남조 대발생을 제어하기 위한 생물제재의 처리가 수중 생태계에 미치는 영향을 파악하는 연구의 일환으로, 살조세균 처리이후 증가된 용존성 microcystin-LR (MCLR)이 식물플랑크톤 군집의 종조성 및 현존량, 그리고 조류독소 분포에 어떠한 영향을 주는 지를 파악하기 위하여, MCLR standard를 성격이 다른 3가지 현장수를 넣은 시험관에 대조군, 현장 농도의 10배, 100배 씩 처리하고 식물플랑크톤 생물량, 엽록소 a,환경요인, 독소량 등의 변화를 각각 조사하였다. 규조 Stephanodiscus hantzschii가 압도적으로 우점하였던 천호대교에서는 독소처리이후 현존량은 점차 감소하였으며 종조성은 크게 변하지 않았으며, 규조 Aluacoseira와 황색편모조 Dinobryon이 우점한 길동생태공원에서는 현존량이 크게 감소한 반면, 고농도 처리에서는 녹조 Scenedesmus가 크게 발달하였다. 남조류와 용존성 MCLR 농도가 가장 높았던 양수리 육각지에서는 남조 M. aeruginosa 감소 및 총 현존량의 감소가 일어났다. 이상의 결과는 생물제재 처리이후 남조 M. aeruginosa 사멸에 따른 용존성 독소의 증가가 수중내 식물플랑크톤 군집의 종조성 및 현존량 변화를 더욱 심화시키는 것으로 밝혀졌다.
서울 경기지역 공원 연못 및 한강 수계내의 수중 조류독소 Microcystin (MC)의 분포를 파악하기 위하여, 수도권 공원 연못 7개소, 한강수계 4개소, 경안천 1개소, 양수리 육각지 1개소, 대조군 2개소를 포함 총 15개 지점을 대상으로 강우가 적은 저온기 동안, 3차례에 걸쳐 수중내 환경요인, 조류 현존량, 조류 독소량을 조사하였다. 조류독소는 유도체중 가장 독성이 강한 Microcystin-LR (MCLR)만을 대상으로 하였으며 ELISA법으로 분석하였다. 조사기간 동안 수온($0.4\;{\sim}\;21.9^{\circ}C$)을 비롯한 대부분의 환경요인들은 계절성과 지역성이 뚜렷하였다. 조류 현존량은 수온 변화에 민감하였고 (r = 0.307), Microcystis aeruginosa를 포함하여 남조류는 경복궁 경회루, 석촌호수. 양수리 육각지 등에서 우점하였다. 조류독소 MCLR (측정한계 $0.05\;{\mu}g\;L^{-1}$) 는 남조 Microcystis aeruginosa출현이 높았던 지점에서 높게 검출되었으며, 조체성과 용존성을 합한 총 MCLR은 1차조사시 경복궁 경회루 ($1.39\;{\mu}g\;L^{-1}$), 석촌호수($0.55\;{\mu}g\;L^{-1}$), 양수리 육각지 ($0.59\;{\mu}g\;L^{-1}$)에서 각각 높게 나타났으나,2, 3차 조사에서는 양수리 육각지에서만 검출되었다. 남조류 총현존량은 조류 현존량 (r = 0.066)이나 엽록소 a량(r = -0.058)과는 낮은 관계를보였으며, M. aeruginosa 현존량(r = 0.766)과는 매우 높은 관계를 나타냈다. 조류독소 MCLR은 남조 M. aeruginosa 현존량이 높았던 지점에서 높게 검출되었다(조체성: r = 0.526, 용존성: r = 0.433).따라서, 서울, 경기지역 공원 연못이나 한강수계의 조류독소는 주로 정체성 연못에서 남조 Microcystis aeruginosa에 의해 형성되지만, 여가활동이나 상수원 공급에는 위험성이 낮은 것으로 판단되었다.
한국독성학회 2002년도 Molecular and Cellular Response to Toxic Substances
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pp.148-148
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2002
This study is to characterize the microscopical and ultrastructural changes in chronic exposure of Microcystin-LR (MCLR), a cyclic heptapeptide hepatotoxin, comparing to those in acute lethal toxicity. Female ICR mice were injected intraperitoneally with 10, 20, 30,$\mu\textrm{g}$/kg of MCLR every 3 day for 27 days.(omitted)
For the detection of cyanobacterial toxin, an Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was integrated into a PDMS microchip. The conjugates of microcystin-LR (MCLR) and keyhole limpet hemocyanin (KLH) were adsorbed on the surface of polystyrene beads and these MCLR-KLH polystyrene beads were introduced into a microchamber. MCLR on the surface of polystyrene beads reacted with horseradish peroxides (HRP) conjugated anti-MCLR monoclonal antibody (mAb) which had a competitive reaction with MCLR in water sample. After the enzyme substrate 3,3,5,5-tetramethyl benzidine (TMB) was injected into the chamber and catalyzed by HRP, the color change was detected with a liquid-cord waveguide. This integration shortened the conventional ELISA analysis time from several hours to about 30 min with only 4.2 $\mu$L MCLR sample consuming which was useful for the environmental analysis. More over, troublesome operations required for ELISA could be replaced by simple operations. The microchip based detection system showed a good sensitivity of 0.05 $\mu$g/L and maintained good reliability through its quantitative range with low coefficients of variation (2.5-10.5%).
A new chemiluminescence immunochromatographic analysis system with high sensitivity and high reproducibility was developed for the determination of microcystins (MCs) in water. Horse radish peroxidase (HRP) labeled microcystin monoclonal antibody was used for the sensitive chemiluminescence detection. The chemiluminescence immunochromatographic analysis system was composed of microcystin LR (MCLR)-monoclonal antibody (mAb)-Horse Radish Peroxidase (HRP) conjugate, MCLR-BSA conjugate, luminol, hydrogen peroxide mixture solution, an immunochromatographic assay strip and luminometer. To detect the concentration of microcystins in water, we utilized one spot analysis of the strip instead of flow type analysis. We could detect the microcystins in water at a concentration as low as 9.45 pg/mL with the chemiluminescence (CL) detection.
매년 남조 Microcystis aeruginosa가 대발생하는 인공연못에 100 L mesocosm를 설치하고 생물제재 (Xantobacter autotrophycus + casitone)를 혼합 처리한 결과, 환경요인의 변화(pH, DO감소, 영양염 증가)와 함께 식물플랑크톤 군집의 뚜렷한 변화가 관찰되었다. 생물제재 처리후 M. aeruginosa는 점차 감소하여 8일에는 관찰되지 않았고, 식물플랑크톤 총 밀도의 약 60% 이상이 감소하였다. 또한 남조의 소멸과 함께 조체성 독소의 감소 및 용존성 독소가 증가하였으며, 뚜렷한 영양물질의 증가에도 불가하고 현존량이 증가하는 종은 나타나지 않았다. 이러한 영양물질이나 용존성 독소의 증가는 생물제재를 이용한 남조류 제어가 상수원 저수지와 같은 장소보다는 규모가 작은 연못이나 저수지 등에 적합하며, 생물제재 처리 이후 수질변화에 대한 적극적인 수질관리 대책이 마련되어야 할 것으로 판단되었다.
2010년 고온기 (여름~가을) 동안 수체 크기와 수질이 서로 다른 부영양 하천 (경안천, 제천천) 및 저수지 (인경 저수지, 중앙저수지)의 유기물 제어를 목적으로 기 개발된 식물- 광물 혼합제(PMC)를 동일한 농도($0.05\;mg\;L^{-1}$)로 각각 처리하고 수질, 플랑크톤 변화를 조사하였다. 또한 남조 Microcystis aeruginosa 밀도가 높았던 중앙저수지에서는 동시에 조류 독소 microcystin-LR 변화를 각각 조사하였다. 실험은 수체의 크기를 고려하여 인경저수지를 제외한 나머지 장소에서는 실험용 메조코즘을 설치하였다. 실험결과, 강우와 어류에 의한 교란이 심했던 경안천에서는 모든 항목에 대하여 45% 이하의 낮은 수질개선능을 보인 반면, 수체가 안정되고 남조류 밀도가 높았던 수체에서는 SS (70~81%), TP (75~91%), BOD (65~91%), Chl-a (88~98%), 식물플랑크톤 (84~92%), 동물플랑크톤 (68~88%) 등에 높은 수질개선효과를 보였다. 한편 PMC 처리 후 조체성에 비해 용존성 독소(96%)가 현저하게 감소하여 유해물질 제어 가능성을 나타냈다. 따라서 기 개발된 PMC는 수체 교란이 적고 남조류가 우점하는 수체내 유기물 제어에 적합한 것으로 판단되었다.
To investigate the effects of low dosed microcystin -LR (MCLR) on the initial stage of subacute hepatotoxicity in vivo, male Sprague-Dawley rats after weanling were divided in four groups. The orally treated group (OG) was administered orally by 1 $\mu\textrm{g}$/kg B.W. at an interval of three days. The free group (FG) has taken the drinking water including 1 $\mu\textrm{g}$/L freely and the control group (CC) was only treated with 0.9% saline solution All groups were treated for a period of 3 weeks. There was a significant correlation in body growth rate between OG and FC and especially, a deterioration of the growth of spleen was observed in the FG after 5 days. The protein levels were also decreased in OG and FG after 9 days. Level of total fat was increased to the 9th day but again decreased up to the initial level. High hemolysis of the isolated erythrocytes occurred only in OG. Activities of ${\gamma}$-G7 of 0G and FG were higher twice-fold than CG, but the values of OG were already higher at the first treatment day. No significant change in aspartate aminotransferase (AST) activity was shown in all groups, but the activity of alanine aminotransferase (ALT) was slightly increased at the beginning state. There were much similarities in the results of OG and FG. except the growth inhibition of spleen in FG. It may be concluded that long -term effects of the low doses of mycrocystins in animals including human being can lead to serious health problems, especially to liver and spleen.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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