Objective : Author evaluate the effects of Citri Reticulatae Viride Pericarpium for the bronchial asthma using assesment of the vascular endothelial growth factor after Citri Reticulatae Viride Peicarpium was intravenously administered Ovalbumine(OVA)-sensitized and -challenged mice. Material and Methods : Twenty-four female mice, 8-10 weeks old and free of murine specific pathogens, were sensitized by intraperitoneal injection of OVA. Of the sensitized mice, ten mice didn't administrate Citri Reticulatae Viride Pericarpium and the other ten mice administrated Citri Reticulatae Viride Pericarpium. Mice were sensitized on the first and fourteen days introspectional injection of 20 ${\mu}g$ OVA. After$21^{st}\;22^{th}\;and\;23^{rd}$, the initial sensitization, the mice were challenged for 30 minutes with an aerosol of 1% OVA in saline. Citri Reticulatae Viride Pericarpium administered 200mg/kg in the tail of the mouse, one a day, for 7 days and beginning 14 days after first sensitization. Bronchoalveolar lavage was performed 72 hours after the last challenge, and total cell numbers in the BAL fluid were count. Also, lever of VEGF in the BAL fluid was measured by Enzyme immunoassays and Western blot analysis. Results: Total cell numbers in BAL fluid were significantly greater than from 72 hrs after OVA inhalation compared with cell numbers in the control group. However, there was no difference of the total cell numbers between OVA-challenge groups without Citri Reticulatae Viride Pericarpium, and OVA-challenge with Citri Reticulatae Viride Pericarpium. Enzyme immunoassay revealed that VEGF levels in the BAL fluids were significantly increased 72 hrs after OVA inhalation compared with levels in the control group. After administration of the Citri Reticulatae Viride Pericarpiu, the levels of the VEGF in BAL fluids 72 hrs after OVA inhalation reduced dramatically. Western blot analysis revealed that VEGF protein levels were increased in the all mice which were challenge with OVA, without administered Citri Reticulatae Viride Pericarpium, compared the normal mouse. However, in the groups of the administered Citri Reticulatae Viride Pericarpium, the VEGF protein level markedly decreased. Conclusion: Citri Reticulatae Viride Pericarpium might affect the treatment of the bronchial ashma as a inhibition of the VEGF.
Eleutherococcus senticosus is a typical oriental folk medicinal herb. It has been used clinically as a anti-rheumatic disease, anti-stress, ischemic heart disease and gastric ulcer. In the present study, we examined the adjuvant activity of the crude polysaccharides fraction from Eleutherococcus senticosus, EN-3, on the induction of humoral and cellular immune responses against bovine serum albumin (BSA) or ovalbumin (OVA). The thioglycollate-induced macrophages and silica-induced dendritic-like cells cultured with BSA and EN-3 synergistically increased the production of TNF-$\alpha$ and IL-12. When mice were subcutaneously immunized with BSA + EN-3, the antibody titer against BSA was showed significantly higher than those immunized with BSA alone. In addition, when mice were immunized with OVA + FIA + EN-3, the antibody titer was showed similar patterns with the FCA. The assay for determining subisotype of antibody revealed that EN-3 augmented OVA-specific antibody titer of IgG1 and IgG2b. The culture supernatant obtained from splenocytes of mice treated with OVA + FIA + EN-3 also showed a higher level of both OVA-specific Th1-type (IL-2, IFN-${\gamma}$ and GM-CSF) and Th2-type cytokine (IL-4, IL-6 and IL-10). In vitro analysis of T cell proliferation to OVA on 8 weeks, the splenocytes of mice treated with OVA + EN-3 showed a significantly higher proliferating activity than those treated with OVA alone. These results suggest that EN-3 may possess adjuvant activities to potentially to enhance humoral as well as cellular immune response.
Background: Dendritic cells (DC) are professional antigen-presenting cells in the immune system and can induce T cell response against virus infections, microbial pathogens, and tumors. Therefore, immunization using DC loaded with tumor-associated antigens (TAAs) is a powerful method of inducing anti-tumor immunity. For induction of effective anti-tumor immunity, antigens should be efficiently introduced into DC and presented on MHC class I molecules at high levels to activate antigen-specific $CD8^+$ T cells. We have been exploring methods for loading exogenous antigens into APC with high efficiency of Ag presentation. In this study, we tested the effect of the cationic liposome (Lipofectin) for transferring and loading exogenous model antigen (OVA protein) into BM-DC. Methods: Bone marrow-derived DC (EM-DC) were incubated with OVA-Lipofectin complexes and then co-cultured with B3Z cells. B3Z activation, which is expressed as the amount of ${\beta}$-galactosidase induced by TCR stimulation, was determined by an enzymatic assay using ${\beta}$-gal assay system. C57BL/6 mice were immunized with OVA-pulsed DC to monitor the in vivo vaccination effect. After vaccination, mice were inoculated with EG7-OVA tumor cells. Results: BM-DC pulsed with OVA-Lipofectin complexes showed more efficient presentation of OVA-peptide on MHC class I molecules than soluble OVA-pulsed DC. OVA-Lipofectin complexes-pulsed DC pretreated with an inhibitor of MHC class I-mediated antigen presentation, brefeldin A, showed reduced ability in presenting OVA peptide on their surface MHC class I molecules. Finally, immunization of OVA-Lipofectin complexes-pulsed DC protected mice against subsequent tumor challenge. Conclusion: Our data provide evidence that antigen-loading into DC using Lipofectin can promote MHC class I- restricted antigen presentation. Therefore, antigen-loading into DC using Lipofectin can be one of several useful tools for achieving efficient induction of antigen-specific immunity in DC-based immunotherapy.
We hope to evaluate the effects of Gami-Choakwiyeum (GCKY) on the PPAR-${\gamma}$’ in the OVA induced asthma mouse model. Female BALB/c mice, 8 weeks of age and free of murine specific pathogens were used. Mice were sensitized by intraperitoneal injection of OVA emulsified in aluminum hydroxide in a total volume of 200 ${\mu}{\ell}$ on one day and 14 days. On 21, 22, and 23 days after the initial intraperitoneal injection of OVA, the mice were challenged using an ultrasonic nebulizer. GCKY was administered 7 times by oral gavage at 24 hour intervals fromdays 19 after intraperitoneal injection of OVA. Bronchoalveolar lavage was perfromed 72 hours after the last challenge, and total cell numbers in the BAL fluid were counted. Also, the level of PPAR-${\gamma}$ of normal and OVA-induced asthma moused with/without administration of GCKY were measured by Western blot analysis. For the histologic examination, the specimens were stained with hematoxylin 2 and eosin-Y.(H & E). Numbers of total cells were increased significantly at 72 h after OVA inhalation compared with numbers of total cells in the normal and the administration of GCKY. Especially, the increased numbers of eosinophils in BAL fluids after OVA inhalation were significantly increased. However, the numbers of eosinophils reduced by the administration of GCKY. Western blot analysis revealed that PPAR-${\gamma}$ levels in nuclear level were increased slightly after OVA inhalation compared with the levels in the normal group. After the administration of GCKY, PPAR-${\gamma}$ levels in cytosolic and nuclear levels at 72 h after OVA inhalation were markedly increased. On pathologic examination, there were many acute inflammatory cells around the alveoli, bronchioles, and airway lumen of mice with OVA-induced asthma compared with inflammatory cells in the normal group. However, acute inflammatory cells around alveoli, bronchioles, and airway lumen markedly decreased after administration of GCKY, GCKY can increase a PPAR-${\gamma}$ level and could be an effective treatment in asthma patients through the PPAR-${\gamma}$ mechanism for bronchial asthma.
Background: Korean ginseng is a well-known medicinal herb that has been widely used in traditional medicine to treat various diseases, including asthma. Ginseng can be classified as white ginseng (WG) or red ginseng (RG), according to processing conditions. In this study, the authors compared the efficacies of these two ginseng types in a mouse model of acute asthma. Methods: To produce the acute asthma model, BALB/c mice were sensitized with ovalbumin (OVA) and aluminum hydroxide, and then challenged with OVA. WG and RG extracts were administered to mice orally. The influences of WG and RG on airway hyperresponsiveness (AHR), immune cell distributions in bronchoalveolar lavage fluid (BALF), and OVA-specific immunoglobulin E (IgE), IgG1, and IgG2a in serum were investigated. Cytokine production by lymphocytes isolated from peribronchial lymph nodes and histopathological changes was also examined. Results: In OVA-sensitized mice, both WG and RG reduced AHR and suppressed immune cell infiltration in bronchoalveolar regions. BALF OVA-specific IgE levels were significantly lower in RG-treated OVAsensitized mice than in the OVA-sensitized control group. WG and RG also suppressed inflammatory cytokine production by peribronchial lymphocytes. Histopathological findings showed reduced inflammatory cell infiltration and airway remodeling (e.g., epithelial hyperplasia) in WG- and RG-treated OVA mice compared with OVA controls. Conclusion: In this study, WG and RG showed antiasthmatic effects in an OVA-sensitized mouse model, and the efficacies of RG were found to be better than those of WG.
Lutein은 식물에서 발견되는 carotenoid 계열에 속하는 물질로 항산화 기능을 가지고 있는 것으로 널리 알려져 있지만, 호흡기 질환과 관련하여 아직까지 lutein의 효능과 작용 기작이 잘 알려져 있지 않다. Ovalbumin (OVA)으로 유도한 천식(asthma) 생쥐모델에서 lutein은 기도 과민성을 억제하였고, 기관지 폐포 세척액에서 OVA의 감작에 의하여 증가한 각종 염증성 지표들을 감소시켰다. 또한, OVA의 감작에 의하여 증가한 제2형 협조 T 세포(Th2 cell)의 증가된 반응을 약화시키는 결과를 볼 수 있었다. 본 실험에서 lutein이 ovalbumin (OVA)으로 유도한 천식 생쥐 모델에서 제 2형 협조 T세포의 싸이토카인과 유전자 발현을 조절할 수 있는 면역약리학적 기능을 할 수 있는 물질로서의 가능성이 있음을 확인할 수 있었다.
Objective : The purpose of this study was to investigate the effects of Gamisagunja-tang(GS) on the airway hyper-reactivity (AHR), cytokine production and T cell activation during the ovalbumin (OVA)-induced allergic asthma in mice. Materials and Methods : BALB/c mice were sensitized and challenged with 100 mg of OVA and 1 mg of aluminum potassium sulfate intraperitoneally on days 1 and 7. On day 14, mice were challenged on 3 consecutive days with 5% OVA. AHR and bronchoalveolar fluid (BALF), total inflammatory cell count and the production of cytokines were measured. Results : GS significantly suppressed the infiltration of inflammatory cells in the lung tissue and AHR. GS significantly down regulated the production of IL-4, IL-5 and increases of $INF-{\gamma}$ in BALF. GS reduced the population of eosinophils from lung and spleen in OVA-induced allergic asthma. GS reduced the population of $CD4^{+}$$CD69^{+}$$CD25^{-}$ T cells in OVA-induced allergic asthma Conclusion : These results suggest that GS may inhibit the production of IL-4, IL-5 and infiltration of eosinophils and be beneficial oriental medicine for allergic asthma.
This study evaluated the binding abilities of rabbit anti-ovalbumin (OVA) immunoglobulin G (IgG) and egg-allergic patient IgE on gamma-irradiated OVA during proteolysis using pepsin and trypsin. The concentrations of both the intact and the irradiated OVAs decreased during proteolysis when detected with IgG However, when detected by patient IgE the concentration of the intact OVA decreased up to 30 min after the trypsin treatment and increased thereafter. Irradiated OVA detected by patient IgE showed a lower initial concentration (0.16%) than that of the intact OVA, and this reduced concentration was maintained stably. The results indicate that irradiation, rather than enzymatic treatment, could reduce the binding of the irradiated and enzyme-treated OVA. Therefore, gamma irradiation has potential as an effective method to reduce OVA-induced allergy and may enhance the safety of egg-allergic individuals.
대한약학회 2002년도 Proceedings of the Convention of the Pharmaceutical Society of Korea Vol.2
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pp.296.1-296.1
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2002
Bisphenol A(BPA). a monomer used in the manufacturing epoxy resins and polycarbonates. has been reported to induce estrogenic activity, it has been considered as an environmental endocrine disruptor. But the immunomodulatory effects of BPA exposure have not been systemically evaluated. We investigated whether BPA effects on the ability of immunoglobulin(lg) production of mice. To initiate investigation of BPA-induced alterations of the immune system. BPA at dose of 100. 500,1000 mg/kg b.w./day with or without OVA-antigen for 30 days were orally administered to female ICR mice. Mice were sacrificed and serum was colleted on day 2 following administration of BPA for 30days. Total lgG1. total lgG2a. total lgE. OVA-specific lgG1. OVA-specific lgG2a. and OVA-specific lgE in serum were detetmined and compared with those of non-treated mice. In the groups of BPA with OVA antigen, total 1gG1, total lgG2a, total lgE. OVA-specific lgG1 and OVA-specific lgG2a were significantly decreased at dose of 500mg/kg/day. However, in mice treated with BPA alone, total lgG1, and lgG2 were not much altered and total lgE was significantly increased at dose of 1000mg/kg/day. These results demonstrated the BPA modulates the production of immunoglobulin.
폐유(肺兪) 세신약침(細辛藥鍼)(AMCR-HA)이 정상 mouse와 알레르기 喘息이 유발된 mouse의 면역기전(免疫機轉)에 미치는 영향(影響)을 비교검토(比較檢討)하기 위하여 C57BL/6 mouse에 알레르기 천식병태(喘息病態)를 유발(誘發)하고 천식(喘息)이 유발(誘發)된 mouse와 정상 mouse의 폐유(肺兪) (BLl3)에 세신약침(細辛藥鍼)을 시술(施術)한 후, in vitro 및 in vivo 실험을 통해 폐유(肺兪) 세신약침(細辛藥鍼)이 천식억제(喘息抑制) 및 면역조절작용(免疫調節作用)에 미치는 영향(影響)을 관찰(觀察)하여 다음과 같은 결론(結論)을 얻었다. in vitro 1. 폐내(肺內) 호립구(灝粒球), $CD3e^-/CCR3^+$, $CD69^+/CD3e^+$, $CD4^+$, $CD23^+/B220^+$ 경포(絅胞) 비율은 유의성(有意性)있게 감소(減少)하였다. in vivo 2. 폐의(肺) 질양(質量) 및 총 (總) 세포(細胞) 수 (數)는 유의성(有意性)있게 감소(減少) 하였다. 3. BALF내의(內) 총 (總) 임파구(淋巴球)와 호산구(好酸球) 수가(數) 유의성(有意性) 있게 감소(減少)하였다. 4. 조직학적(組織學的) 검사결과(檢査結果), collagen의 부착(附着)이 유의성(有意性) 있게 감소(減少)하였다. 5. BALF 및 serum 내 (內)IL-4, IL-5., IL-13, LgE 수가(數) 유의성(有意性)있게 감소(減少)하였다. 6. 폐내(肺內) $Gr-1^+/CD11b^+$, $CCR3^+$, $CD3e^+$, $CDl9^+$, $CD3e^+/CD69^+$ 세포(細胞) 수가(數) 유의성(有意性)있게 감소(減少)하였다. 7. TNF-${\alpha}$, IL-$1{\beta}$, IL-4, IL-5, IL-13 등의 mRNA 발현(發顯)이 유의성(有意性)있게 감소(減少)하였다. 8. AHCR-HR군(群)에서는 Normal군과(群) 비교하여 별다른 차이가 없었으며, OVA-Saline 군과(群) OVA-Needle-Prick군에(群)서는 OVA control군과(群) 비교하여 유의성(有意性)있는 변화를 관찰 할 수 없었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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