Nonactin, as a radical-producing antibiotic, was isolated from the cultural broth of the strain JM-4151. This strain was identified as Streptomyces viridochromogenes and designated S. viridochromogenes JM-4151. The antibacterial activity of nonactin against Bacillus subtilis was antagonized by the activity opf quercetin, an oxygen radical scavenger. This result suggests that oxygen radical formation might be the cause for the antibacterial activity of nonactin.
Nonactin is the parent compound of a group of ionophore antibiotics, that known as the macrotetrolides. In previous report, in th course of screening superoxide radical-generating compounds from microbial sources, we first screened Streptomyces viridochromogenes JM-4151 that produces nonactin. It was proved that nonactin is superoxide radical-producing compound. In present study, we examined the optimal culture conditions of nonacin. Th optimal culture conditions for nonactin production were as follows: 1% soluble starch, 1% yeast extract, 0.2% ammonium nitrate, 0.06% magnesium sulfate, 0.2% calcium carbonate, initial pH 7.0 at 28$^{\circ}C$ for 96 h. The highest nonactin production was achieved in the production medium of initial pH7.0 at 28$^{\circ}C$ for 96h. The threshold level of dissolved oxygen was found to be above 33.2% at 28$^{\circ}C$ when 1% soluble starch was used as a carbon source. These results suggest that S. viridochromogenes JM-4151 might be a possible strain for industrial nonactin producer.
Nonactin, known as an ionophore antibiotic, was antagonized by the actibity of quercetin, an oxygen radical scavenger. This compound generated superoxide radicals in Bacillus subtilis lysates. A recombination-deficient mutant strain of B. subtilis was more sensitive than a wild strain, and this hypersensitivity was reduced in the presence of dithiothreitol as an antioxidant. These results suggest that superoxide radical is important in the antibacterial action of this agent.
Nonactin을 이온 운반물질(ionophore)로, poly(vinyl chloride) (PVC) 또는 polyurethane (PU)을 지지체로, 그리고 bis(2-ethylhexyl)adipate을 가소제로 사용하여 제작한 암모늄이온 선택성전극의 성능을 비교한다. PU-전극의 검출한계를 PVC전극에 비해 더 낮게 제작할 수 있는 것을 제외하고는 PVC전극이 PU전극에 비하여 그 성능이 우수하였으며 이를 설명하기 위하여 AFM 형상과 임피던스 측정 등을 하였다. PU-전극이 PVC에 비하여 이온 이동에 대한 저항이 더 큰 것으로 보아 더 단단한 막을 형성하여 더 낮은 검출 한계를 가지며 수명이 긴 전극으로 발전시킬 수 있을 것으로 보인다.
Nonactin을 이온운반체로 사용한 암모늄선택성 전극막 위에 urease를 고정시킨 형태의 요소센서는 혈액 중 여러가지 이온으로부터 방해작용을 받을 수 있다. 이 방해작용은고정화된 효소반응보다는 암모늄선택성 전극막 자체의 부적합한 선택성의 기인한 것이며 본 연구에서는 혈액 중의 요소를 측정할 경우 이들 방해이온에 의해 발생된 오차를 보정하고자 하였다. 이를 위해 혈액 속에 각 방해이온의 정상 평균농도를 포함하고 있는 용액을 검정용액으로 사용하여 이들 방해이온으로부터의 오차를 감소시키고자 하였다. 또한 칼륨이온선택성 전극을 부가적으로 사용하여 요소전극의 측정치를 보정하여 오차를 최소화하고자 하였다. 이와 같은 방법들에 의해 보정된 측정치의 오차는 보정하지 않았을 경우에 비해 현저히 감소함을 알 수 있었다.
The ammonium ion-selective electrodes ($NH^+_4$-ISEs) based on the tetrahydrofuran(THF)-containing-16-crown-4 derivatives,1,4,6,9,11,14,16,19-tetraoxocycloeicosane ($L^1$) and 5,10,15,20,-tetramethyl-1,4,6,9,11,14,16,19-tetraoxocycloeicosane ($L^2$), were prepared and the electrode characteristics were tested. The conditioned $NH_4^+$-ISEs (E1) based on $L^1$ with TEHP as a plasticising solvent mediator gave best results with near-Nernstian slope of 53.9 mV/decade of activity, detection limit of $10^{-4.9}$ M, and enhanced selectivity coefficients for the $NH^+_4$ ion with respect to an interfering $K^+$ ion (log $K^{pot}_{NH_4^+,K^+}$ = -1.84). This result was compared to other ammonium ionophores reported previously, for example, that of nonactin (log $K^{pot}_{NH_4^+,K^+}$ = -0.92). The proposed electrode showed no significant potential changes in the range of 3.0 < pH < 9.0.
L-Glutamate를 간편하고 단시간에 측정할 수 있는 glutamate sensor를 개발하기 위하여, glutamate oxidase를 여러 가지 membranes에 고정화 시키는데 적합한 조건과. 그 결과로 얻은 효소 membranes의 특성, 개발한 glutamate sensor의 반응특성 및 glutamate sensor의 정확성을 조사하였다. Glutamate oxidase를 membranes에 고정화 하는데 GA 0.25%, BSA 0.3 mg, 효소 사용량 2.0 units이상이 적당하였다. 고정화 효소의 최적 pH는 6.5이었고, chitosan membrane을 사상한 경우 가장 효소활성이 높았다. 그러나 저장 안정성이나 반응시간 등을 고려하여 preactivated nylon에 고정화시킨 효소 membrane을 glutamate sensor 개발에 사용하였다. Glutamate oxidase를 선택한 membrane에 고정화시켜 효소와 glutamate의 반응산물인 암모니아가 nonactin membrane을 이용한 암모니움이온 전극에 의하여 측정되도록 효소 sensor를 구성하였으며, sensor의 반응시간은 약 2분이었다. Preactivated membrane에 고정화된 효소는 $4^{circ}C$에서 2개월간 저장중 안정한 활성을 보였으며, 이를 사용한 glutamate sensor로 약 250회 측정할 때 까지 활성에 별 변화가 없었다, 개발된 glutamate sensor의 glutamate 측정 농도범위는 $0.1{\sim}5\;mM$ 이었다. Glutamate sensor를 체더 치즈중의 L-glutamate 측정에 응용한 결과는 HPLC로 분석한 결과와 높은 상관관계가 있어, 정확성이 인정되었다.
Four compounds, including two novel macrolides, were isolated from an endophyte Streptomyces sp. Is9131 of Maytenus hookeri. Spectral data indicated that these compounds were dimeric dinactin (1), dimeric nonactin (2), cyclo-homononactic acid (3), and cyclo-nonactic acid (4). Bioassay results showed that dimeric dinactin had strong antineoplastic activity and antibacterial activity.
Kim, Hong-Seok;Do, Kyung-Soon;Kim, Ki-Soo;Shim, Jun-Ho;Cha, Geun-Sig;Nam, Hak-Hyun
Bulletin of the Korean Chemical Society
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제25권10호
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pp.1465-1470
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2004
A short and efficient synthesis, solvent extraction and potentiometric measurements of new thiazole-containing naphtho-crown ethers are reported. The naphthalene moiety enhances the ammonium ion selectivity over potassium ion. The selectivity of ${NH_4}^+/K^+$ follows the trend $3\;{\approx}\;2\;>\;1$, indicating that the differences in conformational changes of 2 and 3 in forming ammonium complexes affect little on the resulting ammonium/potassium extraction selectivity ratio. The ammonium ion-selective electrodes were prepared with noctylphenyl ether plasticized poly(vinyl chloride) membranes containing 1-4 the effect of one naphthalene unit introduced on either right (2) or left (3) side of thiazolo-crown ether on their potentiometric properties (e.g., ammonium ion selectivity over other cations, response slopes, and detection limits) were not apparent. However, the ammonium ion selectivity of 1, 2 and 3 over other alkali metal and alkaline earth metal cations is 10-100 times higher than that of nonactin.
새로운 효소반응기를 쓰는 요소 정량용 연속${\cdot}$자동화 장치의 감응성질을 조사하였다. 효소반응기는 지지체인 nylon-6입자(42∼48 mesh)를 teflon관(안지름 2mm, 길이 20cm)에 충전시키고, 이 지지체의 표면에 공유결합제인 glutaraldehyde로 urease를 고정화시켜서 제작하였다. 연속${\cdot}$자동화장치는 효소반응기, 기체투석기 및 지시전극인 관형 PVC-nonactin막 암모늄 이온 선택성 전극을 차례로 연결하여 만들었다. 이 장치를 써서 요소를 정량할 때 감응특성은 다음과 같다. 곧 직선감응 농도범위는 $5.5{\times}10^{-6}$~$2.4{\times}10^{-3}M$, 감응기울기는 57.8 mV/decade, 검출한계는 $1.5{\times}10^{-6}M$, 효소반응기의 전환백분율은 80.8%이었다. 효소반응기의 최적 완충용액은 0.01M Tris-HCl 완충용액(pH 7.0∼7.8)과 0.01M 인산염 완충용액(pH 6.9∼7.5)이었고, 수명은 150일 정도였다. 또한 다른 생리활성물질의 방해는 없었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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