 cells and induce apoptosis when applied together. The observed synergistic effects may have important implications for clinical application.
연구목적: 폐암은 protooncogene의 활성화와 종양억제유전인자(tumor suppressor gene)의 비활성화 등 다단 과정에 의하여 발생한다. 치료목적의 완전 절제가 가능하였던 제 IIIA기 비소세포폐암 환자에서 cyclin D1, p53, bcl-2 gene의 변이가 폐암에 미치는 영향을 조사하고자 하였다. 대상 및 방법: 1990년부터 1995년까지 연세의료원에서 치료목적의 완전절제가 가능하였던 stageIIIA 비소세포폐암 환자 100명의 paraffin block과 임상기록을 이용하였다. 각 환자의 조직절편을 labelled streptavidin-biotin method로 immunohistochemical 염색하였고 cyclin D1, p53, Bcl-2 immunostaining을 위한 조직절편들은 immunostaining하기 전 citrate buffer 내에서 10분에서 20분간 microwave oven으로 전처치한 후 cyclin D1은 NCL-cyclin D1-GM으로 p53는 lone DO-7으로 bcl-2는 clone 124로 overnight incubation하였다. 수술 후 평균 추적조사기간은 24.1 개월(range; 2∼84 개월)이었다. 결과: 100예의 폐암 중 56예가 편평상피세포암, 37예가 선암, 5예가 adenosquamous cell carcinoma, 2예가 대세포암이었고 수술 후 5년 생존율은 32.1%이었다. cyclin D1의 양성율은 35 %, p53는 56 %, bcl-2는 17 %였으나 cyclin D1, p53, Bcl-2 단백질 양성 발현과 생존율과의 상관관계는 없었다. 결론: 연구결과 cyclin D1, p53, Bcl-2 단백질 양성 발현이 비소세포폐암 발생기전과 연관되어 있으나 수술 후 예후인자로서는 부적당한 것으로 판단되었다.
To control coccidiosis without using prophylactic medications, a DNA vaccine targeting the gametophyte antigen Gam56 from Eimeria maxima in chickens was constructed, and the immunogenicity and protective effects were evaluated. The ORF of Gam56 gene was cloned into an eukaryotic expression vector pcDNA3.1(zeo)+. Expression of Gam56 protein in COS-7 cells transfected with recombinant plasmid pcDNA-Gam56 was confirmed by indirect immunofluorescence assay. The DNA vaccine was injected intramuscularly to yellow feathered broilers of 1-week old at 3 dosages (25, 50, and $100{\mu}g/chick$). Injection was repeated once 1 week later. One week after the second injection, birds were challenged orally with $5{\times}10^4$ sporulated oocysts of E. maxima, then weighed and killed at day 8 post challenge. Blood samples were collected and examined for specific peripheral blood lymphocyte proliferation activity and serum antibody levels. Compared with control groups, the administration of pcDNA-Gam56 vaccine markedly increased the lymphocyte proliferation activity (P<0.05) at day 7 and 14 after the first immunization. The level of lymphocyte proliferation started to decrease on day 21 after the first immunization. A similar trend was seen in specific antibody levels. Among the 3 pcDNA-Gam56 immunized groups, the median dosage group displayed the highest lymphocyte proliferation and antibody levels (P<0.05). The median dosage group had the greatest relative body weight gain (89.7%), and the greatest oocyst shedding reduction (53.7%). These results indicate that median dosage of DNA vaccine had good immunogenicity and immune protection effects, and may be used in field applications for coccidiosis control.
Upadhaya, Santi Devi;Lee, Sang Seon;Jin, Sung Giu;Wu, Zhenlong;Kim, In Ho
Animal Bioscience
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제34권12호
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pp.1987-1994
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2021
Objective: The present study aimed to evaluate the effects of varying standardized ileal digestible lysine:threonine (SID Lys:Thr) ratio in the diet on the performance and meat quality of finishing pigs. Methods: In total 192 crossbred pigs ([Landrace×Yorkshire]×Duroc, 17 weeks old), with an initial body weight (BW) of 70.6±3.9 kg were used in an 8-wk trial. Pigs were randomly allotted to one of six dietary treatments based on their initial BW and sex (8 replications; 4 pigs per pen, 2 barrows and 2 gilts). The pigs in the 6 treatments were fed diets having different SID Lys:Thr ratios such as 1:0.65, 1:0.66, 1:0.67, 1:0.68, 1:0.69, and 1:0.70. Results: A linear increment (p<0.05) in average daily gain (ADG) and trends in reduction in feed conversion ratio (FCR) were observed during day 29 to 56 of the experiment and the apparent total tract digestibility (ATTD) of dry matter tended to increase linearly (p = 0.094) at the end of the experiment (day 56) with the increase in the dietary SID Lys:Thr ratios. The backfat thickness and lean percentage increased (linear effect, p<0.05) on day 28. In addition, at day 56, a linear (p<0.05) increment in lean percentage was observed. Significant quadratic responses (p = 0.02) for pH and drip loss at day 7 (p = 0.02), a linear increase (p<0.05) in cooking loss and drip loss at day 7, and a trend in quadratic response (p = 0.07) in the lightness of meat color (L*) were observed, whereas other meat quality indices were unaffected by varying the SID Lys:Thr ratios. Conclusion: The SID Lys:Thr ratio for maximum ADG, minimum FCR and enhanced digestibility was found to be 0.70. However, for carcass trait and meat quality, the SID Lys:Thr ratio of 0.65 was enough.
A lipase of Staphylococcus aureus B56 was purified from a culture supernatant and its molecular weight was estimated to be 45 kDa by SDS-PAGE. The optimum temperature and pH for the hydrolysis of olive oil was $42^{\circ}C$ and pH 8-8.5, respectively. The enzyme was stable up to $55^{\circ}C$ in the presence of $Ca^++$ at pHs 5-11. The lipase gene was cloned using the PCR amplification method. The sequence analysis showed an open reading frame of 2,076 bp, which encoded a preproenzyme of 691 amino acids. The preproenzyme was composed of a signal sequence (37 aa), propeptide (255 aa), and mature enzyme (399 aa). Based on a sequence comparison, lipase B56 constituted of a separate subgroup among the staphylococcal lipase groups, such as S. aureus PS54 and S. haemolyticus L62 lipases, and was distinct from other lipases in their optimum pH and substrate specificity.
A total of 131 Pasteurella (P.) multocida strains were isolated from the lungs of 1,064 pigs with respiratory clinical signs nationwide during 2009-2010 and 2013-2014. The strains of P. multocida comprised 77.1% serotype A and 22.9% serotype D. Analysis of a recent P. multocida outbreak in Korean pigs showed that the isolation rate of serotype D decreased annually. The incidence of antimicrobial resistance, as measured using minimal inhibitory concentration values, has decreased recently. Overall, further studies to characterize P. multocida isolated from pigs in Korea are needed to prevent P. multocida infection in the Korean swine industry
In this paper, we study and establish some interesting results of ideals in a poset. It is shown that for a nonzero ideal I of a poset P, there are at most two strongly prime ideals of P that are minimal over I. Also, we study the notion of primal ideals in a poset and the relationship among the primal ideals and strongly prime ideals is considered.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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