Effects of media and its components on callus induction and plant regeneration were studied to increase the cultural efficiency in rice anther culture. The N$_{6}$ basic medium gave better results in callus induction than those of MS or Miller. The medium used for callus induction affects the plant regeneration. The frequency of plant regeneration from callus grown on Miller basic medium was lower than those of N$_{6}$ or MS. Most of calli derived from anthers, above 90%, were induced from 20 days to 40 days after anther inoculation. The cultural efficiency of modified N$_{6}$ basic medium which was composed of 31.5mM KNO$_3$ and 1.75mM(NH$_4$)$_2$SO$_4$ as nitrogen sources was higher than those of N$_{6}$ basic medium. Combination of NAA and Kinetin showed better results than that of 2, 4-D only in cultural efficiency. Effect of DL-alanine on callus induction in Indica variety, IR40, showed better response in the anthers pretreated for 6 days at 12$^{\circ}C$.
A series of experiments were carried out to know the effects of pollen stage, cold shock temperature and duration, and media for callus and green plant induction in rice anther culture. The results indicated that: (a) uninucleate stage of pollen was the most suitable stage for effective callus induction, (b) cold shock temperature of 8$^{\circ}C$ and 12$^{\circ}C$ was appeared to be proper temperature for callus induction, (c) callus induction rate was increased in the eight to 12 days long cold storage, (d) the medium N6 was better than that of N6D for callus induction, (e) green plant induction was better in both 4$^{\circ}C$ and 8$^{\circ}C$ than that of 12$^{\circ}C$ cold shock, (f) green plant frequency was higher in eight to 12 days long cold storage and (g) green plant frequency was doubled in the MS medium when compared with N6 medium.
The callus formation and shoot growth of germinating rice seedlings in the aseptic culture media treated with 2.4-D and N.A.A. were studied with 3 rice cultivars. Callus formation and shoot growth were the best in the media including $10^-4$M N.A.A.. Varietal differences also were significant in the formation of callus and shoot growth from the callus.
This experiment was conducted to know the effects of mutagen treatments on callus induction, plant regeneration and their ploidy in the anther culture of wheat. The winter wheat cultivars, 'apos;and 'apos;Wonkwang'apos;, were treated at the mid or late-uninucreate stage under 4 different doses (100, 200, 500 and 1,000 rad.) of X-ray and 3 different levels(0.1, 0.2 and 0.3 mole) of Ethyl Methane Sulphonate. The anthers treated were set on the C$\_$17/medium for callus induction, and callus induced was transfered to 1/2 MS medium for plant regeneration. The mutagen treatments inhibited the callus induction but increased the plant regeneration in the callus which were induced from the anther set on the medium for the long time of 60 to 80 days. Also, the chromosome number to the regenerated plant varied largely by increasing of haploid plants(n=3x=21) and by occurring of aneuploidy having n=20 and n=22 of chromosome number.aried largely by increasing of haploid plants(n=3x=21) and by occurring of aneuploidy having n=20 and n=22 of chromosome number.
The activities of auxins and cytokinins have been examined in the growth of callus tissue derived from Phaseolus vulgaris L. cv. Damyang. The synthetic auxin, picloram was the most effective in promoting callus growth and the range of effective concentrations (0.1$\mu{M}$ to 32$\mu{M}$) was broad. 2, 4-D also enhanced callus growth at the optimal concentration of 3.2$\mu{M}$. NAA promoted callus growth at relatively higher concentrations than other auxins tested. IAA was less effective in supporting callus growth. Cytokinin bearing saturated side chain ($N^6$-isopentyladenine) was approximately 30 times more active than the corresponding unsaturated compound, $N^6$-($\D^2$-isopentenyl) adenine. The abilities of cytokinin-autonomous growth were also examined. Callus tissues previously grown on concentrations lower and/or higher than optimal concentrations of cytokinins were better habituated in the subsequent passage. It was suggested that the development of cytokinin autonomy may be related to dosage-concentrations of cytokinin in the previous passage.
This study was carried out to investigate the effect of Germaniwn(Ge) treatment in the culture media on the Ge absorption by the callus induced from brown rice cv. Dongjinbyeo. MS medium was more effective on the growth ratio of callus and the content of Ge and some inorganic elements except K in callus than N$_{6}$ medium. The more Ge treatment in the N$_{6}$ or MS medium, the more Ge absorption by the callus, but the growth ratio of callus and the content of Ca, Mg, and K in callus were decreased. The content of Fe, Mn, Zn, and Cu was increased under treatment up to 100~200mg /$\ell$ Ge, but tended to be decreased under treatment more than that of Ge concentration. Under treatment less than 150mg /$\ell$ Ge, GeO$_2$(inorganic Ge) was more effective on the Ge absorption by callus than Ge-132(organic Ge), but Ge-132 was more effective on the Ge ab-sorption by callus and the activity of callus in case of treatment more than 150mg /$\ell$ Ge. The lower pH of culture medium, the higher Ge content in the callus. When callus was cultured on medium supplemented with Ge and 0.1~1.0mM of citric acid or myo-inositol, content of Ge and some inorganic elements in callus, as well as growth and dry weight of callus, were tend to increase in comparison to control, but myo-inositol was more effective on them than citric acid.cid.
The development of a protocol for high efficiency of embryogenic callus separation, maintenance and plant regeneration from the seeds of zoysiagrass cv. Zenith was studied. Embryogenic callus ratio is absolutely determined by genotype, but by adding high concentration of copper into medium, changing light condition and maintaining callus on initial induction medium for 8∼10 weeks, embryogenic callus can be easily distinguished and its growth can be promoted. There were significant differences among selected callus lines (each from one seed) according to their growth rates and regeneration percentages. Callus pre-treatment with activated charcoal inhibited callus growth, increased the level of precocious germination during culture and promoted shoot cluster formation after transfer to regeneration medium. For long-term callus maintenance, N6AA medium was better than MS medium, because the former inhibited non-embryogenic callus formation and kept vigor of embryogenic callus. The best callus lines Z-(5) has been successfully used for transformation and somaclonal variation selection in our laboratory.
Journal of The Korean Society of Grassland and Forage Science
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v.18
no.3
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pp.267-272
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1998
We confirmed conditions for callus formation and plant regeneration of five varieties of orchardgrass (Dactylis glomerma L.). Among five varieties of orchardgrass, "Hapsung 19" expressed the highest rate for both of callus formation and plant regeneration. Otherwise, among SH (Schenk and Hildebrandt), MS (Murashige and Skoog) and N6 medium (Chu), MS and N6 medium were highest degree of efficiencies in callus formation and plant regeneration, respectively. In this study, we determined volume of hormones appended in media; $3\;mg/\;{\ell}$ ofdicamba for callus formation and $1\;mg/\;{\ell}$ of NAA (I-naphtalene acetic acid) and $5\;mg/\;{\ell}$ kinetin (6-furfurylaminopurine) for plant regeneration were appended in their media. We obtained orchardgrass plants from callus about 50~80 days after transferred to regeneration media.ation media.
Mature embryos of five oat genotypes were cultured to develop an efficient method of callus induction and plant regeneration. Murashige and Skoog(MS) and N6 media supplemented with 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) and kinetin were used for callus induction. Percentage of callus induction showed significant among the combinations of plant growth regulators. Callus induction showed high efficiency in medium containing 3 mg/$\ell$ of 2,4-D. The high frequency of callus induction was obtained in Gwiri37. For plant regeneration, calli induced from mature embryos were transferred onto MS and N6 media supplemented with combinations of 6-benzyladenine (BA) and naphthaleneacetic acid (NAA) for 5 weeks. Percentage of plant regeneration showed high in MS medium containing 0.2 mg/$\ell$ of NAA and 1 mg/$\ell$ of BA. The callus initiation medium affected the subsequent plant regeneration. Treatment with 3 mg/$\ell$ of 2,4-D, and 3 mg/$\ell$ of 2,4-D and 3 mg/$\ell$ of kinetin in callus induction media showed high frequency for plant regeneration. Plant regeneration frequency among the genotypes showed significant. Especially, Gwiri37 showed high regeneration frequency. Regenerated shoots were treated with 200, 350 and 500 mg/$\ell$ of indole-3-butyric acid (IBA) transferred onto half-strength MS medium without plant growth regulators. Treatment of shoots with IBA induced root formation rapidly.
Journal of The Korean Society of Grassland and Forage Science
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v.9
no.2
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pp.62-67
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1989
A breeding program in progress at Suweon Livestock Experiment Station, RDA, involves the hybridization of italian ryegrass (Lm) and several leading forage grasses in an effort to combine the nutritive, productivity and palatability qualities of Lm with the adaptive and cold resistance qual; .les of several leading grasses. In order to study the fate of the hybridization between remotely related species, immatured hybrid embryos were cultured on media. The emasculated plants of Lm were Sikem and Tetrone. Reweille, 2n=14, of perennial ryegrass (Lp.), Forager, 2n=42, of tall fescue(Fa), First, 2n=14,of meadow fescue(Fp), Potomac, 2n=28, of orchardgrass(Dg), and Richmond, 2n=42, of timothy(Ph.p) were used as pollinators. Embryos were isolated on 4, 8, 12, 16, and 20 days after pollination and cultured them on modified Murashige and Skoog media. Calluses and plantlets have been obtained after 8 days old embryos crossing between $Lm{\times}Fa$, after 12 days embryos crossing between $Lm{\times}Lp$, Dg, and Ph.p, and after 16 days embryos crossing between $Lm{\times}Fp$. Both callus and shoot formation occurred on 6 % or less of the plated embryos of $Lm{\times}Fp$, Dg, and Ph.p. Embryoderived callus forming shoots have been obtained from 4 days old embryo crossing between $Lm{\times}Dg$ which has not successfully been done anywhere as far as we know. It means that hybrid plants of species without crossability can be obtained through the use of immatured embryo culture. Some of plated embryos developed directly shoots from embryos and the others shoot-forming callus. Cross between related species showed a high frequency of directly shoot formation from plated embryos and cross between remotely related species a high frequency of callus formation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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