• 제목/요약/키워드: ornithine

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The efficient Erythropoietin expression system in Chinese Hamster Ovary cells by introduction of urea cycle enzymes

  • Lee, Yun-Jeong;Kim, Jung-Kwon;Kim, Hyung-Jin;Kim, Na-Young;Kim, Jung-Hoe;Kim, Hong-Jin
    • 대한약학회:학술대회논문집
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    • 대한약학회 2003년도 Proceedings of the Convention of the Pharmaceutical Society of Korea Vol.1
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    • pp.231.2-231.2
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    • 2003
  • The efficient EPO (Erythropoietin) expression system in Chinese Hamster Ovary (CHO) cells was devised through the removal of ammonium ion accumulated in the media by introducing urea cycle enzymes. Previously, we developed C05 cell by transfecting the carbamoly phosphate synthase (CPS) and ornithine transcarbamoylase (OTC) into the EPO expressing CHO cell, IBE. (omitted)

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Euglena gracilis Z로부터 Arginine Deiminase의 정제 및 그의 특성 (Purification and Some Properties of Arginine Deiminase in Euglena gracilis Z)

  • Park, Bong-Sun;Hirotani, Aiko;Nakano, Yoshihisa;Kitaoka, Shozaburo
    • 유기물자원화
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    • 제1권1호
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    • pp.115-125
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    • 1993
  • Euglena gracilis 에서 arginine deiminas는 mitochondrial matrix 내에 존재한다. 고도로 정제된 효소가 0.23 nM의 $K_m$ 값을 갖고 효소반응을 하기 위해서는 $Co^{2+}$가 필요하며, 이때 최적 pH는 9.3~10.3이었다. Gel filtration에 의해서 얻어진 조효소 단백질의 분자량은 87,000이었으며, SDS-acrylamide gel electrophoresis에 의해 효소는 48,000의 분자량을 갖는 2개의 동일한 subunit로 구성되어 있음이 밝혀졌다. Euglena의 arginine deiminas는 sulfhydryl inhibitors에 의해서 활성이 저지되었는데, 이는 sulfhydryl group이 효소의 활성부위에 관여함을 나타낸다. 이 sulfhydryl group은 arginine이 효소와 결합하는데 있어서 negative cooperativity를 나타내었다. ${\beta}-guanidinopropionate$, ${\gamma}-guanidinobutyrate$와 guanidinosuccinate는 효소의 활성을 저지시키지 않는데 반하여, $L-^{\alpha}-amino-{\beta}-guanidino-propionate$, D-arginine, 그리고 L-homoarginine은 효소의 활성을 강력하게 저지시켰다. Citrulline과 ornithine에 의해서도 상당한 정도의 효소활성저지가 관찰되었다. 우리는 Euglena의 arginine deiminase의 독특한 성질이 Euglena 라는 원생동물 내에서 arginine 대사의 조절에 어떻게 영향을 미치는지를 토의하고자 한다.

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단일 유전자 이상에 대한 착상전 유전진단을 위한 단일 세포 PCR 방법의 신뢰성 (Reliability of the Single Cell PCR analysis for Preimplantation Genetic Diagnosis of Single Gene Disorders)

  • 최혜원;이형송;임천규;궁미경;강인수;전진현
    • Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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    • 제32권4호
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    • pp.293-300
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    • 2005
  • 연구목적: 단일 유전자 이상에 대한 착상전 유전진단을 성공적으로 시행하기 위해서는 효과적이고 신뢰도가 높은 PCR 방법의 확립이 중요하다. 본 연구에서는 alkaline lysis와 duplex nested PCR 방법을 단일 림프구와 할구의 유전자 분석에 적용하여 그 효용성을 확인하고자 하였다. 재료 및 방법: 단일 유전자의 이상이 확인된 Duchenne muscular dystrophy (DMD), ornithine transcarbamylase (OTC) 결핍증과 epidermolysis bullosa (EB) 가계의 대상자들에서 채취한 단일 림프구와 공여 받은 배아의 할구를 이용하여 각각 PCR, restriction fragment length polymorphism (RFLP)와 direct DNA sequencing 분석을 시행하였다. 이러한 분석에서 유전자 증폭률 (amplification rate)과 두개의 allele 중에서 하나의 allele이 증폭되지 않는 allele drop-out (ADO) 빈도에 대해 살펴보았다. 결 과: 단일 림프구와 할구를 이용한 PCR 방법의 유전자 증폭률은 DMD에서 91.1%와 81.8%, OTC 결핍증에서 96.0%와 78.1%, EB에서 91.3%와 90.0%를 각각 나타냈으며, ADO 빈도는 OTC 결핍증에서 13.3%, EB에서 16.8%로 관찰되었다. 결 론: 본 연구에서 적용한 alkaline lysis와 duplex nested PCR 방법은 단일 유전자에 대한 착상전 유전진단에 성공적으로 적용할 수 있는 방법으로 생각되며, ADO 빈도를 최소화할 수 있는 효율적인 방법의 개발에 대한 지속적인 연구가 필요하다.

장기저장 및 고온고압 처리에 따른 한국재래종 호박 '양산'의 품질변화 (Quality Changes of a Fully Ripe Korean Native Pumpkin, Yangsan, during Long-term Storage, and High Temperature and Pressure Treatment)

  • 윤선주;정병룡;강선철
    • Applied Biological Chemistry
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    • 제47권4호
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    • pp.409-413
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    • 2004
  • 상온에서 60일 동안 저장한 ‘양산’ 품종의 국내산 완숙호박 과육의 pH, 당도, 중량, 수분함량, 총단백질 함량 및 단백질을 구성하고 있는 아미노산 함량의 변화에 대하여 조사하였다. 그 결과 당도는 저장기간에 따라 큰 차이가 없었으며, pH는 약간 산성화 되었다. 중량과 과육 내 수분함량은 소폭 감소하는 경향을 보였다. 총단백질 함량과 단백질 내 구성아미노산 함량에서는 저장기간이 길어질수록 증가하는 경향을 보였다. 그러나 아미노산 조성에는 큰 차이가 없었으며 glutamic acid(15.5%), aspartic acid(10.1%), lysine(8.7%), valine(7.5%), leucine(7.1%) 및 alanine(6.6%)의 순서로 존재하였다. 또한 $121^{\circ}C$ 고온 및 $1\;kg/cm^2$의 고압 조건에서 1시간 동안 일정한 간격으로 처리한 완숙호박의 유리아미노산 함량 및 색도 변화를 조사하였다. 유리아미노산 분석결과 모든 처리구에서 필수아미노산 8종(histidine, isoleucine, leucine, lysine, phenylalanine, methionine, threonine, 및 valine)과 이뇨작용과 관련된 아미노산류 3종(ornithine, citrulline, arginine)을 비롯하여 총 29종이 검출되었으며, 이 중에서 aspartic acid와 asparagine이 각각 20.3%와 15.4%를 차지하여 가장 많은 함량을 차지하였다. 이와 같은 유리아미노산 조성은 고온고압 처리시간이 길어질수록 arginine과 glutamic acid는 대폭 감소하였고, ammonium chloride는 오히려 증가하는 경향을 보였다. 처리시간별 과육의 색도는 처리시간에 길어질수록 황색을 나타내는 b값이 줄어, 처리 1시간째에 17.45에서 9.14로 낮아졌다. 이것은 ${\beta}-carotene$을 비롯한 황색계통의 색소들이 상당히 파괴되었기 때문에 생긴 현상으로 보여진다.

Molecular analysis on the ODC antizyme from flounder (Parlichthys olivaceus)

  • Seo, Yong-Bae;Lee, Jae-Hyung;Kim, Young-Tae
    • 한국생물공학회:학술대회논문집
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    • 한국생물공학회 2003년도 생물공학의 동향(XII)
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    • pp.733-735
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    • 2003
  • Ornithine decarboxylase (ODC) is a key enzyme on the regulation of cellular polyamines. ODC antizyme is a protein that represses ODC through accelerating enzymatic degradation by the 26S proteasome. We have isolated two distinct antizyme cDNA clones (AZS and AZL) from a brain cDNA library constructed with flounder (Paralichthys olivaceus). AZS and AZL cDNA clones were encoding 221 and 218 residues long respectively and revealed 57.7% amino acids sequence identity. The presence of two antizymes mRNA were detected in brain, kidney, liver, and embryo.

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퍼지이론을 이용한 임상검사 자동분석에 관한 연구 - 간기능검사 결과 자동분석시스템 - (Automated Clinical best Result Analysis System - Application to liver function test -)

  • 차은종;이태수
    • 대한의용생체공학회:의공학회지
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    • 제14권4호
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    • pp.341-348
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    • 1993
  • Automated system to analyze liver function test results is presented based on fuzzy logic knowledge. Clinician's knowledge and experience was first expressed in linguistic terms fol- lowed by conversion to numerical values to create membership functions of disease possibility for each test item and liver disease. Membership functions were then compensated for different relative importances of test items. Liver diseases considered were acute viral hepatitis (AVH), chronic persistent hepatitis(CPH), chronic active hepatitis(CAH), and liver cirrhosis(LC), Liver function test results of alanine aminotransferase(ALT), aspartate amino- transferase(AST) , glutamate dehydrogenase(GDH), ornithine carbamyltransferase(OCT) , ALT/AST, and 10* GDH/ALT in 218 patients were analyzed by the present system, welch resulted in 80% accuracy. AVH and CAH showed the highest 93 % and the lowest 58% ac- curacies, respectively, which was similar to the clinician's expectation. The simple mathemat- ical formulation of the present system would enable an easy implementation in commercial analysis instruments. Also, the identical fuzzy logic can be applied to similar diagnostic envi- ronments in general.

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임신말 태아의 아미노산영양에 대한 연구 (A Study on the Fetal Amino Acids Nutrition at Term of Human Pregnancy)

  • 안홍석
    • Journal of Nutrition and Health
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    • 제17권1호
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    • pp.50-59
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    • 1984
  • This study was performed to investigate the placental transfer and the human fetal utilization of amino acids at term of pregnancy. The plasma levels of 23 free amino acids in both the umbilical circulation ( umbilical vein and artery ) and the uterine circulation ( uterine vein and iliac artery ) of 34 pregnant women were measured at delivery by the cesarean section. In the umbilical circulation, 9 amino acids ( alanine, lysine, valine, leucine, arginine, isoleucine, ornithine, cystine, ${\alpha}-aminobutyrate$ ) were significantly higher and 2 amino acids ( glutamate, aspartate ) were significantly lower in the umbilical vein than in the umbilical artery. In the uterine circulation, alanine, tyrosine and methionine were significantly lower in the uterine vein than in the iliac artery. Glutamate was significantly lower in the uterine vein than in the iliac artery. According to these results, the origin of fetal plasma amino acids was discussed in terms of the metabolic conversions which would occur in the Placenta and the fetal utilization of amino acids was estimated.

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당근 현탁배양세포에서 $Ca^{2+}$과 Polyamine이 Callose 함량에 미치는 영향 (Effects of $Ca^{2+}$ and Polyamine on Callose Contents in Carrot Suspension Cultured Cells)

  • 강영희
    • Journal of Plant Biology
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    • 제32권4호
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    • pp.215-226
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    • 1989
  • The effects of Ca2+ on polyamines on callose contents of carrot suspension cultured cells were studied. The regeneration process of the cell wall of carrot protoplast observed through the electron microscope. Treatment of the carrot suspension cultured cells with Ca2+ and polyamines resulted in considerable increase on callose contents at 0.1 mM of Ca2+ and polyamines, particulary spermidine. Poly-L-lysine and poly-L-ornithine increased about 30% and 100% of callose contents than that of the control respectively, whereas verapamil and flunarizine markedly decreased the callose contents. These effects of Ca2+ of free ion rather than as Ca2+-calmodulin complex. During the cultivation of the protoplast, the regeneration of the cell wall was somewhat observed on the 4th day, however, it was inhibited by verapamil. These results suggested that the promotive action of Ca2+ and polyamines were manifested in the callose contents and the regeneraton of the cell wall.

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생체생장에 관한 세포생물학적 연구 Polyamine과 auxin이$\beta-1,4-endoglucanase$ 활성에 미치는 영향 (Cell Biological Studies on Growth and Development Effect of polyamine and auxin on $\beta-1,4-endoglucanase$)

  • 조영동
    • Journal of Plant Biology
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    • 제31권3호
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    • pp.239-247
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    • 1988
  • Spermidine, spermine and IAA promoted an increase in $\beta$-1, 4-endoglucanase activity in hypocotyls of Glycine max. The optimal concentration for the increase of the enzyme activity was 10-6 M for spermidine, 10-8 M for spermine and 10-6 M for IAA. However, IAA had innocuous effect on arginine decarboxylase and ornithine decarboxylase activites, and the content of polyamine. Such cumulative results suggest that the increase in $\beta$-1, 4-endoglucanase activity by IAA is not attributed by the effect on the biosynthesis of polyamine by IAA but spermidine, spermine and IAA induce cell wall loosening and therefore extension growth of cells.

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Polyamine과 Polyamine의 생합성에 관련된 효소들의 시금치잎 세포내 분포에 관한 연구 (Studies on the Intracellular Localization of Polyamines and Their related Enzymes in Spinach Leaves)

  • 김성호
    • Journal of Plant Biology
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    • 제32권4호
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    • pp.285-292
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    • 1989
  • The intracellular localizations of polyamines and their related enzymes were investigated from young spinach leaves. Polyamines were present in all parts of plant cells, both in the subcellular organelles and in the soluble fraction of cytoplasm, however, polyamines were mainly located in the cytosolic fraction. Most activities of L-arginine decarboxylase(ADC) and L-ornithine decarboxylase(ODC), two important enzymes of putrescine and polyamine biosynthesis, were detected in cytosol fraction, while in subcellular organelles the activities were very low. Activities of diamine oxidase(DAO) and polyamine oxidase(PAO), the catabolic enzyme of diamine and polyamine, were not detected in spinach leaves. It was suggested that polyamines and their related synthetic enzymes were located in the soluble fraction of cytoplasm.

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