This study was conducted to examine the stages showing the antimutagenic effects on the microbial mutation by addition of the juice extracted from small water dropwort. It was not able to find out the signal showing the genic derepression or change of gene repair system by addition of the juice. And it was hardly possible to expect the conversion of 2-AF to inactive form by the juice. however the longer 2-AF and S-9 mix were contacted before addition of the juice, the stronger the microbial mutagenisity of 2-AF was, and after addition of the juice, the mutagenicity was decreased rapidly. It seems that some components in the juice act as inhibitor of a enzyme in S-9 mix, and block the conversion of 2-AF to the ultimate mutagen.
In this paper, we have developed base-calling error detection program and algorithm which show the list of the genes or sequences that are suspected to contain base-calling errors. Those programs detect dubious bases in a few aspects in the process of microbial genome project. The first module detects base-calling error from the Phrap file by using contig assembly information. The second module analyzes frame shift mutation if it is originated from real mutation or artifact. Finally, in the case that there is control microbial genome annotation information, the third module extracts and shows the candidate base-calling error list by comparative genome analysis method.
The xynA gene encoding an alikali-tolerant endo-1,4-${\beta}$-xylanase (XYN) was cloned from the alkalophilic Bacillus pumilus A-30. The nucleotide sequence of a 974-bp DNA fragment containing the xynA was determined. An ORF of 684 nucleotides that encoded a protein of 228 amino aicds was detected. Asparagine-71 of XYN from B. Pumilus A-30 showed to be highly conservative in alkaline xylanases of family G/11, upon comparing the amino acid sequences of 17 family G/11 xylanases. Site-directed mutation of N71D of the xynA gene resulted in a decrease of 12.4% in the specific acitivity and a significant decline in the enzyme activity in the alkaline pH range.
Physical sterilization methods using ultraviolet radiation and ionizing radiation such as gamma ray and electron beam are applied in various industry fields due to disinfection effects and economic efficiency but may also cause microbial mutation. In this research, Salmonella enterica and Escherichia coli strains were treated with ionizing and ultraviolet radiation and their survival rate, mutation rate, and DNA damage were studied to evaluate the genetic safety. The survival rate of the strains decreased drastically as the irradiation dose of ultraviolet ray, gamma ray, and electron beam increased, and over 90% of the strain was exterminated at a dosage of $0.40{\sim}25.06mJ/cm^3$, 0.11~0.22 kGy, 0.14~0.53 kGy respectively. In SOS / umu-test, genotoxicity causing DNA damage was identified in all samples. In Ames test, back-mutation rate increased to $3.82{\times}10^{-4}$ and $9.84{\times}10^{-6}$ respectively when exposed to ultraviolet ray and gamma ray. At exposure to ultraviolet ray, gamma ray, and electron beam with dosage of over 99.99% extinction rate of S. enterica TA100, back-mutation rate increased 347 times, 220 times, 0.6 times respectively to the spontaneous back-mutation rate. Rifampicin resistance mutation rate of E. coli CSH100 exposed to ultraviolet ray, gamma ray, and electron beam was $2.46{\times}10^{-6}$, $1.66{\times}10^{-6}$, $4.12{\times}10^{-7}$ respectively. Therefore, gamma radiation is effective in microorganism control from the perspective of disinfection and electron beam has the advantage of sterilizing with little DNA damage and bacterial mutation.
Park, Inshik;Kim, Eun-Ae;Bang, Keuk-Seung;Kim, Seok-Hwan;Kim, Gi-Nahm;Lee, Min-Kyung;Kil, Ji-Oeun
Preventive Nutrition and Food Science
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v.6
no.1
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pp.79-81
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2001
Deoxynucleoside kinases exist as heterodimeric pairs specific for deoxyadenosine/deoxyguanosine kinase (dAK/dGK) and deoxyadenosine/deoxycytidine kinase (dAK/dCK). The aspartic acid-84 in dGK was mutated to alanine, asparagine and glutamic acid by site-directed mutagenesis. The mutation resulted in a drastic decease in dGK activity compared to the unmodified cloned enzyme while it increased production of dAK activity. The mutated dak/dgk genes, which synthesize tandem deoxyadenosine/deoxyguanosine kinase, were inserted back to the Lactobacillus acidophilus and Lactococcus lactis by electroporation to determine the effect of site-directed mutation of he enzymes on the microbial growth. However, no significant change was observed in cell growth and lactic acid production between wild type and mutant lactic acid bacteria.
Four series (S, M, R, and W) of Alternaria longipes isolates were obtained based on consecutive selection with Dimethachlon (Dim) and ultraviolet irradiation. These isolates were then characterized according to their tolerance to Dim, sensitivity to osmotic stress, and phenotypic properties. All the selected Dim-resistant isolates showed a higher osmosensitivity than the parental strains, and the last generation was more resistant than the first generation in the M, R, and W series. In addition, the changes in the Dim resistance and osmotic sensitivity were not found to be directly correlated, and no distinct morphologic characteristics were found among the resistant and sensitive isolates, with the exception of the resistant isolate K-11. Thus, to investigate the molecular basis of the fungicide resistance, a group III two-component histidine kinase (HK) gene, AlHK1, was cloned from nineteen A. longipes isolates. AlHK1p was found to be comprised of a six 92-amino-acid repeat domain (AARD), HK domain, and response regulator domain, similar to the Os-1p from Neurospora crassa. A comparison of the nucleotide sequences of the AlHK1 gene from the Dim-sensitive and -resistant isolates revealed that all the resistant isolates contained a single-point mutation in the AARD of AlHK1p, with the exception of isolate K-11, where the AlHK1p contained a deletion of 107 amino acids. Moreover, the AlHK1p mutations in the isolates of each respective series involved the same amino acid substitution at the same site, although the resistance levels differed significantly in each series. Therefore, these findings suggested that a mutation in the AARD of AlHK1p was not the sole factor responsible for A. longipes resistance to dicarboximide fungicides.
The biocontrol rhizobacterium Pseudomonas sp. M18 can produce two kinds of antibiotics, namely pyoluteorin (Plt) and phenazine-1-carboxylic acid (PCA), and is antagonistic against a number of soilborne phytopathogens. In this study, a luxR-type quorum-sensing regulatory gene, vqsR, was identified and characterized immediately downstream of the Plt gene cluster in strain MI8. A vqsR-inactivated mutant led to a significant decrease in the production of Plt and its biosynthetic gene expression. However, this was restored when introducing the vqsR gene by cloning into the plasmid pME6032 in trans. The vqsR mutation did not exert any obvious influence on the production of PCA and its biosynthetic gene expression and the production of N-acylhomoserine lactones (C4 and C8-HSLs) and their biosynthetic gene rhlI expression. Accordingly, these results introduce VqsR as a regulator of Plt production in Pseudomonas spp., and suggest that the regulatory mechanism of vqsR in strain M18 is distinct from that in P. aeruginosa. In addition, it was demonstrated that vqsR mutation did not have any obvious impact on the expression of Plt-specific ABC transporters and other secondary metabolic global regulators, including GacA, RpoS, and RsmA.
Laelapinae mites are involved in transmission of microbial diseases between wildlife and humans, with an impact on public health. In this study, 5 mite members in the subfamily Laelapinae (laelapin mites; LM) were morphologically identified by light microscopy, and the phylogenetic relationship of LM was analyzed in combination with the sequence information of part of the LM cytochrome oxidase subunit I (cox1) gene. The morphological identification revealed that 5 mites belonged to the genera Laelaps and Haemolaelaps, respectively. Sequence analysis showed that the ratio of nonsynonymous mutation rate to synonymous mutation rate of LM was less than 1, indicating that the LM cox1 gene had undergone purifying selection. Phylogenetic analysis showed that the Laelapinae is a monophyletic group. The genera Haemolaelaps and Hyperlaelaps did not separated into distinct clades but clustered together with species of the genus Laelaps. Our morphological and molecular analyses to describe the phylogenetic relationships among different genera and species of Laelapinae provide a reference for the improvement and revision of the LM taxonomy system.
Palatinose is a disaccharide molecule which can substitute sucrose as a sweetening agent. A microbial fermentation technology has been developed to produce palatinose. In order to verify the safety of palatinose products, we have performed 1) bacterial reverse mutation test using Salmonella typhimurium TA1535, TA1537, TA98 and TA100, and 2) in vitro chromosome aberration test using Chinese Hamster Lung (CHL) cell. In bacterial reverse mutation test, both palatinose and palatinose syrup did not induce any significant increase of $His^{+}$ revertants up to 10 mg/plate. In in vitro chromosome aberration test, palatinose and palatinose syrup also did not cause any significant increase of chromosome aberrant cells up to 5 mg/mL. These results suggest that palatinose products have no mutagenic potential in these in vitro mutagenicity tests.
Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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2006.11a
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pp.127-130
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2006
Coenzyme Q10(CoQ10) is a biological quinine compound that is widely found in living organisms including yeast, plants, and animals. CoQ10 has two major physiological activities:(a)mitochondrial electron-transport activity and (b )antioxidant activity. Various clinical applications are also available: Parkinson's disease, Heart disease, diabetes. Because of its various application filed, the market size of CoQ10 is continuously expanding all over the world. A Japanese company, Nisshin Pharma Inc. is the first industrial producer of CoQ10(1974). CoQ10 can be produced by fermentation and chemical synthesis. In several companies, these two methods are used for the production of CoQ10:chemical synthesis - Yungjin, Daewoong, Nishin Parma; fermentation - Kaneka, Kyowa, Yungjin, etc. Researchs in microbial production of CoQ10 have several steps: screening of producing microorganisms, strain development, fermentation process, purification process, scale-up process, plant production. Several strategies are available for the strain development : Random mutation and screening, directed metabolic engineering. For the optimization of fermentation process, various conditions (nutrient, aeration, temperature, culture type, etc.) are considered. Purification is one of the most important step because the quality of final products entirely depends on its purity. The production cost will be reduced and the quality of the CoQ10 will be impoved by continuous researches in strain development, fermentation process, purification process.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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