A simultaneous detection and quantification method for determining the Phenylalkylamine derivatives, such as methamphetamine (MA), amphetamine (AM), 3,4-methylenedioxymethamphetamine (MDMA), 3,4-methylenedioxyamphetamine (MDA), ketamine (KT), norketamine (NKT), phentermine (PT), fenfluramine (FFA) and phenmetrazine (PM), in oral fluid was developed and validated according to international guidelines. The validated method was applied to actual oral fluid samples collected from drug abuse suspects. The recovery of phenylalkylamines from oral fluid collection devices was also assessed. Oral fluid specimens from 20 drug abuse suspects submitted by the police were collected using Salivette$^{TM}$, Quantisal$^{TM}$ or direct expectoration. The samples were screened using a biochip array analyzer. For confirmation, the samples were analyzed by GC-MS in selected-ion monitoring (SIM) mode after extraction using automated SPE with a mixed-mode cation exchange cartridge and derivatization with trifluoroacetic anhydride (TFAA). The results from the immunoassay were consistent with those from GC-MS. All the oral fluid samples gave positive results for MA, AM, PT and/or PM. The detection of phenylalkylamines in oral fluid can provide a better indication of recent use than urine or hair. Therefore, the oral fluid specimen was useful for demonstrating phenylalkylamines abuse in the driving under the influence of drug (DUID) as an alternative specimen for urine.
We investigated the effect of temperature and stock density on the collection efficiency of oral fluid in the pig farm in Korea. Three pig farms with similar breeding environmental conditions were selected and four pens of each farm (total 12 pens) were tested for the collection efficiency of oral fluid from pigs. Collection rate was considered as significant when oral fluid was collected from 70% of pigs within a pen. In the case of growing pigs, when internal temperature of pig barn increased by one designated degree (5℃), the oral fluid collection rate significantly decreased by 24.7% (P<0.05). The collection rate of oral fluid also decreased by 7.1% (P<0.05) as the density rate increase by one designated degree (12.5%). It was estimated that the collection efficiency of oral fluid decreased when the internal temperature of pig barn was 30℃ or higher, or barn density is higher 25% or high. On the other hand, in the case of stall-housing sows, unlike growing pigs, there was no significant differences according to the temperature, so oral fluid collection was considered to be efficient even in hot season.
The objective of this study was to evaluate the usefulness of detection of PRRSV and PRRSV-specific antibodies in oral fluids for monitoring of PRRSV infection in endemic farms. The level of PRRSV and anti-PRRSV antibodies in serum and oral fluids was evaluated in five age groups of pigs (6, 9, 12, 16 weeks of age and gilts). The samples (25 serums and 5 oral fluids/per a farm) were collected from 5 different farms endemically infected by PRRSV. Both serum and oral fluid samples were tested for PRRSV by quantitative reverse-transcription polymerase chain reaction (qRT-PCR) and for anti-PRRSV antibodies by two commercial PRRSV ELISA kits. ELISA mean s/p ratios (2.98 vs 1.63) and positive rate (84.0% vs 68.8%) of the oral fluid samples showed significantly higher levels but had similar patterns to the seroprofile of the blood samples. The PRRSV positive rate of oral fluid and serum samples was 40.0% and 44.0% respectively. In conclusion, the use of oral fluids for PRRS monitoring in endemic farms is strongly recommended.
Amniotic fluid is a complex and biological reservoir that provides mechanical cushioning and has many nutrients required for fetal growth and development. During our main research works about the fetal surgery of congenital facial defects, we reviewed several recent articles about the effectiveness and composition of amniotic fluid. Among these review processes, amniotic fluid, as the convenient medium to store sking grafts, was focused especially for its growth factors and rich nutrients, and we summarized some experimental investigations of skin grafts stored in amniotic fluid in rats. We reviewed mainly the article, "Turhan-haktanir N. et al. Histological assessment of skin grafts in amniotic fluid and saline. J Plast Surg Hand Surg 2010;44:226-30."
Oral fluid has become increasingly popular as an alternative specimen in the field of driving under the influence of drugs (DUID) and work place drug testing. In this study, an analytical method for the detection and quantification of ${\Delta}^9$-tetrahydrocannabinol (THC) and its metabolite, 11-nor-9-carboxy-${\Delta}^9$-tetrahydrocannabinol (THC-COOH) in oral fluid by SPE and GC-MS was established and fully validated. The stability of THC and THC-COOH in oral fluid during storage was also determined by examining the THC and THC-COOH concentration changes depending on time and container materials. Oral fluid samples were kept over 21 days at room temperature, $-4^{\circ}C$ and $-20^{\circ}C$ in two different specimen collection tubes; glass and polypropylene tubes. Three replicates for each condition with different temperature and types of a container were analyzed at five different time points over 21 days. When oral fluid samples were stored in glass tubes, the loss of both THC and THC-COOH was less than 10% at all room temperature, $-4^{\circ}C$ and $-20^{\circ}C$. However, in polypropylene tubes, the loss of both THC and THC-COOH increased significantly over the study period. In particular, the concentration of THC decreased more rapidly than that of THC-COOH at room temperature and the maximal percentage of THC lost was 90.3% after 21 days. The result indicates that it would be necessary to collect oral fluid samples in glass containers and cool the samples until analysis in order to prevent the degradation of analytes.
Few topics in operative and perioperative patient management generate more controversy than that of appropriate fluid and electrolyte therapy. especially, controversy has swirled around colloid vs crystalloid therapy and the composition of administered fluids, agreement among clinicians as to what fluid therapy is appropriate, and in what amount, is rare. This controversy likely will be enhanced by Arieff' s provocative article. He described 11 adults and 2 pediatric patients. All developed fatal postoperative pulmonary edema, seemingly caused solely by excessive postoperative fluid administration. From January 1999 to December 1999, we investigated 24 patients, which were operated by orthognathic surgery, about the intraoperative fluid therapy and the associated effect in orthognathic surgery, which is regarded as one of the major surgery of oral and maxillofacial surgery. First, They were devided into two groups, that is one-jaw surgery and two-jaw surgery, and each groups were devided by intraoperative fluid volume of 8ml/kg/hr. Subjective assesment was collected through use of a series of 3 questionnaries. In each questionnaire, a 5-point Liekert scale was used far assessment of following parameters of recovery from anesthesia: headache, dizziness, drowsiness, nausea/vomiting, thirst. The patient completed questionnaire 1 at 4 hour after surgery, questionnaire 2 was completed at 24 hours after surgery, and questionnaire 3 was completed at 48 hours after surgery. This study demonstrated that appropriated perioperative rehydration decreases postoperative adverse outcomes and improved the patient's perception of the postoperative period.
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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제34권2호
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pp.113-118
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2008
Temporomandibular joint disorder (TMD) can induce severe pain but, its pathogenic mechanisms remain poorly understood. In this study, we analyzed proteomes of human synovial fluid in the superior joint space in the patients with TMD, which is obtained during the treatment arthrocentesis. We've got this result that one of the spots was consistently down-regulated in synovial fluid of patients with TMD from analysis of protein pattern. Its molecular weight was estimated to be 33 kDa. Synoviolin was identified in our proteomics analysis of LC/MS/MS. This protein was recently reported as one of the proteins that might affect rheumatoid arthritis (RA). Synoviolin that might be associated with RA was detected in synovial fluid of patients with TMD. We can conclude that synoviolin might be involved not only in the pathogenesis of RA but also in TMD. In result, synoviolin might be involved in the pathogenesis of TMD and can be candidates as new therapeutic targets of TMD or early detection biomarkers.
Porcine circovirus-2 (PCV2) 는 돼지에서 여러 형태의 질병과 증후군의 발생과 관련이 되어있어 현재는 PCV-associated diseases (PCVAD)로 총괄적으로 분류된다. PCVAD에 의한 높은 경제적 손실 때문에 많은 양돈장들이 PCV2의 감염을 확인하기 위하여 혈청을 검사하고 있다. 하지만, 기존의 혈액채취법은 비용이 높고 많은 인력이 소요되므로 큰 규모의 병원체 검사에는 어려움이 있었다. 이에 본 연구에서는 혈액채취법을 이용한 돈군의 PCV2 검사법에 대한 대체방법으로 돈방 단위의 구강액채취법의 유용성을 실제 농장에서 평가하였다. 세 곳의 다른 양돈 농장들에서 각각 6개의 25두 규모의 돈방들을 선정하여 생후 3, 5, 8, 12, 16주에 돈방 마다 하나의 구강액과 5개의 혈청을 채취하였다. 모든 시료들은 real-time PCR을 이용하여 PCV2 DNA를 검사하였고 IgG 또는 IgA 간접형광항체 검사법및 세 가지의 ELISA 검사법 (blocking ELISA, indirect ELISA, and IgG/IgM sandwich ELISA)을 이용하여 PCV2에 대한 항체를 검사하였다. 구강액에서 PCV2 DNA는 8주까지는 간헐적으로 검출이 되다가 16주에는 모든 돈방에서 검출이 되었으며, 모체유래 PCV2 특이 IgG는 3주부터 검출이 되었고 모든 농장에서 5-8주까지 지속이 되었다. 16주에는 한 농장 (Site 1)의 모든 돈방에서 감염에 의한 IgG와 IgA가 검출되었다. 혈청에서의 PCV2 DNA와 PCV2 항체의 검출은 구강액에서의 검출과 높은 상관관계를 보였다. 따라서 구강액은 돈군의 PCV2 감염을 모니터링 하기 위해 혈청대신 사용할 수 있는 저비용, 고효율의 시료가 될 수 있을 것으로 사료된다.
A qualitative and quantitative analytical method was developed for detection of methamphetamine (MA) and its main metabolite amphetamine (AM) in oral fluid. Oral fluids of eleven drug abusers were provided by Police, specimens were collected by stimulation with a cotton swab treated with 20 mg of citric acid ($Salivette^{(R)}$; Sarstedt, USA). As the preliminary test, oral fluid samples were screened for amphetamines by Fluorescence Polarization Immunoassay (TDxFLx, Abbott Co.). Extraction for MA was performed using solid-phase extraction (SPE) by $RapidTrace^{TM}$ (Zymark, USA) with mixed mode cation exchange cartridge, CLEAN $SCREEN^{(R)}$ (130 mg/3 ml, UCT) after dilution with phosphate buffer. Samples were evaporated and derivatized by pentafluoropropionic acid anhydride (PFPA). Quantitation of MA and AM was performed by gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS) using selective ion monitoring (SIM), the quantitation ions were m/z 204 (MA), 208 (MA-$D_5$), 190 (AM) and 194 (AM-$D_5$). The selectivity, linearity of calibration, limit of detection (LOD) and quantification (LOQ) within- and between day precision, accuracy and recoveries were examined as parts of the method validation. All oral fluid samples gave positive results to immunoassay for MA (cut-off level, 50 ng/ml as d-amphetamine). Concentrations of MA and AM by GC-MS in eleven samples were ranged 104.2${\sim}$4603.3 ng/ml and 32.4${\sim}$268.6 ng/ml, respectively. Extracted calibration curves of MA and AM were linear over the two concentration range of 1${\sim}$100 and 50${\sim}$1000 ng/ml with correlation coefficient of above 0.999. LOQ of MA and AM was 1 and 3 ng/ml, respectively. The intraand inter-day run precisions (CV) for MA and AM were less than 10%, and the accuracies (bias) for MA and AM were also less than 10% at the two different concentrations 5 and 100 ng/ml at low calibration range, 50 and 1000 ng/ml at high calibration range. The absolute recoveries of MA and AM at low and high calibration ranges were more than 82% and 75%, respectively. In this study the qualitative and quantitative analytical method of MA in oral fluid was established. Oral fluid testing may detect drug use in past hours because of its shorter detection window than urine, and be useful in post-accident situations. So oral fluids will be most useful for testing drug abuse in the driving under the influence of drug (DUID) as the alternative specimens of urine.
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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제27권3호
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pp.204-208
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2001
The purpose of this study is to examine the change of enzymeimmuno-assay for $prostaglandinE_2$ in the synovial fluid lavage specimen of patients with mandibular fracture patients without condylar fracture. For this study, fourteen patients (eight males, six females) with mandibular fractures without condylar fracture was investigated to analyse the synovial fluid from upper temporomandibular joint cavities. Synovial fluid was collected from TMJ cavities of mandibular fracture patients before open reduction and after one week of open reduction, and then stored in liquid nitrogen tank after centrifuge. Two synovial fluid lavage samples of TMJs of 2 asymptomatic served as normal controls referred from other data. The concentrations of $PGE_2$ were measured by use of $PGE_2$ EIA System ($Amersham^{(R)}$). The following results were obtained: 1) In nine patients, the concentrations of $PGE_2$ are lower after open reduction than before. 2) In three patients, the concentrations of $PGE_2$ are higher after open reduction than before. 3) There was no statistical significant between the preoperative group and postoperative 7 days (p>0.05), but there was some difference between the two groups. In conclusion, the results suggest that $PGE_2$ probably does not play as important role in the harm of TMJ.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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