Small-seeded legumes can be cultured enclosed in slant agar tubes if dlese plants are to he used for authenicaiing rhizobia or for enumerating 1-hizobia by the plant-inlection technique. An improved method has been developed with substiluting agar slant lor Korean paper(Har7ji). This method was panicularly useful for legumes with rigid radicle such as Cn.xsin 1mnmame. With this method Bmr!,~li1rzobin,17 sp. stram CN9135 on C nonmne induced root nodules biginning at day 7 of the nodulation period in 6% of the l ~ l a ~ l s , and all of ihe plants nodulated 14 days after inoculation by strain CN9135.
Transposon Tn5 was used to induce random insertional mutations in Bradyrhizobium japonicum, a soybean endosymbiont. By genomic Southern blot analysis, transposition events were found to have occurred randomly throughout the B. japonicum genome. After screening 3, 626 mutants by auxotrophy test, a histidine auxotroph was isolated. Upon plant infection test, the His mutant showed a 3~4 day delay in nodule formation.
Five strains of the fast-growing endosymbionts were isolated from the nodules of Lotus eorniculatus var. japonicus inhabited in Taejeon. From morphological and physiOlogical characteristics and nodulation test, the isolated strains were identified as Rhizobium loti. Compared to the control plant, both Lotus cornieulatus var. japonieus and Lotus corniculatus seedlings inoculated with the isolated strains. grew normally due to effective root nodule. The reisolated endosymbiont from the induced root nodule was confirmed identical to those of the first isolates by investigating antibiotic resistance and morphological characteristics. Three strains among the isolates. R. loti TUS I. TUS5 and TUS6 produced a ca1cof1uorbinding exopolysaccharide.
The inoculation effect of the highly nitrogen fixing strains of R. japonicum were tested in the 3 kinds of soil with different cultural history onto Gycine max cv. Jang-yeob. The nodulation and nitrogen fixation activity in 3 test soils all showed the great increase in inoculated group compared to the non-inoculated group. The plant dry weight of the in-oculated groups were increased about 10% than that of the non-inoculated groups. The numerical index of the increase in total nitrogen fixation activity were 238% in the pre-cultivated, 266% in the immatured and 157% in the matured soil and these results suggested the clear effect of inoculation. Among the strains tested, R. japonicum R214 and Rl38 showed the excellent inoculation effect.
Kim, Moo-Key;Park, Kun-Ho;So, Jae-Don;Choi, Dae-Ung
Korean Journal of Soil Science and Fertilizer
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v.25
no.1
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pp.89-98
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1992
Glasshouse experiments were conducted to evaluate nodulation, and $N_2$ fixation of 73 strains of Bradyrhizobia isolated from nodules of groundnuts and/or cowpeas grown at various location in Korea and 31 strains of cowpea Bradyrhizobia obtained from overseas sources. Of the strains tested 51.9%, 26.4%, and 21.7% were rated fully effective, partially effective, and ineffective, respectively. Eight very effective strains were selected. Nodulation, shoot dry mass, whole plant dry mass, and plant total N content were significantly correlated with each other. The highly significant correlation of total N content and plant dry mass ($r=0.98^{**}$) indicates that plant dry mass can be used as a measure of strain effectiveness in preliminary test.
Fifteen Rhizobium spp. from nodules of 6 common pulses collected from 6 districts of Assam were studied for their infectivity, intrinsic antibiotic resistance, nitrogenase activity and effect of dual inoculation with two native Arbuscular Mycorrhizal Fungi viz. Glomus mosseae(GM) and Gigaspora gilmarie(GG). Out of the 15 isolates 9 were found nodulation positive and 6 of them(AR1, BR8, BR12, AR10, UR10 & GR21) were subjected to intrinsic antibiotic sensitivity test of which AR1 showed resistance against all the 9 test antibiotics. Isolates AR1 and GR21 showed the highest(4.25 mole, $gm^{-1}hour^{-1}$) and the lowest(1.05 mole, $gm^{-1}hour^{-1}$) nitrogenase activity respectively. In Most Probable Number count, the maximum Rhizobium population $5.8{\times}10^5$, was found in both Blackgram and Greengram variety of pulses. The maximum dry weight of nodules(3.14 g), dry weight of shoot(10.08 g), nitrogen content(7.68 mg, $plant^{-1}$), chlorophyll content(1.89 mg, $g^{-1}$), phosphorus content of shoot(6.17 mg, $g^{-1}$) and yield(535.67 kg, $Ha^{-1}$) were found when AR1 dually inoculated with GM in Blackgram.
Experiments were carried out to elucidate the specific interactions between host plant, Phaseolus vulgaris, and symbiotic bacteria, Rhizobium Phaseoli. Purified P. vulgaris lectins and six species of cultured Rhizobium were subjected to agglutination test. Lectins from bean and R. phaseoli showed relatively high agglutination activity indicating that host plant lectins recognize carbohydrate moieties on the compatible Rhizobium cell surface. The specific carbohydrate receptors for binding of the lectins on the cell surface of R. phaseoli were found as mannose and galactose. The minimum concentration of sugars for the inhibition was 6.25mM. The lectin content of cultured plant roots was measured after germination and was maximum in 5-day seedlings. The nodulation was competitively inhibited by lectins for the plants cultured with Rhizobium cells. By immunochemical studies, there was some relationship in antigenic determinants between R. phaseoli and R. japonicum but no relationships were observed with other Rhizobium species. The results suggest that the infection by rhizobia to the roots of leguminous plants may be caused by the specific interaction of lectins with rhizobia.
Symbiotic effectiveness and significance of Bradyrhizobium japonicum strains in five serogroups which were consisted of three corresponding serotype strains, respectively, indigenous to Korean soils were evaluated in terms of utility of strain serogroup for symbiotic improvement on soybean plant. The nodulation by rhizobia of each serogroup on four soybean cultivars(Danweonkong, Kwangkyo, Pangsakong, and Eunhakong) was good in order of USDA 123 > YCK 150 > YCK 117 > YCK 141 > USDA 110 serogroup members. Shoot dry weight of soybean was relatively high with USDA 110 serogroup members as well as with YCK 141 serogroup members, whereas the effectiveness of USDA 123 serogroup members was the lowest among the serogroups examined. In particular, Pangsakong among soybeans inoculated with five-serogroup members was positively outstanding on nodulation and shoot dry weight of the plant. Overall, symbiotic parameters of serogroup members associated with soybean plant such as nodule number, nodule mass, $N_2$ase activity, and shoot dry weight showed significantly different responses at level of 1% probability among both rhizobial serogroups and soybean cultivars, respectively. The rate in symbiotic similarity of the members of each serogroup from F-test ($$P{\leq_-}0.05$$) was 100% for nodule No., 90% for $N_2$ase activity. and 80% for soybean shoot dry weight. Taken together, the results indicated that the serological grouping of B. japonicum could be strongly useful for improving the symbiotic effectiveness hetween soybean and Rhizobium.
A series of experiments was planned for practical application of rhizobia in grass lands in Korea. This is the report for the studies mainly on the isolation and characterization of alfalfa nodule bacteria, and on the assessment of their nodulation abilities and nitrogen fixation capacities. 1. Total number of 47 strains was isolated from nodules which were taken from alfalfa grown in Daekwanyong, Cheju and other places. 2. Morphological and cultural characteristics of the strains were studied, and attempts. were also made to investigate their antigenic properties and to demonstrate lysogenic strains. The results were; i) the isolates varied in their cultural characteristics on yeast mannitol broth and agar, and in degree of congo red absorption; ii) similarities in their antigenic prorerties were found between the strains: SU 47/M-11, M-13/M-15, and M-3/M-5; iii) no lysogeny was found in the strains. 3. Plant infection test by test tube method in light room were carried out to elucidate the ability of the strains to nodulate Luna alfalfa and of the capacity of such nodules to fix atmospheric nitrogen. The isolates were grouped info non-invasive, ineffective, or effective to the legumes. Those strains which produced effective nodules, supporting similar/higher level of growth as nitrate control were: M-8, 9, 14, 20, 21, 25 and 34.
A series of experiments over three years was planned for practical application of rhizobia in farms and grass lands in Korea. This is the report for the studies of the first year mainly on the isolation and characterization of rhizobial strains, and on the assessment of their nodulation abilities and nitrogen fixation capacities. 1. Total number of 88 strains for soybean group and 22 st ra ins for pea and vetch group was isolated from nodules which were taken from legumes grown in Daekwanyong, Cheju and various places in Korea. 2. Morphological and cultural characteristics of the strains were studied, and attempts were also made to investigate their antigenic properties and to demonstrate lysogenic strains in these groups. The results were : i) the isolates varied in cultural characteristics on yeast mannitol broth and agar, and in degree of congo reel absorption ; ii) similarities in their antigenic properties were found between/among the strains: G-3/G-9/D216, G-20/G-52 in soybean group; iii) no lysogeny was found in the strains of these groups. 3. Plant infection tests by test tube and bottle method in light room were carried out to elucidate the ability of the strains to nodulate specific legumes and of the capacity of such nodules to fix atmospheric nitrogen. The isolates were grouped into non- invasive, ineffective, or effective to the legumes. Those strains which produced effective nodules, supporting similar level of growth as nitrate control, were: P-3, 4 and 8 in pea and vetch group; G-23, 27, and, D-216 in soybean group.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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