The last enzyme of the sesquiterpen phytoalexin capsidiol synthesis in tobacco cell, 5-epi-aristolochene hydro-xylase which convert 5-epi-aristolochene (EAS) to capsidiol, was cloned by a reverse transcription polymerase chain reaction strategy and cDNA library screening. Cloned CYP-B3 contained high probability amino acid matches to known plant cytochrome P450 sequences and open reading frame with the conserved FxxGxRxCxG heme-binding region. Transcripts of CYP-B3 were not detected in control cells, but induced in elicitor-treated cells. Furthermore, CYP-B3 transcripts were induced by fungal extracts and cellulase but not by other stimuli(chilling, heat shock and 2,4-D). Induction of CYP-B3 transcripts by elicitor treatment was not affected by ancymidol and ketoconazole treat-ments suggesting that an inhibition of hydroxylase activity by Cyt P450 inhibitors resulting from post translational processing event.
Bovine PAS-4 is an integral membrane glycoprotein expressed in mammary epithelial cells. Complementary DNA (cDNA) cloning of PAS-4 was performed by reverse-transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) with oligonucleotide probes based on it's amino terminal and internal tryptic-peptides. The cloned PAS-4 cDNA was 1,852 nucleotides (nt) long and its open reading frame (ORF) was encoded 1,413 base long. The deduced amino acid sequence indicated that PAS-4 consisted of 471 amino acid residues with molecular weight of 52,796, bearing 8 potential N-glycosylation sites and 9 cysteine residues. Partial bovine CD36 cDNA from liver also was sequenced and the homology of both nucleotide sequence was 94%. Most of the identical amino acid residues were in the luminal/extracellular domains. Contrary to PAS-4, bovine liver CD36 displays 6 potential N-glycosylation sites, which were located, except for those at positions 101 and 171, at same positions as PAS-4 cDNA. Cysteine residues of PAS-4 and CD36 were same at position and in numbers. Northern blot analysis showed that PAS-4 was widely expressed, although its mRNA steady-state levels vary considerably among the analyzed cell types. PAS-4 possessed hydrophobic amino acid segments near the amino- and carboxyl-termini. Two short cytoplasmic tails of the amino- and carboxyl-terminal ends constituted of a 5-7 and 8-11 amino acid residues, respectively.
Jiang, Ming Feng;Hu, Ming Jun;Ren, Hong Hui;Wang, Li
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.28
no.12
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pp.1774-1783
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2015
Milk lysozyme is the ubiquitous enzyme in milk of mammals. In this study, the cDNA sequence of a new chicken-type (c-type) milk lysozyme gene (YML), was cloned from yak mammary gland tissue. A 444 bp open reading frames, which encodes 148 amino acids (16.54 kDa) with a signal peptide of 18 amino acids, was sequenced. Further analysis indicated that the nucleic acid and amino acid sequences identities between yak and cow milk lysozyme were 89.04% and 80.41%, respectively. Recombinant yak milk lysozyme (rYML) was produced by Escherichia coli BL21 and Pichia pastoris X33. The highest lysozyme activity was detected for heterologous protein rYML5 (M = 1,864.24 U/mg, SD = 25.75) which was expressed in P. pastoris with expression vector $pPICZ{\alpha}A$ and it clearly inhibited growth of Staphylococcus aureus. Result of the YML gene expression using quantitative polymerase chain reaction showed that the YML gene was up-regulated to maximum at 30 day postpartum, that is, comparatively high YML can be found in initial milk production. The phylogenetic tree indicated that the amino acid sequence was similar to cow kidney lysozyme, which implied that the YML may have diverged from a different ancestor gene such as cow mammary glands. In our study, we suggest that YML be a new c-type lysozyme expressed in yak mammary glands that plays a role as host immunity.
Triterpenoid saponins were synthesized in Panax ginseng C.A. Meyer via the isoprenoid pathway by cyclization of 2,3-oxidosqualene to give primarily oleanane (beta-amyrin) or dammarane triterpenoid skeletons. The triterpenoids are backbone and undergoes various modifications (oxidation, substitution and glycosylation), mediated by cytochrome P450 (CYP)-dependent monooxygenases, glycosyltransferase and other enzymes. This is likely to be due in part to the complexity of the molecules and the lack of pathway intermediates for biochemical studies. A cDNA clone encoding a putative CYP gene was isolated from flower bud of ginseng and transformed into the plant(Nicotiana tabacum cv. Xanthi) and confirmed by PCR analysis. The CYP gene (PgCYP) contained an open reading frame(ORF) encoding mature protein of 500 amino acids. The expression of PgCYP were investigated in transgenic tobacco by reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RT-PCR).
Journal of the Korean Society of Clothing and Textiles
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v.34
no.12
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pp.1980-1991
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2010
This study proposes the O P E N Triad framework as a future set of tools and perspectives for individual members and institutes to further their professional and academic potential as well as prospect and vitalize the future of the Korean Clothing and Textiles discipline through a global perspective. The millennial generation desires On-demand, Personal, Engaging, and Networked (O P E N) experiences effecting cultural change for creative and influential interaction in transactions, communication, and education. O P E N Individuals offers a WebSphere model as a holistic learning system that has a synergizing value of education across academic courses, industries, and cultures. Through a digitalized and virtualized class, it complements relevant technologies already familiar to the student population. By employing environmental scanning approaches, the most influential and viable future global issues related to the clothing and textiles discipline are identified and dialogued within O P E N Institutes. For future clothing and textiles institutes, this scanning allows them to be open to new ideas, to focus on inter-engagements, to collaborate among individuals, to associate as a part of web of people, organizations, and ideas, to personalize an institutes curricula, and to dialogue generative knowledge. O P E N Industries reveals three dominant future issues that cross academia and industry, sustainability, supply chain management, and social networking. In-depth interviews with U.S. industry experts identified interdependent gaps in global consumer experience practices and suggested the following gaps as future research areas: a standardized business model to the entrepreneurial model, strategic management to a sustainable competitive advantage, standardized to differentiated products, services and operations, market segmentation to global consumer clusters, business-driven marketplaces to consumer-engaged marketspaces, and excellent services to optimal experience. This O P E N Triad framework empowers millennial students, universities, and industries to anticipate and prepare for a radically changing world.
Hexokinase is the first enzyme in the hexose assimilation pathway; it acts as a sensor for plant sugar responses, and it is also important in determining the fruit sugar levels. The full-length cDNA of a hexokinase gene was isolated from loquat through reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) and rapid amplification of cDNA ends, which was designated as EjHXK1. EjHXK1 is 1,839 bp long and contains an entire open reading frame encoding 497 amino acids. The predicted protein of EjHXK1 shares 72%-81% similarity with other plant hexokinases. Phylogeny analysis indicated that EjHXK1 is closely related to maize and rice hexokinases. Transient expression of the 35S: EjHXK1-GFP fusion protein was observed on the cell membrane and cytoplasm. Real-time RT-PCR indicated that EjHXK1 is expressed in loquat leaves, stems, flowers, and fruits. EjHXK1 transcripts were higher during early fruit development, but decreases before maturation, which is consistent with hexokinase enzyme activity during fruit development and conducive for hexose accumulation in mature fruits. These results imply that EjHXK1 may play important roles in the regulation of sugar flux during fruit ripening.
Journal of the Korean Society of Physical Medicine
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v.11
no.4
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pp.19-26
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2016
PURPOSE: The purpose of this study was to compare the effect of correction on posture parameters between a horse riding simulator exercise and a conventional exercise occurring in an open linear chain linking the head to the pelvis in the sagittal plane of young adults with a forward head posture. METHODS: In this study, 30 subjects were randomly divided into two groups of 15 subjects each, were assigned to the horse riding simulator exercise or the neck exercise group and they performed exercise 30 minutes per each round two times a week for six weeks. To determine the subjects' forward head posture, the three angles and three distances were measured. RESULTS: The forward head angle and head distance results showed a significant change between pre and post intervention in both group. The horizontal distance between acromion and tragus results showed a significant change between pre and post intervention in neck exercise group (CG), but no significant change in horse riding simulator exercise group (EG). The averages of each measured values of EG and CG before and after were compared, but there are no significant different between groups. CONCLUSION: Although the effects of the horse riding exercise were lower than those elicited by the neck exercise, the results demonstrated that the horse riding simulator exercise improved posture alignment for subjects with forward head posture. Therefore, the horse riding simulator exercise can constitute an appropriate alternative exercise for subjects with forward head posture.
Hyperhidrosis of the palms, axillae, and the face has a strong negative impact on the quality of life for many people. Existing nonsurgical therapeutic options are far from ideal. A definitive cure can be obtained by upper thoracic sympathectomy. The traditional open surgical technique is a major procedure; few patients and doctors have found that risk-benefit considerations favor surgery. Endoscopic minimal invasive surgical techniques are now available. We investigated whether endoscopic ablation of upper thoracic sympathetic chain(T2-4) is an efficient and safe treatment of hyperhidrosis. We treated 40 patients with bilateral endoscopic transthoracic sympathectomy. There were no mortalities, life-threatening complication, no treatment failures occurred in 40 patients. After a short-term follow-up, 100% of the patients reported satisfactory results. Endoscopic transthoracic sympathectomy is an efficient, safe, and minimally invasive surgical method for the treatment of palmar, axillary hyperhidrosis.
PURPOSE. The purpose of this study was to evaluate the properties of a porous zirconia scaffold coated with bioactive materials and compare the in vitro cellular behavior of MC3T3-E1 preosteoblastic cells to titanium and zirconia disks and porous zirconia scaffolds. MATERIALS AND METHODS. Titanium and zirconia disks were prepared. A porous zirconia scaffold was fabricated with an open cell polyurethane disk foam template. The porous zirconia scaffolds were coated with ${\beta}$-TCP, HA and a compound of ${\beta}$-TCP and HA (BCP). The characteristics of the specimens were evaluated using scanning electron microscopy (SEM), energy dispersive x-ray spectrometer (EDX), and x-ray diffractometry (XRD). The dissolution tests were analyzed by an inductively coupled plasma spectrometer (ICP). The osteogenic effect of MC3T3-E1 cells was assessed via cell counting and reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RT-PCR). RESULTS. The EDX profiles showed the substrate of zirconia, which was surrounded by the Ca-P layer. In the dissolution test, dissolved $Ca^{2+}$ ions were observed in the following decreasing order; ${\beta}$-TCP > BCP > HA (P<.05). In the cellular experiments, the cell proliferation on titanium disks appeared significantly lower in comparison to the other groups after 5 days (P<.05). The zirconia scaffolds had greater values than the zirconia disks (P<.05). The mRNA level of osteocalcin was highest on the non-coated zirconia scaffolds after 7 days. CONCLUSION. Zirconia had greater osteoblast cell activity than titanium. The interconnecting pores of the zirconia scaffolds showed enhanced proliferation and cell differentiation. The activity of osteoblast was more affected by microstructure than by coating materials.
The aim of this study was to investigate the alterations in meningeal blood flow by stimulation of trigeminovascular system. An open cranial window was prepared on the right parietal bone of male Sprague-Dawley rats. Trigeminovascular system was stimulated by electrical stimulation of trigeminal ganglion (ETS), somatosensory (whisker) stimulation, or topical applications of capsaicin and neuropeptides including substance P and calcitonin gene-related peptide (CGRP). Neonatal capsaicin pretreatment was performed with subcutaneous administration of capsaicin (50 mg/kg) within the first 24 hours after birth. Changes in regional blood flow of dural artery (rDBF) and pial artery (rPBF) were continuously measured through the cranial window by laser-Doppler flowmetry. Both ETS and capsaicin caused a chain of alterations in rPBF and rDBF responses, i.e., an immediate transient decrease followed by rapid and marked increase in rPBF, which were significantly attenuated not only by pretreatments with L-733,060, a $NK_1$ receptor blocker, $CGRP_{8-37}$, a $CGRP_1$ receptor blocker, and 7-nitroindazole monosodium salt (7-NINA), a neuronal nitric oxide synthase inhibitor but also by neonatal capsaicin treatment. Exogenous neuropeptides including substance P and CGRP increased the meningeal blood flow, which was significantly attenuated not only by pretreatment with L-733,060 and $CGRP_{8-37}$, respectively, but also by pretreatment with 7-NINA. The rPBF response to whisker stimulation was significantly attenuated not only by trigeminovascular system injuries including nasociliary nerve denervation and neonatal capsaicin treatment but also by pretreatments with L-733,060, $CGRP_{8-37}$ and 7-NINA. These results suggest that the stimulation of trigeminovascular system causes prominent alterations in meningeal blood flow, and that neuropeptides as well as nitric oxide in the trigeminovascular system are importantly implicated in the regulation of meningeal blood flow.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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