Ornithine decarboxylase (ODC), the first enzyme in the polyamine biosynthesis, plays an important role in tumor progression, cell proliferation and differentiation. In recent years, ODC has been the subject of intense study among researchers, as a target for anti-cancer therapy and specific inhibitory agents, have the potential to suppress carcinogenesis and find applications in clinical therapy. In particular, it is suggested that ODC is a promising candidate target for natural products in cancer chemoprevention. Future exploration of ornithine decarboxyalse inhitors present in nature may offer great hope for finding new cancer chemporeventive agents.
Kinetin(4.7$\times$10\ulcornerM) and 6-benzylaminopurine (2.2$\times$10\ulcornerM) were found to increase ca. 1.5-fold putrescice content in corn grown in medium containing kinetin and 6-benzylaminopurine(6-BAP) for 3days whereas kinetin was found to decrase ca. 30% spermidine and spermine, respectively. KCI (3$\times$10\ulcornerM) was found to decrease more than 50% putrescine content. After germination, ornithine decarboxylase activity was observed to increase constantly whereas arginine decarboxylase activity remained constant, suggesting involvement in putrescine biosynthesis. 6-benzylaminopurine was shown to increase more activities of arginine ornithine decarboxylase than kinetin when they were added to medium.
Free amino acid in ethanol extracts and total amino acids in hydrolysates of eleven species of edible mushrooms were analyzed and determinated the contents five kind of new amino acid by means of amino acid autoanalyzer and gas liquid chromatography. The result obtained from this study are as follows. 1) Five kind of new amino acid turned out to be ${\alpha}$-aminobutyric acid, allo-isoleucine, ethanolamine, $\gamma$-aminobutyric acid and ornithine. 2) By means of amino acid autoanalyzer, the monoethanolamine was identified on the chromatogram ahead of alanine, ${\alpha}$-aminobutyric acid between peak of threonine and glycine, allo-isoeleucine between peak of valine and leucine, isoleucine, ${\gamma}$-aminobutyric acid followed by proline between peak of leucine, isoleucine and methionine and ornithine between peak of phenylalanine and tyrosine 3) By means of Gas liquid chromatography, the ${\alpha}$-aminobutyric acid was identified on the chromatogram between peaks of alanine and valine, allo-isoleucine between peaks of methionine and isoleucine, monoethanolamine followed by ${\gamma}$-aminobutyric acid between peaks of phenylalanine and ammonia, ornithine between the peaks of ammonia and lysine. 4) Of five amino acids which were identified, ornithine was the highest of its content in the mushroom extracts, and allo-isoleucine, ethanolamine, and ${\gamma}$-aminobutyric acid came next in decreasing order. 5) Also which were identified, ornithine was the highest of its content in the hydrolysates, and ${\alpha}$-aminobutyric acid, ${\gamma}$-aminobutyric acid, allo-isoleucine came next in decreasing order, ethanol extracts and hydrolysates of Auriculariaauricula-Judae(Fr.) $Qu\acute{e}l$ species didn't contain any of five kind of new amino acid. Ornithine also was the highest in the hydrolysates of ll mushrooms.
Kim, Yoo-Mi;Lim, Han Hyuk;Gang, Mi Hyeon;Lee, Yong Wook;Kim, Sook Za;Kim, Gu-Hwan;Yoo, Han-Wook;Ko, Jung-Min;Chang, Meayoung
Journal of Genetic Medicine
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v.16
no.2
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pp.85-89
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2019
Hyperornithinemia-hyperammonemia-homocitrullinuria (HHH) syndrome is a rare autosomal recessive urea cycle disorder. HHH is caused by a deficiency of the mitochondrial ornithine transporter protein, which is encoded by the solute carrier family 25, member 15 (SLC25A15) gene. Recently, government supported Korean newborn screening has been expanded to include a tandem mass spectrometry (MS/MS) measurement of ornithine level. We report a case of a neonate with HHH syndrome showing a normal MS/MS measurement of ornithine level. A female newborn was admitted to neonatal intensive unit due to familial history of HHH syndrome. Her parents were consanguineous Parkistani couple. The subject's older sister was diagnosed with HHH syndrome at age of 30 months based on altered mental status and liver dysfunction. Even though the subject displayed normal ammonia and ornithine levels based on MS/MS analysis, a molecular test confirmed the diagnosis of HHH syndrome. At 1 month of age, amino acid analysis of blood and urine showed high levels of ornithine and homocitrulline. After 11 months of follow up, she showed normal growth and development, whereas affected sister showed progressive cognitive impairment despite no further hyperammonemia after protein restriction and standard therapy. Our report is in agreement with a previous Canadian study, which showed that neonatal samples from HHH syndrome patients demonstrate normal ornithine levels despite having known mutations. Considering the delayed rise of ornithine in affected patients, genetic testing, and repetitive metabolic testing is needed to prevent patient loss in high risk patients.
Escherichia Coli ornithine transcarbamylase is the enzyme which catalyzes the L-citrulline biosynthesis from L-ornithine and carbamyl phosphate. To facilitate the purification of enzyme which will be used for many biochemical studies such as structure and function relationships and catalytic mechanisms, the cloning and expression of E. coli argI gene for ornithine transcarbamylase was conducted. argI was amplified from genomic DNA of E. coli strain of $DH5{\alpha}$, by polymerization chain reaction (PCR) method. The amplified argI gene was ligated to the prokaryotic expression vector pKK223-3 and used for transformation of E. coli TB2 which was deficient of ornithine transcarbamylase. The over-produced enzyme by the tnansformant was purified by ammonium sulfate fractionation, heat denaturation and affinity chromatography. The result of SDS denaturation gel electrophoresis for the purified enzyme showed a single band of about 38 kDa of ornithine transcarbamylase. Kinetic data for the expressed enzyme gave almost the s?????? values as those of the wild type enzyme. The $k_{cat}$, of the enzyme was $1.0{\times}10^5min^{-1}$, and $K_ms$ for ornithine and carbamyl phosphate were 0.35 mM and 0.06 mM, respectively.
We studied active substances like crude cell wall components, crude protein, composing amino acids and free amino acids including orinithine cycle-related amino acids such as asparagine, ornithine and citrullin in fully ripe fruits of Korean native squash, Cucurbita moschata Poir. Crude protein content of 'Jeju 2' was the highest with $2,830\;{\mu}g/g$, while 'Sangju' was the lowest with $1,319\;{\mu}g/g$. Regarding the contents of crude cell wall components, fruit 'Kanghaw' was the highest with 2,961 mg% while 'Namhea' was the lowest with 1,582 mg%. Pectin contents of crude cell wall components were the highest in 'Kanghaw' (2,198 mg%) followed by 'Jeju 2' (2,178 mg%) and 'Jeju l' (1,461 mg%). The main contents of amino acids in squash were glutamic acid, aspartic acid, lysine, leucine and valine, which comprised to be more than 50% of total amino acid contents. Especially, in 'Jeju 2' aspartic acid and threonine were not detected. In fully ripe fruits, a total of 34 kinds of free amino acids were detected including 8 kinds of essential amino acids (histidine, isoleucine, leucine, lysine, phenylalanine, methionine, threonine and valine). More than 50% of the total free amino acids were aspartic acid and asparagine, and also all varieties were detected in ornithine, citrullin, and arginine, which are related to Ornithine cycle. There was a big difference in the contents of arginine in all varieties whereas the contents of ornithine and citrullin were very similar. 'Teaan' 29.34% was 7 times higher than 'Namhea' 4.30% in regards to arginine contents.
Background: Arginine may play important roles in tumor progression by providing ornithine for polyamine biosynthesis, required for cell growth. The aim of this work was to determine the expression of arginine metabolic pathway enzymes in head and neck squamous cell carcinoma (HNSCC) in northeast India. Materials and Methods: The expressions of arginase isoforms (ARG1 and ARG2), ornithine aminotransferase (OAT) and ornithine decarboxylase (ODC) were examined in fifty paired HNSCC and adjacent non-tumor tissues by immunohistochemistry. Immunocytochemistry, semiquantitative reverse transcription sq-PCR and quantitative real-time qPCR were used to assess protein and mRNA expressions in peripheral blood of fifty HNSCC patients and hundred controls. Results: ARG1 and ODC protein and mRNA were strongly expressed in peripheral blood from HNSCC patients. No ARG2 expression was observed. In vivo, expression of ARG1, ARG2 and ODC was significantly higher in tumor than in non-tumor tissues. Most tumors expressed low levels of OAT, with no difference in tissues or blood, compared to controls. The absolute extent of maximal ARG1 upregulation with qPCR showed 6.23 fold increase in HNSCC. Conclusions: These findings strongly suggest that in HNSCCs, the ARG1 pathway is stimulated leading to the formation of polyamines as indicated by higher ODC expression, which promote tumor growth.
To study the compensatory aspect of putrescine biosynthetic enzyme n tobacco suspension cultured cells, we examined the contents of the cellular polyamines and the activities of arginine decarboxylase (ADC, EC 4.1.1.19) and ornithine decarboxylase (ODC, EC 4.1.1.17) in the tobacco suspension cells treated with $\alpha$-difluoromethyl arginine (DFMA) or $\alpha$-difluoromethyl ornithine (DFMO). In the untreated cells, the content of the cellular putrescine was decreased during the first 3 hours and then subsequently increased. However, the content of the cellular spermidine and spermine remained constant during the incubation time. While ADC activity increased after 6 hours, ODC activity decreased following the rapid increase until 6 hours. DFMA induced the decrease in the contents of putrescine and spermidine, and the increase in that of spermine. It also caused the inhibition of ADC and ODC activities throughout the incubation time. DFMO produced the stimulation of ADC activity about 2 times of untreated cells and the decrease in the content of putrescine about 50% of them at 12 hour. The application of putrescine or cycloheximide prevented the increase of ADC activity by DFMO but that of actinomycin-D did not show any detectable effect. The stimulation of ADC activity by DFMO in tobacco suspension cultured cells was probably due to the enhancement of de novo synthesis for ADC protein, which might be regulated in the translation step by the content of the cellular putrescine.
The aims of this sutdy was to investgate the action mechanism of polycation on the $\beta$-glucan synthetase II (GS II) related to cell wall synthesis in suspension cultured carrot cells. In the suspension cultured cells treated with poly-L-Iysine($12{\mu}M$) and poly-L-ornithine ($12{\mu}M$) having ploycationic nature, GS II activity increased about 40% and 50% than that of the control respectively. And similar response was observed when ATP and NaF were treated. On the other hand, ploy-L-lysine and ploy-L-ornithine did nor affect the membrane permeability. Phorbol-12-myrlstate-13-acetate (TPA), activator of protein klnase, increased about 35% and 1-(5-isoquinolinyl sulfonyl)-2-methyl-piperrazine (H-7), inhibitor of protein kinase, decreased about 30% of GSII activity than that of control. These results suggest that polycation plays a role in the cell wall synthesis by increasing GS II activity through phosphorylation.
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