This Study was tarried out to investigate the relationship ACE inhibitory activity and degradations of sulfur containing materials in Dolsan leaf mustard juice (DLMJ). The changes of sulfur containing materials which were treated with autolysis, myrosinase, ascorbate and papain were studied, as well as the changes of ACE inhibitory activity in DLMJ. At $37^{\circ}C$, sulfur contain-ing materials by autolysis decreased most rapidly from $0.43\%$ to $0.13\%$ in the second day. Conversely. ACE inhibitory activity increased most from $66\%$ to $87\%$. in the second day at $37^{\circ}C$. As myrosinase concentrations increased more, sulfur containing materials in DLMJ decreased more. The ACE inhibitory activities at 0, 0.5, 1, 2, and 4 Units of myrosinase for 240 min later were 70, 74, 75, 82, and $85\%$, respectively. At 1 mM ascorbate. concentrations of Sulfur containing materials in DLMJ decreased more significantly on the second day than on the other days. At 1 mM ascorbate for 6 days, ACE Inhibitory activity reached a maximum of about $92\%$. And, an increase of papain concentration was noted in accordance with a decreased sulfur containing materials. The maximum rate of AEC inhibitory activity at control, 3, 6, and 12 Units of papains treatments was shown as 70, 70, 75, and $78\%$ at 60 min, respectively. These results suggested that the degradation of sulfur containing materials led to the increase of ACE inhibitory activity. Consequently, it was suggested that ACE inhibiting was significantly related to the degradatives of sulfur containing materials.
본 연구는 배추에서 항암물질 PEITC의 함량을 높이기 위하여 PEITC 대사과정에서 관련 유전자인 myrosinase (MYR)와 Glutathione S-transferase(GST) 유전자를 분리하고 Agrobacterium tumefacien 형질전환 방법을 통하여 유전자 발현을 조절하였다. 분리된 MYR과 GST의 cDNA는 각각 1647bp와 624bp임을 확인하였고 pET system으로 단백질의 발현을 확인하였다. 형질전환을 위해서 MYR-과발현 벡터와 GST-발현억제 벡터를 제작하였으며 이를 이용하여 배추에 형질전환한 후 PCR 검정을 통해 MYR-과발현 벡터로 형질전환된 개체(IMS) 13개체를 GST-발현억제 벡터로 형질전환된 개체(IGA) 5개체를 선발하였다. 선발된 $T_0$ 개체는 $T_1$ 세대로 진전시켰으며 $T_1$ 형질전환 계통의 서던분석 결과 배추 genome내로 1-4 copy의 T-DNA가 삽입된 것을 확인하였다. 유전자 발현양을 real-time RT PCR로 조사한 결과 IMS는 발현량이 1.03-4.25배 증가하였고 IGA는 26.42-42.22배 감소하였다. IMS와 IGA의 각 계통에서 PEITC의 농도를 GC-MS 방법을 이용하여 확인한 결과 IMS는 PEITC 함량이 형질전환이 되지 않은 대조군에 비해 최대 4.86배까지 증가한 계통을 확인하였고 IGA는 최대 3.89배까지 증가된 계통을 확인하였다. 최종적으로 본 연구를 통하여 항암물질 PEITC량의 증가를 보인 형질전환계통 IMS 1, 3, 5, 12, 15 및 IGA 1, 2, 4를 선발하였다.
Methyl jasmonate (MeJA) is a signal molecule in the activation of defense responses in plants. In this study, we isolated 15 MeJA-inducible genes by subtractive hybridization. These genes encode two myrosinase-binding proteins, five lipase-like proteins, a polygalacturonase inhibitor, a putative chlorophyll-associated protein, a terpene synthase, a dehydroascorbate reductase, an ascorbate oxidase, a cysteine protease, an O-methyltransferase, and an epithiospecifier protein. Northern analysis showed that most of the Chinese cabbage genes are barely expressed in healthy leaves, but are strongly induced by MeJA treatment. We also examined whether these MeJA-inducible genes were activated by ethethon, BTH, and Pseudomonas syringae pv. tomato (Pst), a nonhost pathogen of Chinese cabbage. The results showed that none of the MeJA-inducible genes was strongly induced by ethephon or by BTH. The genes encoding lipase-like proteins and a myrosinase-binding protein were weakly induced by Pst. Other MeJA-inducible genes were not activated at all by the pathogen.
The several enzymes reaction which involve the quality change of fresh vegetables, such as chlorophylase, polyphenol oxidase, lypoxygenase, C-S-lyase, myrosinase and enzymes related lignification were reviewed. Numerous enzyme reaction continuously proceeds to the deterioration of vegetables after harvest due to the respiration and biochemical metabolism reaction, especially in case of physical injuring. It is extremely important to inhibit and to control these enzyme reaction in order to maintain the organoleptic and nutritional quality of fresh vegetables.
Glucosinolates are hydrolyzed by the enzyme myrosinase and are mainly found in cruciferous vegetables such as Chinese cabbage (Brassica campestris L. ssp. pekinensis). lsothiocyanates (ITCs) are glucosinolate degradation products with reported anticarcinogenic properties. Korean Chinese cabbage in the form of 'kimchi' is a staple part of the Korean diet. In this study, we examined the effects of storage temperature and duration on glucosinolate, ITC, soluble sugar, and organic acid levels in kimchi. Changes in pH and the impact of various parts of the Korean Chinese cabbage being used during the preparation of the dish were also assessed. Extracted ITC levels, analyzed via gas chromatography (GC) and GC/mass spectrometry (GC/MS), were higher in the midrib parts than in the cabbage leaves after storage at both 4 and $20^{\circ}C$. During storage, organic acid levels increased while soluble sugars were depleted. The pH initially increased (after 1 day at $20^{\circ}C$, and 1 week at $4^{\circ}C$), but subsequently decreased over time at both temperatures. Glucosinolate and ITC levels increased in the beginning of storage but then generally fell during further storage. Our data suggest that acidity-related reduction in myrosinase activity during storage may decrease glucosinolate and ITC levels. The changes in these levels depended on the storage conditions and the Korean Chinese cabbage parts used for the kimchi preparation.
Glucosinolates (GLSs) are abundant in cruciferous vegetables and reported to have anti thyroidal effects. Four GLSs (sinigrin, progoitrin, glucoerucin, and glucotropaeolin) were administered orally to rats, and the breakdown products of GLSs (GLS-BPs: thiocyanate ions, cyanide ions, organic isothiocyanates, organic nitriles, and organic thiocyanates) were measured in serum. Thiocyanate ions were measured by colorimetric method, and cyanide ions were measured with CI-GC-MS. Organic isothiocyanates and their metabolites were measured with the cyclocondensation assay. Organic nitriles and organic thiocyanates were measured with EI-GC-MS. In all treatment groups except for progoitrin, thiocyanate ions were the highest among the five GLS-BPs. In the progoitrin treated group, a high concentration of organic isothiocyanates (goitrin) was detected. In the glucoerucin treated group, a relatively low amount of goitrogenic substances was observed. The metabolism to thiocyanate ions happened within five hours of the administration, and the distribution of GLSs varied with the side chain. GLSs with side chains that can form stable carbocation seemed to facilitate the degradation reaction and produce a large amount of goitrogenic thiocyanate ions. Because goitrogenic metabolites can be formed without myrosinase, the inactivation of myrosinase during cooking would have no effect on the anti-nutritional effect of GLSs in cruciferous vegetables.
Glucoraphanin is the main glucosinolate found in broccoli and other cruciferous vegetables (Brassicaceae). The objective of the study was to evaluate whether glucoraphanin and its breakdown product sulforaphane, are potent modulators of various phase I and phase II enzymes involved in carcinogen-metabolising enzyme systems in vitro. The glucosinolate glucoraphanin was isolated from cruciferous vegetables and exposed to human hepatoma cell line HepG2 at various concentrations (0-25 ${\mu}M$) for 24 hours. Glucoraphanin at higher concentration (25 ${\mu}M$) decreased dealkylation of methoxyresorufin, a marker for cytochrome P4501 activity; supplementation of the incubation medium with myrosinase (0.018 U), the enzyme that converts glucosinolate to its corresponding isothiocyanate, showed minimal induction in this enzyme activity at concentration 10 ${\mu}M$. Quinone reductase and glutathione S-transferase activities were unaffected by this glucosinolate; however, supplementation of the incubation medium with myrosinase elevated quinone reductase activity. It may be inferred that the breakdown product of glucoraphanin, in this case sulforaphane, is superior than its precursor in modulating carcinogen-metabolising enzyme systems in vitro and this is likely to impact on the chemopreventive activity linked to cruciferous vegetable consumption.
본 연구에서는 이천 게걸무, 강화 순무 및 조선무의 품질 특성을 비교 분석하였다. 일반성분의 경우, 수분 함량은 이천 게걸무 87.78%, 강화 순무 92.73% 및 조선무 91.45%로 게걸무가 다른 무에 비하여 낮았다. 반면에 조단백, 조섬유 및 조회분 함량은 이천 게걸무가 강화 순무와 조선무에 비하여 약 1.7-1.8배, 1.2-1.6배 및 2.0-2.4배 높았다. 식이섬유함량은 이천 게걸무 11.32%, 강화 순무 13.26% 및 조선무 14.20%로 게걸무가 다른 무에 비하여 낮았다. 무기질 함량의 경우, 게걸무의 Mg, K, Ca 함량이 다른 무에 비하여 높았으며 P, Zn, Fe 함량은 다른 무와 유의적인 차이가 없었다. 가수분해 효소로서 소화와 관련된 ${\alpha}-amylase$활성의 측정 결과 이천 게걸무 9.97 unit, 강화 순무 14.87 unit 및 조선무 18.99 unit으로 나타났다. Protease 활성의 경우, 알칼리성은 이천 게걸무와 조선무가 각각 3.02 PU, 3.10 PU의 유사한 수준으로 순무에 비하여 높았고, 산성 protease 활성에서는 게걸무가 가장 높았다. 무의 매운맛 성분 및 기능성 관련 물질로 알려진 myrosinase 활성은 이천 게걸무가 36,990.81 unit으로 강화 순무나 조선무보다 높았다. 결론적으로 이천 게걸무는 강화 순무나 조선무에 비하여 조단백, 회분, 조섬유 및 무기질 중 Na, Mg, K, Ca의 함량이 높고 protease 활성과 myrosinase 활성이 높았다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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