포도씨의 총 카테킨 함량과 추출물의 항산화성을 극대화하기 위한 마이크로웨이브 추출조건의 최적화를 시도하였다. 중심합성계획에 따라 추출조건(microwave power $0{\sim}120\;W$, 에탄올 농도 $0{\sim}100%$, 추출시간 $1{\sim}5\;min$)을 설계하고, 종속변수로서 추출물의 수율, 카테킨 함량 및 전자공여능을 회귀 분석함으로써 최적 추출조건을 예측하였다. 모든 회귀식의 $R^2$는 0.9 이상으로 1% 수준에서 유의성이 인정되었다. 총 카테킨 함량의 최대 추출 값은 434.16 mg%로 예측되었으며, 추출조건은 microwave power 122.76 W, 에탄올 농도 42.88%, 추출시간 4.67 min으로 나타났다. 추출물에 대한 세 가지 종속변수의 극대 값을 얻기 위한 추출조건 범위는 $75{\sim}150\;W$, $40{\sim}60%$ 및 $3.5{\sim}5.0\;min$이었다. 이상의 예측 값(총 추출수율 6.72%, 총 카테킨 함량 408.65mg%, 전자공여능 83.33%)은 실제 값과 유의적인 차이가 없었으며, 최적화된 마이크로웨이브 추출법(112.5 W, 50% 에탄올, 4.2분)은 현행추출법 (80% 에탄올, $60^{\circ}C$, 3시간, 150 rpm)에 비해 추출효율이 우수하였다.
본 연구에서는 인간 면역 세포인 B 세포와 T 세포 그리고 그들의 cytokinedml 분비에 대해서 조사하였다. 또한 일일 경구 투여량을 30 mg/mL 그리고 100 mg/mL의 농도로 조절하여 암컷 ICR 마우스에 투여하여 혈청에서의 항체 생성량을 조사하였다. 인간 정상 폐세포에 대한 세포독성 결과 모든 추출물이 24.15% 이하의 독성을 나타내었다. 인간 면역 세포인 B 세포와 T 세포 모두 초고압 추출공정에 의해 40% 이상 생육이 증진하였다. 인간 면역 세포인 B 세포와 T 세포에서 분비되는 cytokine(IL-6, TNF-${\alpha}$)의 양은 일반 열수 추출 공정과 비교하여 약 20-50% 증가하였다. 또한 고로쇠 추출물의 투여로 인해 총 항체 생성량도 증가하였다. 이와 같은 결과에서 고로쇠의 효과적인 최적의 추출 조건은 일반적인 공정 보다 $100^{\circ}C$이하의 온도에서 높은 압력과 함께 용매 추출공정을 이용하는 것이다.
마늘의 일시 대량 처리가 가능하고, 맛과 향미의 임의 조절이 가능하여 향신료의 품질을 균일화 및 표준화 시킬 수 있으며 유효 성분을 함유하고 있는 가공형태인 oleoresin을 제조하기 위하여 마늘의 ethanol 추출 조건에 의한 oleoresin의 최적 수율 및 thiosulfmate의 함량에 대하여 조사한 결과 시료 중량에 대한 용매의 적정 혼합 비율은 1:2(w/v)이었으며, 추출 온도와 시간은 각각 $30^{\circ}C$, 3 시간으로 조사되었으며 추출 횟수는 3번씩 추출하였을 때 oleoresin의 최적 수율 및 thiosulfinate의 함량은 각각 14.52%와 $209.93{\mu}mol/g$였다. 또한 위 조건 하에서 제조된 oleoresin의 향기 성분 분석 결과 diallyl disulfide, methyl allyl trisulfide, 3,4-dihydro-3vinyl-1,2-dithiin, 2-vinyl-4H-1,3-dithiin, diallyl trisulfide 등의 5종류의 마늘의 주요 향기 성분인 휘발성 황화합물이 검출되었다. Oleoresin의 저장시 품질 특성 변화를 조사하기 위하여 $4^{\circ}C$ 및 $25^{\circ}C$에서 30 일간 저장한 결과 thiosulfinate 함량이 $4^{\circ}C$에서는 $32.37{\mu}mol/g$으로 측정되었으나 $25^{\circ}C$ 저장시에는 거의 측정되지 않았다. 갈색도 및 탁도는 $25^{\circ}C$에서 저장하였을 경우 $4^{\circ}C$ 저장에 비해 현저히 증가하였으며, 산도의 경우 저장 온도에 관계없이 큰 변화를 보이지 않아 $4^{\circ}C$에서 저장시 마늘 oleoresin의 품질 특성이 좋게 나타났다.
본 연구는 고비의 성엽으로부터 항산화 물질 추출과 항산화 활성을 증가시키기 위한 적정 추출 조건을 구명하기 위하여 시행하였다. 동결건조 한 다음 분쇄한 고비 성엽 1 g을 메탄올, 80% 에탄올, 물 등 3종류의 용매와 혼합한 다음 상온에서 침지, $60^{\circ}C$의 항온 수조에서 가열, 200 rpm에서 교반하여 6시간동안 추출하거나 42 kHz의 초음파 수조에서 15, 30, 45분 동안 추출하였다. 추출물은 여과한 다음 최종 볼륨을 50 mL로 정량하여 가용성고형분, 총 폴리페놀 및 총 플라보노의 함량을 구하였으며, 항산화활성은 0.15 mM의 DPPH와 7.4 mM의 ABTS radical 소거능으로 측정하였다. 고비 성엽 추출물의 항산화 효과를 증가시키기 위해서는 메탄올과 80% 에탄올을 용매로 사용하는 것이 효과적인 것으로 나타났다. 메탄올을 용매로 초음파 수조에서 15분 동안 추출했을 때 총 폴리페놀의 함량(45.15 $mg{\cdot}g^{-1}$ db)과 DPPH radical 소거활성($RC_{50}$=0.35 $mg{\cdot}mL^{-1}$)이 가장 우수하였으며, 총 플라보노이드의 함량은 메탄올을 용매로 상온침지 또는 가열추출하였을 때 (38.10~38.10 $mg{\cdot}g^{-1}$ db), ABTS radical 소거활성은 80% 에탄올을 용매로 상온침지 또는 가열추출하였을 때 가장 우수하였다($RC_{50}$=0.21~0.22 $mg{\cdot}mL^{-1}$). 연구의 결과, 초음파 수조를 이용한 추출은 노력과 시간을 절감할 수 있는 효율적인 추출방법으로 생각되었으며, 고비의 성엽은 메탄올을 용매로 15~30분 동안 초음파 수조에서 추출하는 것이 추출물의 다양한 항산화활성을 증가시키는데 가장 적합한 것으로 나타났다.
늙은 호박을 최적의 추출조건에서 추출물을 얻고자 반응표면분석을 이용하여 추출조건을 최적화하였다. 중심합성 계획에 따라 요인변수로 마이크로웨이브 에너지(30~150 watt), 에탄올 농도(0~100%) 및 추출시간(1~9분)을 달리하고, 전자공여작용, tyrosinase 저해효과, SOD 유사활성 및 총 폴리페놀 함량을 종속변수로 하여 추출하였다. 추출 결과 종속변수에 따라 회귀식의 $R^2$이 각각 0.7035, 0.7748, 0.9496 및 0.9219로 나타나 SOD 유사활성과 총 폴리페놀 함량의 유의성이 인정되었다. 종속변수인 전자공여작용, tyrosinase 저해효과, SOD 유사활성 및 총 폴리페놀 함량 모두 마이크로웨이브 에너지의 영향이 가장 큰 것으로 나타났다. 네 가지 종속변수의 극대값을 얻기 위한 최적 추출조건의 범위는 4차원 반응표면분석을 superimposing하여 얻었다. 그 결과 최적 추출조건이 마이크로웨이브 에너지 72~144 watt, 에탄올 농도 0~38%, 추출시간 6~9분의 범위를 나타내었다.
본 연구에서는 전통방식으로 재현한 아교를 대상으로 가죽부위에 따른 다양한 추출조건별 특성변화를 확인하고자 하였다. 평균분자량(Mw, Mz)은 추출시간에 따라 증가하였으며, 다분산성(PDI)은 추출시간에 따라 증가하다 추출 48시간에서 감소하였다. 평균분자량과 PDI 모두 가죽부위별 차이는 없었지만, 개체별로는 총분자량 차이가 있었다. 추출물의 차이는 아교(젤라틴)를 대표하는 Amide 영역들을 통해 비교한 결과, 추출시간에 따라 뱃가죽의 삼중나선구조가 파괴되는 것이 확인되어 가죽부위별 차이점이 확인되었다. 물성평가 결과, 황색도는 추출시간이 증가할수록 높아졌고, 점도는 분자량의 변화와 비례하지 않았다. pH는 화학적 전처리가 없는 생산아교의 일반적인 특징과 동일하게 나타났다. 각 추출조건에 따른 생산아교의 특징들을 전체적으로 분석한 결과, 소 개체별 차이가 큰 영향을 미쳐 소량 추출의 경우 일정한 품질을 유지하기 힘들다는 것을 확인하였다. 추후 더 다양한 추출조건에 대한 연구가 진행되어 일정한 품질을 가진 전통아교의 보급을 기대한다.
활성탄소섬유(ACF; activated carbon fiber)를 흡착제로 사용한 고상추출법(SPE; solid phase extraction)으로 수용액 시료 중에 존재하는 특정화학물질(schedule chemicals)의 분석법을 연구하였다. 본 연구에 사용된 특정화학물질은 화학작용제류의 가수분해 생성물과 유사작용제로 사용되는 알킬포스포네이트류, 티오디글리콜 등 14종이었다. 분석을 위한 추출물의 실릴 유도체화 반응에서 피리딘을 사용하여 특히 3-quinuclidinol의 유도체화 반응 효율을 높일 수 있었다. 물 시료에서 아민류의 추출 회수율을 개선하기 위하여 SPE-ACF 튜브에 시료를 부하하기 전에 5% triethylamine/MeOH(1 mL) 용액으로 SPE-ACF 튜브를 세척한 후에 시료를 SPE-ACF에 부하하는 방법으로 추출 회수율을 증대시킬 수 있었다. 이 연구를 통해서 수용액 시료에서 특정화학물질을 신속히 검출할 수 있는 최적 조건을 선정하였다.
Electron capture deteotor가 장착된 gas chromatography를 이용하여 간장에서 3-monochloro-1, 2-propanediol(MCPD)의 효율적인 분석조건을 조사하였다. MCPD를 직접 분석하는 것 보다 MCPD를 phenylboric acid로 유도체화하여 분석하는 경우가 sharp한 peak를 얻을 수 있었으며, 감도도 우수하였다. 유도체화 방법을 실온에서 5분간 vortex혹은 9$0^{\circ}C$에서 20분 반응시켜 분석한 결과, R값이 각각 0.9997과 0.9977로 큰 차이를 보이지는 않았다. MCPD의 추출방법은 Extrelut 3 column을 사용하는 것이 ethyl acetate로 직접 추출하는 것보다 회수율이 월등히 높았으며, MCPD의 농노가 높을수록 회수율이 낮게 나타났다. 하지만 MCPD를 정성적으로 분석하고자 할 경우 ethyl acetate로 직접 추출하는 방법도 유효한 것으로 나타났다. 간장에 MCPD를 spiking 하고 gas chromatography-electron capture detector 및 gas chromatography-mass selective detector로 분석한 결과 sharp한 모양의 peak를 얻을 수 있었으며, mass spectrum으로 MCPD를 확인할 수 있었다.
Objectives: This study was to investigate the anti-oxidation and anti-cancer activity of Chaga mushroom extract. Extraction condition optimization and beta-glucan analysis and anti-cancer activity tests were also done. Methods: Optimum extraction conditions for Chaga mushroom extract were at a temperature of $90^{\circ}C$ and 2hrs with 10 times of water. Extraction yield and economics were best under these conditions. Results: Anti-oxidation activity was the highest with the fraction of 100,000 MWCO and $IC_{50}$ value was $13{\mu}g/ml$ and this value was comparable to that of vitamin E, alpha-tocopherol. Among the fractions from various organic solvents, ethyl acetate fraction showed the highest anti-oxidation activity with $IC_{50}$ value of $7{\mu}g/ml$. For anti-cancer activity, chloroform fraction showed little anti-cancer activity and ethyl acetate fraction showed the best anti-cancer activity with $IC_{50}$$1.5{\mu}g/ml$ for stomach cancer cells. Anti-cancer activities for different molecular weight fractions were the best in the fraction of molecular weight less than 100,000Da, and $IC_{50}$ values for stomach cancer cells and liver cancer cells were 1.7 and $1.4{\mu}g/ml$, respectively. Conclusions: From these results, we can conclude that the extract of Chaga mushroom could be a good source for functional food and natural anti-cancer medicine.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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