Hairy root culture of ginseng is industrially prospected because the cultivation period of ginseng is relatively long. In this study, the effect of medium concentration and sucrose concentration on hairy root culture of ginseng was evaluated. The optimization of ginseng hairy roots transformed by Agrobacterium rhizogene were performed liquid medium. The MS(Murashinge & Skoog basal medium) concentration was selected with 1/2 strength MS and the optimal sucrose concentration was determined at 2-3%(w/v). At the optimum culture condition, The yield (the ratio of weight of grown hairy root cultures to weight of fresh ginseng hairy roots) and production rate of ginseng root were 19.42 times and 5.73 g/l-day. The major ginsenosides were Rb group, Re and Rg1. The produced total ginsenoside content in the solid medium was 9.87 (mg/g) and increased 1.34 times in the liquid medium (13.23 mg/g). In solid culture, the contents of ginsenosides Rb, Re and Rg1 were 2.14, 3.65 and 1.87 mg/g, respectively. In liquid culture, the contents of ginsenosides Rb, Re and Rg1 were 3.54, 4.12 and 2.63 mg/g, respectively.
Kim, S.N.;Min, K.K.;Choi, I.H.;Kim, S.W.;Pyo, S.N.;Rhee, D.K.
Archives of Pharmacal Research
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제19권3호
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pp.173-177
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1996
The Pneumococcus, Streptococcus pneumoniae, has an ample polysaccharide (PS) capsule that is highly antigenic and is the main virulence factor of the organism. The capsular PS is the source of PS vaccine. This investigation was undertaken to optimize the culture conditions for the production of capsular PS by type 4 pneumococcus. Among several culture media, brain heart infusion (BHI) and Casitone based medium were found to support luxuriant growth of pneumococcus type 4 at the same level. Therefore in this study, the Casitone based medium was used to study optimization of the culture condition because of BHI broth's high cost and complex nature. The phase of growth which accomodated maximum PS production was exponential phase. Concentrations of glucose greater than 0.8% did not enhance growth or PS production. Substitution of nitrogen sources with other resources or supplementation of various concentrations of metal ion (with the exception of calcium, copper, and magnesium ions) had adverse effects on growth and PS production. On the other hand, low level aeration and supplementation of 3 mg/l concentration of asparagine, phenylalanine, or threonine were beneficial for increased PS production. The synergistic effect of all the favorable conditions observed in pneumococcal growth assays provided a two-fold cumulative increase in capsular PS production.
키토산분해효소를 분비하는 세균 Bacillus sp. P16의 최적배양조건을 조사하였다. 키토산분해효소 생산을 위한 최적 탄소원은 0.5%분말 키토산이었으며, 최적 질소원은 1% tryptone이었다. 최적온도는 $37^{\circ}C$였으며, 최적 초기 pH는 7.0이었다. 이 조건에서 $60{\sim}$72시간 배양하였을 때 효소 생산이 최고에 도달하였으며, 효소활성은 약 30% 증가하였다. 이를 발효조에서 배양하면 $6{\sim}$12시간 배양으로 최대활성에 도달하였으며, 효소 생산은 약 100% 증가하였다.
PARK, HEE-SEOP;KANG, SEUNG-HOON;PARK, HYUN-JOO;KIM, EUNG-SOO
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제15권1호
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pp.66-71
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2005
Doxorubicin is a clinically important anticancer polyketide compound that is typically produced by Streptomyces peucetius var. caesius. To improve doxorubicin productivity by S. peucetius, a doxorubicin pathway-specific regulatory gene, dnrI, was cloned into a high-copy-number plasmid containing a catechol promoter system. The S. peucetius containing the recombinant plasmid exhibited approximately 9.5-fold higher doxorubicin productivity compared with the wild-type S. peucetius. The doxorubicin productivity by this recombinant S. peucetius strain was further improved through the optimization of culture media composition. Based on the Fractional Factorial Design (FFD), cornstarch, $K_2HPO_4$, and $MgSO_4$ were identified to be the key factors influencing doxorubicin productivity. The Response Surface Method (RSM) results based on 20 independent culture conditions with varying amounts of key factors predicted the highest theoretical doxorubicin productivity of 11.1 mg/l with corn starch of 46.33 g/l, $K_2HPO_4$ of 4.63 g/l, and $MgSO_4$ of 9.26 g/l. The doxorubicin productivity of the recombinant S. peucetius strain with the RSM-based optimized culture condition was experimentally verified to be 11.46 mg/l, which was approximately 30.8-fold higher productivity compared with the wild-type S. peucetius without culture media optimization.
According to the controllability of pulse times and the amount of jumps in the states at these times in the process of fed-batch culture producing 1,3-propanediol, this paper proposes a terminal optimal control model, whose constraint condition is the nonlinear impulsive delay system. The existence of optimal control is discussed and an optimization algorithm which is applied to each subinternal over one cycle for this optimal control problem is constructed. Finally, the numerical simulations show that the terminal intensity of producing 1,3-propanediol has been increased obviously.
In this experiment, we tested various nitrogen sources and then culture condition was optimized for industrial applications. The batch culture of Candida magnoliae SR101 grown in a defined medium supplemented with light steep water (LSW) as a sole nitrogen source showed a relatively high yield of erythritol production (53%), which was slightly higher than that using yeast extract as a nitrogen source, while the productivity and cell mass were maintained at similar levels. For the optimization of culture condition, the batch culture was performed. When the concentration of LSW was 65 mL/L in the defined medium containing 250 g/L of glucose, the concentration, yield and productivity of erythritol were 110 g/L, 44%, and 0.66 g/L-hr, respectively. The high yield and comparable productivity obtained with a cheap nitrogen source could be expected as a basis for the mass production of erythritol in the industrial scale.
In vitro culture of murine embryos is an important step for in vitro production systems including in vitro fertilization and generations of genetically engineered mice. M16 is widely used commercialized culture media for the murine embryos. Compared to other media such as potassium simplex optimization medium, commercial M16 (Sigma) media lacks of amino acid, glutamine and antibiotics. In the present study, we optimized M16 based embryo culture system using commercialized antibiotics-glutamine or amino acids supplements. In vivo derived murine zygote were M16 media were supplemented with commercial Penicillin-Streptomycin-Glutamine solution (PSG; Gibco) or MEM Non-Essential Amino Acids solution (NEAA; Gibco) as experimental design. Addition of PSG did not improved cleavage and blastocyst rates. On the other hand, cleavage rate is not different between control and NEAA treated group, however, blastocyst formation is significantly (P<0.05) improved in NEAA treated group. Developmental competence between PSG and NEAA treated groups were also compared. Between two groups, cleavage rate was similar. However, blastocyst formation rate is significantly improved in NEAA treated group. Taken together, beneficial effect of NEAA on murine embryos development was confirmed. Effect of antibiotics and glutamine addition to M16 media is still not clear in the study.
This study was performed to get the basic information concerned to the optimum culture condition of Inonotus obliquus. Several solid media, PDA, MEA and Czapek-Dox, and three liquid media were adopted for the in vitro cultivation. Some main features of the fungal morphological characteristics under cultivation conditions were observed and described. Preliminary results showed that appearance of the mycelial mat, hyphal size and substrate pigmentation differed according to the media. The PDA medium was the most favorable substrate for the growth on solid culture, followed by MEA and Czapek-Dox media. Concerned to the addition of amino acids, 5 amino acids, such as alanine, alginine, isoleucine, leucine and threonine, enhanced to the mycelial growth. Isoleucine was shown the best fungal growth. An important morphological hyphal structure for the fungus, the setae, was found in abundance and diverse its shape and size. In liquid culture, fresh potato broth was the best growth stimulant of the fungus, followed by Malt extract and potato broth. Addition of yeast extract to the liquid media had improved the biomass, but not laccase production.
목질계 분해효소 활성 증대를 위해 밀짚을 이용한 고체발효에서 주요 발효인자의 최적화를 수행하였다. Trichoderma reesei와 Aspergillus niger를 이용한 혼합배양에서 고체발효에 주요한 영향을 미친다고 알려진 배양온도, pH, 수분함량과 고체기질 크기를 순차적 최적화를 진행하였다. 실험에 적용 된 인자 모두 목질계 분해효소 활성에 유의한 효과를 주었으며, 발효온도 $40^{\circ}C$, pH 7, 수분함량 75%와 고체기질 크기 0.25~0.5 mm가 목질계 분해효소 생산을 위한 최적 조건임을 알 수 있었다. 최적조건 하에서 밀짚을 이용한 고체발효를 수행하였을 때, 효소활성 기준 cellulase 10.3 IU, endoglucanase 100.3 IU, ${\beta}$-glucosidase 22.9 IU와 xylanase 2261.7 IU/g dry material을 배양 96시간에 확인할 수 있었다. 본 결과는 기존 효소활성 대비 각각 72.6, 48.7, 55.2와 51.9% 증가한 수치로 혼합배양과 순차적 최적화를 적용하여 효과적인 목질계 분해효소 활성 증대가 가능함을 확인하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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