This study was attempted to investigate the production of L-tyrosine by Brevibacterium flavum ATCC 14067. To select the strain which produce more L-tyrosine, mutants were induced by N-methyl-N'-nitro-nitrosoguanidine (NTG) treatment and phenylalanine auxotrophic mutants were induced by NTG and penicillin treatments. PFP resistant mutant was isolated from a phenylalanine auxotroph by retreatment with NTG and screened for increase of L-tyrosine production. PFP-326 mutant resistant to PPP (100ug/ml) was derived from phenylalanine auxotroph by mutagenesis with NTG and PFP-106 mutant resistant to PFP (1201g/ml) was derived from PFP-326 by mutagenesis with NTG. The composition of media for L-tyrosine production in strain PFP-106 was studied. PFP-106 mutant strain produced 50mg 11 of L-tyrosine while the parent strain produced 0.56mg 11 of L-tyrosine. The optimum composition of medium for L-tyrosine by strain PFP-106 was 10cA sucrose as carbon source, 3% ammonium sulfate as nitrogen source. The optimum cultural condition for producing L-tyrosine by strain PFP-106 was L-phenylalanine at a concentration of 1000g/mg.
Vibrio fluvialis의 opp gene cluster내에 존재하는 oppABCDF 유전자를 allelic exchange 방법에 의해서 각각의 유전자가 deletion된 mutant를 제조하였다. 각각의 유전자가 deletion된 mutant의 확인은 PCR과 Southern hybridization으로 결정하였다. 각 mutant들을 BHI 배지에서 생육을 비교한 결과 배양후 4시간 이전까지는 wild strain이 모든 mutant들에 비해서 생육이 좋았으나 4시간 이후부터는 같은 수준의 생육을 보여주었다. Biofilm 생산을 비교한 결과 ${\Delta}oppA$ mutant에서 가장 높은 생산성을 보여주었다. ${\Delta}oppC,D,F$ mutant들의 biofilm 생산은 ${\Delta}oppA$ mutant 보다는 낮았으나 wild strain보다는 높은 biofilm 생산성을 보여주었다.
Pleurotus ostreatus 'Miso' is a mutant strain showing white color in pileus from the known parent strain 'Wonhyeong 1'. Shape and several other characters also vary with culture conditions. Mating experiments were performed to understand interstrain mating relationship using monokaryons of the parent and the mutant strains. All monokaryons were grown from single spores isolated from freshly collected fruit bodies. Pairings were performed in 90 mm petri dishes on PDA. They were allowed to grow at 25 until two fronts of the advancing mycelia met and developed a conspicuous contact zone. The contact zone and the outer edges of paired colonies on each plate were examined for clamp connections. The parent and the mutant resulted in tetrapolar incompatibility in intrastrain crosses. In interstrain crosses, each monokaryotic tester strain of the parent strain was out-crossed to monokaryotic tester strains of the mutant. As a result of these crosses it was found that both strains share the same A and B incompatibility factors yielding 25% compatibility.
광합성 홍색세균의 light harvesting complex II (LHC II)발현 유전자가 제거된 돌연변이종을 halogen 램프 하에서 거리에 따라 광도를 달리하며 배양하여 wild type과 생산성을 비교한 결과 낮은 광도(34 ${\mu}E/m^2/s$)에서는 wild type가 높은 광도 (376, 118 ${\mu}E/m^2/s$)에서는 mutant가 높은 세포농도를 나타내었다. 특히 118 ${\mu}E/m^2/s$에서 LHC $II^-$ mutant가 56% 높은 세포생산량을 보였다. 이는 세포내 pigment양의 감소로 mutual shading effect가 감소하였기 때문으로 판단되었다.
Kim, Moo-Woong;Ko, Su-Min;Kim, Jeong-Yoon;Sohn, Jung-Hoon;Park, Eui-Sung;Kang, Hyun-Ah;Rhee, Sang-Ki
Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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제5권4호
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pp.234-241
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2000
The Saccharomyces cerevisiae PMR1 gene encodes a Ca2+-ATPase localized in the Golgi. We have investigated the effects of PMR1 disruption in S. cerevisiae on the glycosylation and secretion of three heterologous glycoproteins, human ${\alpha}$1-antitrypsin (${\alpha}$1-AT), human antithrombin III (ATHIII), and Aspergillus niger glucose oxidase (GOD). The pmr1 null mutant strain secreted larger amounts of ATHIII and GOD proteins per a unit cell mass than the wild type strain. Despite a lower growth rate of the pmr1 mutant, two-fold higher level of human ATHIII was detected in the culture supernatant from the pmr1 mutant compared to that of the wild-type strain. The pmr1 mutant strain secreted ${\alpha}$1-AT and the GOD proteins mostly as core-glycosylated forms, in contrast to the hyperglycosylated proteins secreted in the wild-type strain. Furthermore, the core-glycosylated forms secreted in the pmr1 mutant migrated slightly faster on SDS-PAGE than those secreted in the mnn9 deletion mutant and the wild type strains. Analysis of the recombinant GOD with anti-${\alpha}$1,3-mannose antibody revealed that GOD secreted in the pmr1 mutant did not have terminal ${\alpha}$1,3-linked mannose unlike those secreted in the mnn9 mutant and the wild type strains. The present results indicate that the pmr1 mutant, with the super-secretion phenotype, is useful as a host system to produce recombinant glycoproteins lacking high-mannose outer chains.
Actinoplanes teichomyceticus ATCC 31121 was mutated with UV to obtain a superior mutant strain with increasing level of teicoplanin production. In this investigation lethal curve was obtained and the optimal condition to induce mutagenesis was determined and to isolate the desirable mutant strain. It was also confirmed that teicoplanin activities by agar diffusion method to be compared to the mother strain. One mutant strain, T991014-1 that had the highest teicoplanin productivity was finally selected for further investigation including fermentation pattern. The mutant was characterized by the various tests such as amylase activity, protease activity, antibiotic resistance, autotoxicity, and productivity.
본 연구에서는 BC 생산균주인 KJ-1을 UV와 NTG mutagenesis를 통하여 초기에 주입된 glucose를 효과적으로 이용하여 cellulose 수율이 향상된 균주로 계량하였다. Mutant들 중 수율이 2배정도 향상한 균주에서는 cellulose를 비롯한 gluconic acid, 2-keto gluconic aicd, 5-keto gluconic acid의 비율이 parent strain과 차이를 보였고, 시간에 따른 acid 농도 분포를 살펴보면 수율이 증가한 원인 중에 mutant가 parent strain보다 합성한 acid를 효율적으로 이용하고 있다고 추론 할 수 있었다.
L-Proline-producing mutant strains were developed by exposing L-glutamic acid-producing bacteria to N-metyl-N-nitro-nitrosoguanidine and UV irradiation. A L-histidine auxotroph of Corynebacterium acetoacidophilum RYU3161(KCTC 0616BP), which was resistant to sulfaguanidine and proline analogs (DHP, AZC, TAC), was isolated. The activity of the mutant strain's $\gamma$-glutamyl kinase was 45% higher than that of the parent strain. The optimum level of L-histidine for production of L-proline was 0.16 g/l. In a 5-1 jar fermenter, the mutant strain produced L-proline at a high concentration (35 g/l) level within 48 h of cultivation.
Teicoplanin은 Actinoplanes teichomyceticus가 생산하는 밴코마이신과 유사한 글리코펩티드계 항생제의 일종으로 메티실린 내성 황색포도상구균에 대해서도 효과가 우수한 치료제이다. 공시균주인 Actinoplanes teichomyceticus ATCC31121에 자외선을 조사하여 teicoplanin 생산성이 우수한 균주를 얻었다. 본 연구에서 우수 변이주 획득을 위한 UV 조사에 대한 균주의 치사곡선을 구하고 변이 유도 최적 조건을 확립하였다. 또한 한천 확산법을 사용하여 모균주와 변이주들의 teicoplanin 생산성 분포를 비교하였다. 변이주 가운데 가장 생산성이 높은 T1014-1를 최종적으로 획득하였으며 효소 활성도, 항생제 내성, 자가내성 및 teicoplanin 생산성을 조사하였으며 발효조에서 발효특성을 조사하였다.
In Burkholderia pseudomallei, the pathogen that causes melioidosis, the gene cluster encoding the capsular polysaccharide, is located on chromosome 1. Among the 19 capsular genes in this cluster, wzm has not been thoroughly studied. To study the function of wzm, we generated a deletion mutant and compared it with the wild-type strain. The mutant produced less biofilm in minimal media and was more sensitive to desiccation and oxidative stress compared with the wild-type strain, indicating that wzm is involved in biofilm formation and membrane integrity. Scanning electron microscopy showed that the bacterial cells of the mutant strain have more defined surfaces with indentations, whereas cells of the wild-type strain do not.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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