• 생명과학회지
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• 제28권3호
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• pp.300-306
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• 2018

라이소자임은 선천성 면역 물질로 개불을 포함하는 여러 무척추동물의 병원균에 대한 방어에 주요하게 작용한다. 본 논문은 개불(Urechis unicinctus)의 체벽 조직 추출물로부터 무척추형 라이소자임의 정제와 그 특성에 관한 분석을 기술하고 있다. 체벽 추출물은 우선적으로 Sep-Pak C18 cartridge를 사용하여 부분적으로 분리되었으며, 분리된 분획 중 60% 메탄올에 용출된 분획이 Bacillus subtilis KCTC 1021에서 강한 항균활성을 나타내었다. 그 후 여러 단계의 역상과 이온교환 고속액체크로마토그래피(High Performance Liquid Chromatography, HPLC)를 사용하여 항균성 물질이 정제되었으며, 분자량은 약 14 kDa이었다. 이 단백질의 일차서열은 LC-MS/MS를 통해 분석되었으며, 얻은 부분적 아미노산 서열을 NCBI BLAST를 통하여 분석해 본 결과, 이 항균성 물질은 다른 동물들로부터 동정된 무척추동물형 라이소자임(invertebrate-type lysozyme)의 서열과 유사도를 가지고 있어, 체벽으로부터 정제된 개불 라이소자임(Urechis unicinctus invertebrate-type lysozyme from body wall, Uu-iLysb)으로 명명하였다. 개불 라이소자임의 활성을 확인하기 위하여 항균활성 및 라이소자임 효소 활성실험을 진행한 결과, 개불 라이소자임이 항균활성과 라이소자임 효소활성 모두 강하게 가지고 있는 것을 확인하였다.

• Molecules and Cells
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• 제44권7호
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• pp.517-528
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• 2021

A recent genetic study with Brucella abortus revealed the secretion activator gene A (SagA) as an autolysin component creating pores in the peptidoglycan (PGN) layer for the type IV secretion system (T4SS) and peptidoglycan hydrolase inhibitor A (PhiA) as an inhibitor of SagA. In this study, we determined the crystal structures of both SagA and PhiA. Notably, the SagA structure contained a PGN fragment in a space between the N- and C-terminal domains, showing the substrate-dependent hinge motion of the domains. The purified SagA fully hydrolyzed the meso-diaminopimelic acid (DAP)-type PGN, showing a higher activity than hen egg-white lysozyme. The PhiA protein exhibiting tetrameric assembly failed to inhibit SagA activity in our experiments. Our findings provide implications for the molecular basis of the SagA-PhiA system of B. abortus. The development of inhibitors of SagA would further contribute to controlling brucellosis by attenuating the function of T4SS, the major virulence factor of Brucella.