기능성 식품소재로서 이미 많이 알려진 키토산이 신장과 관련하여 식품이나 의료용 소재로서 활용이 가능한 지를 알아보기 위하여 신장 기능과 민감하게 관련이 있는 효소인 RDPase, Udpase의 활성을 체내$\cdot$체외 실험을 통하여 관찰하였다. 체외 실험에서 글리세롤에 의해 유도된 RDPase의 유리$\cdot$활성 감소를 다시 회복시키는 것을 관찰하였다. 체내실험에서 글리세롤 투여에 의하여 손상된 신장의 근위세뇨관에서 급격히 증가한 RDPase의 활성을 키토산이 확실하게 감소시키는 것을 관찰할 수 있었다. 키토산을 공급한 쥐의 소변에서의 Udpase의 활성이 증가하는 것을 관찰하였다.
Ion exchange resin complexes of famotidine have been prepared by the reaction of famotidine solution with activated ion exchange resins. Complex formation efficiency between famotidine and ion exchange resin was about $80{\sim}90%$ in average, calculated by HPLC determination. Drug release characteristics from the resin complexes were evaluated by the modified percolation method. Famotidine release was dependent on the type of ion exchange resins. In the case of weakly acidic resin complexes, the cumulative released amount of famotidine was more than 90% for 1hr in pH 1.2 buffer solution. However, in the case of strongly acidic resin complexes, it was less than 5% for 3hr in the same medium. Strongly acidic resins revealed some advantages over weakly, acidic resins for overcoming instability of famotidine in gastric juice. In addition, strongly acidic resin complexes showed controlled release of famotidine in pH 6.8 buffer solution, showing the result of about 60 to 70% of drug release for 5hr. After oral administrations of famotidine-resin complexes to rats as dose of 40 mg equivalent/kg, the pharmacokinetic parameters of famotidine were obtained by model independent analysis and compared with those of famotidine solution or suspension. $C_{max}$ of famotidine-resin complex was lower than that of famotidine solution or suspension. MRT, MAT, and MDT of the complexes were greater than those of famotidine solution or suspension. From these results, it was expected that famotidine was released slowly from the complexes and absorbed continuously into systemic circulation. It was recognized that drug release from the complexes was the rate-limiting step in drug absorption, since there were close correlations between in vitro drug release and in vivo pharmacokinetic parameters.
Objectives : The cortex and root of Acanthopanax sessiliflorus (AR), a herbal medicine, have been used for several diseases including cancer in Oriental countries. Recently, we reported that AR has an immune-potentiating action. Oga-Power(OP) was made using extract from AR. For these reasons, we hypothesized that OP can potentiate the immune system in terms of accelerating proliferation rates of immune cells such as thymocytes and splenocytes. Methods : In this experiment, proliferation rates of thymocytes and splenocytes were measured using modified 3-[4,5-dimethy -lthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT). No production levels in macrophages isolated from normal mice were measured using Griess method. Results : In our results, treatment with OP accelerated proliferation rates of splenocytes, but did not affect those of thymocytes in vitro. On the other hand, proliferation rates of thymocytes was elevated in vivo. In addition, level of NO production from macrophage separated from abdominal cavity of normal mice was elevated by treatment with OP. Conclusions : In conclusion, OP has immune-potentiating action, by acceleration of splenocyte proliferation and elevation of NO production level from macrophages.
The proliferation of embryonic cells or adult stem cells in tissue is critically regulated during development and repair. How limited the proliferation of cells, so far, is not much explored. Cell-cell contact proliferation inhibition is known as a crucial mechanism regulating cell proliferation in vitro and in vivo. In this study we examined the characters of mouse subcutaneous adipose derived stem cells (msADSC) whether they lost or get contact inhibition during in vitro culture. The characters of msADSC growth after confluence were analyzed using confocal microscope and the expression profiles of contact inhibition related genes were analyzed according to the morphological changes using real-time PCR method. msADSC showed overlapping growth between them but not after passage 14. The cell shapes were also changed after passage 14. The expression profiles of genes which are involved in contact inhibition were modified in the msADSC after passage 14. The differentiation ability of msADSCs to adipocyte, chondrocyte and osteocyte was not changed by such changes of gene expression profiles. Based on these results, it is revealed that smADSC were characterized by getting of strong cell-cell contact inhibition after passage 14 but the proliferation and developmental ability were not blocked by the change of cell-cell contact proliferation inhibition. These finding will help to understand the growth of adipose tissue, although further studies are needed to evaluate the physiological meaning of the cell-cell contact proliferation inhibition during in vitro culture of msADSC.
In this study, we demonstrated Fourier-domain/swept-source optical coherence tomography (FD/SS-OCT) at a center wavelength of 800 nm for in vivo human retinal imaging. A wavelength-swept source was constructed with a semiconductor optical amplifier, a fiber Fabry-Perot tunable filter, isolators, and a fiber coupler in a ring cavity. Our swept source produced a laser output with a tuning range of 42 nm (779 to 821 nm) and an average power of 3.9 mW. The wavelength-swept speed in this configuration with bidirectionality is 2,000 axial scans per second. In addition, we suggested a modified zero-crossing method to achieve equal sample spacing in the wavenumber (k) domain and to increase the image depth range. FD/SS-OCT has a sensitivity of ~89.7 dB and an axial resolution of 10.4 ${\mu}m$ in air. When a retinal image with 2,000 A-lines/frame is obtained, an acquisition speed of 2.0 fps is achieved.
Neurons make long-distance connections via their axons, and the accuracy and stability of these connections are crucial for brain function. Research using various animal models showed that the molecular and cellular mechanisms underlying the assembly and maintenance of neuronal circuitry are highly conserved in vertebrates. Therefore, to gain a deeper understanding of brain development and maintenance, an efficient vertebrate model is required, where the axons of a defined neuronal cell type can be genetically manipulated and selectively visualized in vivo. Placental mammals pose an experimental challenge, as time-consuming breeding of genetically modified animals is required due to their in utero development. Xenopus laevis, the most commonly used amphibian model, offers comparative advantages, since their embryos ex utero during which embryological manipulations can be performed. However, the tetraploidy of the X. laevis genome makes them not ideal for genetic studies. Here, we use Xenopus tropicalis, a diploid amphibian species, to visualize axonal pathfinding and degeneration of a single central nervous system neuronal cell type, the retinal ganglion cell (RGC). First, we show that RGC axons follow the developmental trajectory previously described in X. laevis with a slightly different timeline. Second, we demonstrate that co-electroporation of DNA and/or oligonucleotides enables the visualization of gene function-altered RGC axons in an intact brain. Finally, using this method, we show that the axon-autonomous, Sarm1-dependent axon destruction program operates in X. tropicalis. Taken together, the present study demonstrates that the visual system of X. tropicalis is a highly efficient model to identify new molecular mechanisms underlying axon guidance and survival.
Kim, Dong-Myung;Choi, Cha-Yong;Ahn, Jin-Ho;Kim, Tae-Wan;Kim, Nam-Young;Oh, In-Suk;Park, Chang-Gil
Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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제11권3호
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pp.235-239
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2006
Due to recent advances in genome sequencing, there has been a dramatic increase in the quantity of genetic information, which has lead to an even greater demand for a faster, more parallel expression system. Therefore, interest in cell-free protein synthesis, as an alternative method for high-throughput gene expression, has been revived. In contrast to in vivo gene expression methods, cell-free protein synthesis provides a completely open system for direct access to the reaction conditions. We have developed an efficient cell-free protein synthesis system by optimizing the energy source and S30 extract. Under the optimized conditions, approximately $650{\mu}g/mL$ of protein was produced after 2h of incubation, with the developed system further modified for the efficient expression of PCR-amplified DNA. When the concentrations of DNA, magnesium, and amino acids were optimized for the production of PCR-based cell-free protein synthesis, the protein yield was comparable to that from the plasmid template.
Jeon, Hye Lyun;Yi, Jung-Sun;Kim, Tae Sung;Oh, Youkyung;Lee, Hye Jeong;Lee, Minseong;Bang, Jin Seok;Ko, Kinarm;Ahn, Il Young;Ko, Kyungyuk;Kim, Joohwan;Park, Hye-Kyung;Lee, Jong Kwon;Sohn, Soo Jung
Toxicological Research
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제33권2호
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pp.107-118
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2017
Although alternative test methods based on the 3Rs (Replacement, Reduction, Refinement) are being developed to replace animal testing in reproductive and developmental toxicology, they are still in an early stage. Consequently, we aimed to develop alternative test methods in male animals using mouse spermatogonial stem cells (mSSCs). Here, we modified the OECD TG 489 and optimized the in vitro comet assay in our previous study. This study aimed to verify the validity of in vitro tests involving mSSCs by comparing their results with those of in vivo tests using C57BL/6 mice by gavage. We selected hydroxyurea (HU), which is known to chemically induce male reproductive toxicity. The 50% inhibitory concentration ($IC_{50}$) value of HU was 0.9 mM, as determined by the MTT assay. In the in vitro comet assay, % tail DNA and Olive tail moment (OTM) after HU administration increased significantly, compared to the control. Annexin V, PI staining and TUNEL assays showed that HU caused apoptosis in mSSCs. In order to compare in vitro tests with in vivo tests, the same substances were administered to male C57BL/6 mice. Reproductive toxicity was observed at 25, 50, 100, and 200 mg/kg/day as measured by clinical measures of reduction in sperm motility and testicular weight. The comet assay, DCFH-DA assay, H&E staining, and TUNEL assay were also performed. The results of the test with C57BL/6 mice were similar to those with mSSCs for HU treatment. Finally, linear regression analysis showed a strong positive correlation between results of in vitro tests and those of in vivo. In conclusion, the present study is the first to demonstrate the effect of HU-induced DNA damage, ROS formation, and apoptosis in mSSCs. Further, the results of the current study suggest that mSSCs could be a useful model to predict male reproductive toxicity.
Background: Calcific degeneration is the major cause of clinical failure of glutaraldehyde (GA) crosslinked bioprosthetic tissues implanted in the body and necessitates the reoperation or causes death. Surface modification of biologic tissues using sulfonated polyethyleneoixde (PEO-SO3) has been suggested to significantly enhance blood compatibility, biostability and calcification-resistance by means of the synergistic effect of highly mobile and hydrophilic PEO chains and electrical repulsion of negatively charged sulfonate groups. This study was designed to evaluate the anticalcification effect of surface-modification of biologic arteries by direct coupling of PEO-SO3 after GA fixation and changes of calcification according to the implantation period through the quantitative investigation of the deposited calcium and phosphorous contents of the biologic arterial tissues in the canine circulatory implantation model. Material and Method: Total of 16 fresh canine carotid arteries were harvested from eight adult dogs and divided in to GA group(n =8) and PEO-SO3 group(n=8). Sulfonation of diamino-terminated PEO was performed using propane sultone. Canine carotid arteries were only crosslinked with 0.65% GA solution in GA group and modified by direct coupling 5% PEO-SO3 solution after GA crosslinkage for 2 days and stabilized by NaBH4 solution for 16 hours in PEO-SO3 group. In both groups the resected segment of bilateral carotid arteries were reconstructed. Reconstructed segments of the two groups were analysed the quantities of calcium and phosphorous contents after 3(n=4) and 6(n=4) weeks in vivo. Result: After implantation of 3 seeks, PEO-SO3 group showed significantly less depositions.
본 연구는 $^{99m}Tc$과 방사성 의약품인 적혈구(Erythrocyte)의 표지를 이용하여 신속한 핵의학적 검사를 시행해야 하는 환자들에게 표지효율 저하를 방지하여 영상의 정보를 더욱 정확하게 분석할 수 있도록 하기 위해 변형 체외 표지법을 이용한 방법에서 Stannous chloride($SnCl_2$) 양, 표지시간, 적혈구 농도, 헤모글로빈(Hb) 수치에 따른 변화를 비교하여 분석하였다. 간혈관종 검사와 위장관출혈 검사를 시행한 전체 55명의 환자 중 정상으로 판명된 15명은 정상군, 이상소견으로 판명된 40명은 환자군으로 분리한 후, 환자군 중 적혈구 농도가 정상보다 낮은 환자와 헤모글로빈이 낮은 환자들의 표지시간 변화에 따른 표지효율을 측정하였다. 그 결과 정상인의 경우 Tin의 양이나 표지시간이 표지효율에 미치는 영향은 거의 없는 것으로 나타났으나 환자의 경우에는 표지시간(Incubation time)이 30분보다 60분이 표지효율이 높게 측정되었다. 따라서 적혈구 농도, 헤모글로빈수치, 헤마토크리트 수치가 낮은 환자를 검사할 때 표지시간을 30분보다는 60분에서 시행하여 표지효율을 높여 보다 정확하고 좋은 영상정보를 얻을 수 있을 것이다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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