Morinda citrifolia adventitious roots were cultured in shake flasks using Murashige and Skoog medium with different types and concentrations of auxin and cytokinin. Root (fresh weight and dry weight) accumulation was enhanced at 5 $mg\;l^{-1}$ indole butyric acid (IBA) and at 7 and 9 $mg\;l^{-1}$ naphthalene acetic acid (NAA). On the other hand, 9 $mg\;l^{-1}$ NAA decreased the anthraquinone, phenolic and flavonoid contents more severely than 9 $mg\;l^{-1}$ IBA. When adventitious roots were treated with kinetin (0.1, 0.3 and 0.5 $mg\;l^{-1}$) and thidiazuron (TDZ; 0.1, 0.3 and 0.5 $mg\;l^{-1}$) in combination with 5 $mg\;l^{-1}$ IBA, fresh weight and dry weight decreased but secondary metabolite content increased. The secondary metabolite content (including 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl activity) increased more in TDZ-treated than in kinetin-treated roots. Antioxidative enzymes such as catalase (CAT) and guaiacol peroxidase (G-POD), which play important roles in plant defense, also increased. A strong decrease in ascorbate peroxidase activity resulted in a high accumulation of hydrogen peroxide. This indicates that adventitious roots can grow under stress conditions with induced CAT and G-POD activities and higher accumulations of secondary metabolites. These results suggest that 5 $mg\;l^{-1}$ IBA supplementation is useful for growth and secondary metabolite production in adventitious roots of M. citrifolia.
In order to determine the effects of cytokinin and auxin on organ formation from tissue of garlic cloves, leaf blades and basal tissues contained meristem of garlic (Allium sativum L.) cloves harvested in 1979 (old cloves) and 1980 (new cloves) were explanted on a MS medium contained various levels of BA ($N^6$-benzyl amino purine), NAA (naphthalene acetic acid), and 2, 4-D (2, 4-dichlorophenoxyacetic acid). And some of the new cloves were explanted on a media contained BA and NAA after chilling treatment at $4^{\circ}C$ for 10, 20, 30 and 40 days. 1. In a culture of leaf blades of old cloves, shoots were differentiated on a medium supplemented with 2mg/l of BA and NAA. 2. Callus was grown as a quite straw-coloured globular mass on a medium contained 0.2 or 2mg/l 2.4-D. 3. As subcultures of globular calli, shoots and roots were differentiated on a medium contained 2mg/l BA and 0.5 or 1 mg/l NAA, whereas no shoots was shown on a conterol. 4. Shoots were differentiated in a culture of leaf blades of new cloves, but they were not in an old cloves in control, and better effect was shown on a medium contained 2mg/l BA and 1mg/l NAA. However shoots were no differentiated from leaf blades chilled at $4^{\circ}C$ for 30 or 40 days at the same condition. 5. Large numbers of adventitious shoots could be obtained from basal region of garlic cultured on a medium contained 1mg/l BA and 4mg/l NAA, or 2mg/l BA and 2mg/l NAA.
Protocols for in vitro conservation was developed for Coleus forskohlii. Plants maintained both in field served as explant source. Shoot tips and single node cuttings were used to optimize protocols for in vitro multiplication. MS basal medium supplemented with $0.54\;{\mu}M$ naphthalene acetic acid (NAA) and $8.87\;{\mu}M$ benzy-ladenine (BA) induced multiple shoots in shoot tips and nodes. Shoot multiplication was amplified with a gradual decrease of BA concentration, leading to its final omission after 4 months. Concomitant rooting on multiplication media enabled successful establishment extra vitrum. For in vitro conservation studies, experiments were carried out with 2-3 week maintained in vitro plants under standard and reduced culture conditions (SCC, RCC). In vitro plants could be successfully conserved in full strength MS medium (FMS) under SCC for 6 months without subculture with full potential to regenerate, producing viable shoots and nodes. The root production remained unaffected due to conservation, showing high rooting activity in mannitol and low temperature treatments. Preset low temperature (15 and $10^{\circ}C$) and reduction in media constituents does not appear to favour conservation, although the former accomplished conservation levels equal to (FMS) under SCC.
Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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2022.09a
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pp.62-62
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2022
Freesia has been an important worldwide cut flower because of its fragrance, long vase life and the wide color range of the flower. The conventional propagation methods by seeds and corms have many disadvantages such as shorter inflorescences with fewer numbers of florets, a reduction in cut flower quality and the accumulation of plant viruses in corms by successive cultivation. Therefore, the conventional propagation systems in Freesia needs to be replaced with tissue cultures to overcome the disadvantages. This study explored an efficient multiplication protocol using the combination of plant growth regulators (PGRs) for developed cultivar 'Sunny Gold'. The combination between 6-benzylaminopurin (BA) and α-naphthalene acetic acid (NAA) did not produce new shoots but developed enlarged roots. BA only treatments and the combination between BA and kinetin treatments were effective on shoot multiplication. The highest average number of shoots was 5.3 in the presence of 3 mg/L BA and 0.5 mg/L kinetin. To produce corms and cormlets, proliferated shoots were subcultured on 1/2 Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with 90 g/L sucrose, 1 g/L charcoal and 7 g/L plant agar and placed at 4℃ in the dark for 6 months. The small size of corms and comlets were produced. The average number of regenerated comlets was 2.75 per shoot. The results showed that shoot multiplication is more efficient than cormlet regeneration for in vitro freesia proliferation.
These experiments were carried out to define the rest period of mulberry by treating growth regulators in Taegu, Korea. Results obtained were as follows: It was recognized that the depth of rest in Taegu, Korea, was not deeper than that in Tokyo and Kagoshima, Japan. The rest of mulberry was begun at the end of September, subsequently became deeper through the first October into the late October and then turned gradually into quiescence by the beginning of November. Buds sprayed by gibberellic acid ($GA_3$) 10ppm and urea 0.5% were promoted to sprout, while naphthalene acetic acid (NAA) 0.02% inhibited strongly bud sprouting and abscisic acid (ABA) 20ppm had no effect on the rest of mulberry. Gibberellic acid 10ppm enhanced the rate of green color of bud after incubation for 10 days at $30^{\circ}C$. By the portion of mulberry stems, the depth of rest was different that the middle buds were less dormant than those lower. The optimal time required for the mulberry winter bud break is 15 days incubation at $30^{\circ}C$ as treated with $GA_3$.
The establishment of cell suspension culture and plant regeneration of the halophytic Leymus chinensis (Trin.) are described in this study for the first time. Callus induction solid medium containing Murashige and Shoog (MS) basic salt, $2.0\;mg\;l^{-1}$ 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D), and $5.0\;mg\;l^{-1}$ L-glutamic acid with $30.0\;g\;l^{-1}$ sucrose and $4.0\;g\;l^{-1}$ gelrite for solidification induced the highest rate of cell division in Type 1 callus among calli of various types. Liquid medium with the same hormone distribution was therefore, used for cell suspension culture from Type 1 callus. Over a 30 d suspension culture at 100 rpm, great amounts of biomass were accumulated, with 71.07% average daily increment and 22.32-fold total fresh weight increment. Comparison of before and after suspension culture, the distribution of different size callus pieces and the maintenance of callus type were basically unaltered, but a slight increase in relative water contents was observed. To induce the potential of plant regeneration, the directly transferring on plant regeneration solid medium containing MS basic salt, $0.2\;mg\;l^{-1}$$\alpha$-naphthalene acetic acid (NAA), $2.0\;mg\;l^{-1}$ kinetin (Kn), and $2.0\;g\;l^{-1}$ casamino acid and indirectly transferring were simultaneously performed. Even now growth rates of suspension-derived callus on solid medium were approximately half of those of Type 1 callus, but faster somatic embryogenesis was observed. Rooting of all regenerated shoots was successfully performed on half-strength MS medium. All plants appeared phenotypically normal.
Plant regeneration protocols for adventitious shoot organogenesis from apple (Malus domestica 'Fuji') leaf explants were developed in the present study. The effects of different basal media, types and concentrations of carbon sources, and concentrations of plant growth regulators were evaluated to determine the optimal shoot regeneration conditions for 'Fuji' apple leaf explants. On different treatments involving combinations of basal media, LS and N6 media, and different types and concentrations of cytokinins, 6-benzyl-adenine (BA) and thidiazuron (TDZ), shoot regeneration rates were the highest in the N6 medium combined with BA. Among the plant growth regulator and carbon source combination treatments, 5.0 mg/L BA, and 0.1 mg/L α-naphthalene acetic acid (NAA) with 40 g/L sorbitol was the optimal combination for shoot regeneration. In addition, the optimal sorbitol concentrations for shoot regeneration were 40 g/L and 60 g/L. The highest regeneration (81.8%) was achieved using 40 g/L sorbitol. The regenerated shoots elongated and rooted on rooting medium, consisting of 1/4 MS medium with 0.2 mg/L indole-3-butyric acid (IBA). The plantlets were acclimatized and the regenerated plants exhibited normal phenotypes.
This study was conducted to establish the optimal condition for in vitro propagation of wild Cynanchum wilfordii. The highest in vitro seed germination rate of 91.6% was obtained from the seed treated with gibberellic acid ($GA_{3}$) (100 ppm) for 24 hours followed by cultured on Woody Plant Medium (WPM) media supplemented with 1.0 mg/L 6-benzyl adenine (BA). The best shoot height obtained (5.2 cm) in medium with 1.0 mg/L $GA_{3}$, but the plants was grown abnormally and eventually died. The highest number (2.4) was shown when shoot were in cultured on the media including 0.1 mg/L BA after 4 weeks. Root induction from shoot obtained in vitro culture was effective on ventilation and without plant growth regulators (PGRs) and root length was highly developed (2 cm) at 0.1 mg/L naphthalene acetic acid (NAA). The highest survival rate (70%) was when plantlet grew pre-ventilation of in vitro condition.
Presently, we report a simple, reproducible and high frequency plant regeneration in Hibiscus syriacus L. using axillary buds. H. syriacus was regenerated from axillary buds directly or through a callus phase. Regenerated shoots were directly induced from young and fresh axillary buds cultured on Murashige and Skoog medium (MS) supplemented with 0.01 mg/L of the growth regulator thidiazuron (TDZ) after 2 weeks of culture. Directly induced shoots were transferred to hormone-free MS medium and root development was observed after 6 weeks. On the other hand, old and stale axillary buds were regenerated to shoots via callus induction on MS medium containing 0.01–2 mg/L TDZ after 4 weeks. A TDZ concentration of 0.01 mg/L was most effective in callus formation. Green callus was transferred to MS medium containing 0.01 mg/L α-naphthalene acetic acid (NAA) and 0.5 mg/L benzylaminopurine (BA). After 4 weeks, callus had developed into multiple shoots. Plantlets were formed from 10 week cultures of single shoots on hormone-free MS medium. Regenerated plantlets were cultured on MS medium for one month and then transferred to pots containing garden soil. Potted plants were acclimatized for one month and grown to maturity under greenhouse conditions. The present study has shown that various concentrations of plant growth regulator can be effective for in vitro plant regeneration of H. syriacus. The direct and indirect regeneration protocol presented here will be useful for understanding the manipulation and propagation of H. syriacus.
This study was conducted to investigate the productivity of biomass and antioxidant compounds in Polygonum multiflorum by culturing explants in air-lift bioreactor containing Murashige and Skoog (MS) medium, by adding different concentrations of auxins [indole-3-butyric acid (IBA) and naphthalene acetic acid (NAA)], sucrose, methyl jasmonate (MeJA), and salicylic acid (SA). Results of this study revealed that the explants culturing on the medium supplemented with $9.84{\mu}M$ IBA and 50 g/L sucrose were observed to have higher productivity of biomass and bioactive compound than other treatments used. Thus, we expect that these results will be helpful for large-scale production of biomass and antioxidant compounds from Polygonum multiflorum.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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