To investigate the oil degrading properties of psychrotrophic bacterium Acinetobacter calcoaceticus Al-l the effects of environmental factors on this bacterium were studied. The optimal environmental conditions for cell growth rate and oil-emulsifying activity were as follows; temperature $15^{\circ}C$, pH 7.5, salt concentration 0- 3% and crude oil concentration 0.1%. Additionally the optimal concentration of Nand P source for cell growth rate and oil-emulsifying activity were 0.76 mM and 0.057 mM as $(NH_4)HS0_4$ and $K_2HP0_4$, respectively. Analysis of remnant oil by gas chromatography showed time dependent oil degradation pattern by A. calcoaceticus during cultivation; At lOoe and $15^{circ}$e, most alkane peaks were disappeared and it showed large quantities of crude oil were degraded. But at $25^{circ}$e alkane compounds in the crude oil were partially degraded even after 120 hours incubation.
Phenanthrene degrading bacteria were isolated from the petroleum contaminated soil near an oil tank. Four of 15 strains decreased surface tension of culture broth of phenanthrene-containing minimal media. H6, one of the isolated bacteria decreased surface tension of culture broth below 33 dyne/cm during growth on glucose. H6 was identified as Bacillus subtilis and biosurfactant produced by H6 was lipopeptide. The biosurfactant was produced at 0.13 g/L in the mineral medium containing 2% glucose. Critical micelle concentration(CMC) of the biosurfactant was 52 mg/L. Foaming power was similar to Tween 80 and dispersing power was superior to Tween 80m SDS and Brij30. High thermal stability and emulsion index were also observed.
To evaluate the effects of microorganism agents on oil biodegradation, treatability and microcosm studies were conducted. Petroleum oil degrading bacteria were isolated from enriched cultures of oil-contaminated sediment samples using a mineral salts medium (MSM) containing 0.5% Arabian heavy crude oil as the sole carbon source. After a 5 day-incubation period using MSM, mixed microorganisms of three species (strains BS1, BS2 and BS4) degraded 48.4% of aliphatic hydrocarbons and 30.5% of aromatic hydrocarbons. Treatability and microcosm tests were performed in the three different treatment conditions (AO: Arabian heavy crude oil, AO+IN: Arabian heavy crude oil+inorganic nutrient, AO+IN+MM: Arabian heavy crude oil+inorganic nutrient+mixed microorganism agents). Among these, significantly enhanced biodegradation of aliphatic hydrocarbons were observed in AO+IN and AO+IN+MM conditions, without showing any different biodegradation rates in either condition. However, the degradation rates of aromatic hydrocarbons in an AO+IN+MM condition were increased by 50% in the treatability test and by 13% in the microcosm test compared to those in an AO+IN condition. Taken together, it can be concluded that mixed microorganism agents enhance the biodegradation of aliphatic and aromatic hydrocarbons in laboratory, a treatability test, and a microcosm test. This agent could especially be a useful tool in the application of bioremediation for removal of aromatic hydrocarbons.
To produce polyhydroxyalkanoate (PHA) from inexpensive substrates by bacteria, vegetable-oil-degrading bacteria were isolated from a rice field using enrichment cultivation. The isolated Pseudomonas sp. strain DR2 showed clear orange or red spots of accumulated PHA granules when grown on phosphate and nitrogen limited medium containing vegetable oil as the sole carbon source and stained with Nile blue A. Up to 37.34% (w/w) of intracellular PHA was produced from corn oil, which consisted of three major 3-hydroxyalkanoates; octanoic (C8:0, 37.75% of the total 3-hydroxyalkanoate content of PHA), decanoic (C10:0, 36.74%), and dodecanoic (C12:0, 11.36%). Pseudomonas sp. strain DR2 accumulated up to 23.52% (w/w) of $PHA_{MCL}$ from waste vegetable oil. The proportion of 3-hydroxyalkanoate of the waste vegetable-oil-derived PHA [hexanoic (5.86%), octanoic (45.67%), decanoic (34.88%), tetradecanoic (8.35%), and hexadecanoic (5.24%)] showed a composition ratio different from that of the corn-oil-derived PHA. Strain DR2 used three major fatty acids in the same ratio, and linoleic acid was the major source of PHA production. Interestingly, the production of PHA in Pseudomonas sp. strain DR2 could not occur in either acetate- or butyrate-amended media. Pseudomonas sp. strain DR2 accumulated a greater amount of PHA than other well-studied strains (Chromobacterium violaceum and Ralstonia eutropha H16) when grown on vegetable oil. The data showed that Pseudomonas sp. strain DR2 was capable of producing PHA from waste vegetable oil.
This study pointed at isolation of bunker-C oil degrading bacteria and then estimation of it's degrading capability in environmental conditions. Degradation ratio of the excellent isolate was appeared to 40.5% and 44.7% when the oil was treated to 1% and 5%, respectively. The isolate was identified to Acinetobater calcoaceticus SEBCM. In pH test, high degrading effect was appeared to about 73% at pH 6 and pH 7, and low degrading ratio was 37% at pH 4. Its growth condition at temperature has not large variation in $15^{\circ}C\;{\sim}30^{\circ}C$, Quantity of nitrogen for it's good growth was ranged of $0.5\;g/L{\sim}2\;g/L$. As these results, we realized that this isolate have good activity when treated to $15\;{\sim}30^{\circ}C$ of temperature and $6{\sim}7$ of pH.
Journal of Korean Society of Environmental Engineers
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v.22
no.10
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pp.1851-1859
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2000
Crude oil-degrading bacteria were isolated from the sites contaminated by oil products. The isolates were identified as Acinetobacter sp. A132, Pseudomonas putida A422, Pseudomonas aeruginosa F721, F722, and Xanthomonas maltophilia B823. The results of investigation on the degradability of crude oil indicated that the strain A132 had the highest rate of $6.04g/L{\cdot}day$. Also, the strain A132 and F722 almost degraded each of n-alkane compounds between $nC_{10}$ and $nC_{32}$. The strain A422 degraded benzene and xylene but not n-alkane. The strain B823 grew somewhat in crude oil but did not entirely degrade other substrates used in this study. The results of the GC/FID analysis on the degradability of the mixed n-alkane compounds showed that the strain F722 could degrade 100% of the compounds with $nC_7{\sim}nC_{10}$ and more than 80% of those with $nC_{11}{\sim}nC_{24}$.
Biodegradation of fat, oil, and grease (FOGs) plays an Important role in wastewater management and water pollution control. However, many industrial food-processing and food restaurants generate FOG-containing waste waters for which there Is no acceptable technology for their pretreatment. To solve these problems, this study evaluated the feasibility of effective FOG-degrading microorganisms on the biodegradation of olive oil and FOG-containing wastewater. Twenty-two strains capable of degrading FOGs were isolated from five FOG-contaminated sites for the evaluation of their FOG degradation capabilities. Among twenty-two strains tested, the lipase-producing Pseudomonas sp. strain D2D3 was selected for actual FOG wastewater treatment. Its biodegradability was performed at 3$0^{\circ}C$ and pH 8. The extent of FOG removal efficiency was varied for each FOG tested, being the highest for olive oil and animal fat (94.5% and 94.4%), and the lowest for safflower oil (62%). The addition of organic nitrogen sources such as yeast extract, soytone, and peptone enhanced the removal efficiency of FOGs, but the addition of the inorganic nitrogen nutrients such as $NH_4$Cl and $(NH_4)_2SO_4$ did not increase. The $KH_2PO_4$ sources in 0.25% to 0.5% concentrations showed more than 90% degradability. As a result, the main pathway for the oxidation of fatty acids results in the removal of two carbon atoms as acetyl-CoA with each reaction sequence: $\beta$-oxidation. Its lipase activity showed 38.5 U/g DCW using the optimal media after 9 h. Real wastewater and FOGs were used for determining the removal efficiency by using Pseudomonas sp. strain D2D3 bioadditive. The degradation by Pseudomonas sp. strain D2D3 was 41% higher than that of the naturally occurring bacteria. This result indicated that the use of isolated Pseudomonas sp. strain D2D3 in a bioaugmentating grease trap or other processes might possibly be sufficient to acclimate biological processes for degrading FOGs.
CHOI, SUNG-CHAN;KAE KYOUNG KWON;JAE HAK SOHN;SANG-JIN KIM
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.12
no.3
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pp.431-436
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2002
Effects of fertilizer additions for oil degradation were examined in sand seashore mesocosms. Within 37 days, up to $85\%$ removal was achieved by the addition of slow-release type fertilizer (SRF) with the initial degradation rate of 423.3 mg oil $(kg sand)^-1\;day^-1$. The removal was mostly of biological origin based on the changes of $C_17$ /pristane and $C_18$/phytane ratios from 2.60 to 0.81 and from 3.55 to 1.29, respectively. The addition of oleophilic fertilizer (Inipol EAP22) was less effective and resulted in the removal of $64\%$ of the added oil ($3\%$, v/v) with a lower initial degradation rate. Petroleum-degrading bacteria had achieved a value of $1{\times}10^8$ CFU $(g sand)^-1$ at Day 3 and this peak exactly coincided with the initial degradation in the SRF-treated mesocosm. In this mesocosm, surface tension values were decreased drastically during Days 3 and 8, suggesting that microbially-produced surface-active agents actively enhanced the oil degradation rate and cell proliferation. Although the Inipol-treated mesocosm appeared to show significantly enhanced oil degradation compared to that of the untreated control mesocosm, Inipol was found to be less effective than SRF in enhancing a true oil-degrader when compared under similar experimental conditions.
Microorganisms utilizing petroleum as substrate were screened from the seawater in Pusan coastal area. Among them, fifty strains utilized bunker-A oil as a sole carbon and energy source. Five of these fifty strains were selected to experiment this study. According to the taxonomic characteristics of its morphological, cultural and biochemical properties, the selected stains were named Pseudomonas sp. EL-12, Flavobacterium sp. EL-15, Acinetobacter sp. EL-18, Enterobacter sp. EL-27 and Micrococcus sp. EL-43, respectively. The optimal medium compositions and cultural conditions for assimilation of bunker-A oil by the selected strains were 1.5-2% bunker-A oil, 0.1% $NH_4NO_3$, 1-1.5% $MgSO_4$.$7H_2O$, 0.05-0.15% KCl, 0.1-0.15% $CaCl_2$.$2H_2O$, 2.5-3.5% NaCl, initial pH 8-9, temperature 3$0^{\circ}C$ and aeration, respectively. The utilization and degradation characteristics on the various hydrocarbons by the selected stains were showed that bunker oil, n-alkane and branched alkane compounds were highly activity than cyclic alkane and aromatic hydrocarbon compounds.
Biosurfactant-producing bacteria, showing strong crude oil degrading activity, were isolated from the caverns of National Oil Storage Basement. From the results of biochemical and molecular biological tests, the isolate was identified as Pseudomonas fluorescens PD101. It grows well on liquid media at temperature range from $20^{\circ}C\;to\;37^{\circ}C,$ but it does not produce biosurfactant when grown at $37^{\circ}C$ or at higher temperature. The biosurfactant was stable at broad pH range from 5 to 11 and under heat treatment condition of $100^{\circ}C$ for 30 min. The biosurfactant produced dark blue halo around the colony when grown on SW agar plates, which could confirm the biosurfactant as one of rhamnolipid group. The 700 bp of PCR product could be amplified from DNA of P. flurorescens PD101 by using PCR primers designed from rh1A gene of P. aeruginosa, and it showed $99\%$ of sequence homology with rh1A gene of P. aeruginosa encoding rhamnosyltransferase 1.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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