This study was conducted to examine the stages showing the antimutagenic effects on the microbial mutation by addition of the juice extracted from small water dropwort. It was not able to find out the signal showing the genic derepression or change of gene repair system by addition of the juice. And it was hardly possible to expect the conversion of 2-AF to inactive form by the juice. however the longer 2-AF and S-9 mix were contacted before addition of the juice, the stronger the microbial mutagenisity of 2-AF was, and after addition of the juice, the mutagenicity was decreased rapidly. It seems that some components in the juice act as inhibitor of a enzyme in S-9 mix, and block the conversion of 2-AF to the ultimate mutagen.
미생물 유전체 프로젝트를 수행하는 과정에서 발생하는 base-calling 오류를 포함하는 것으로 의심되는 유전자나 염기서열의 리스트를 보여 주는 프로그램을 개발하였다. 이 프로그램의 모듈들은 base-calling 오류로 의심되는 염기들의 후보군을 유전체 프로젝트를 수행하는 주요 단계에서 감지할 수 있도록 하였다. 이들 프로그램들은 초기 단계에서는 Phrap 파일에 존재하는 contig assembly 정보를 이용하여 base-calling 오류를 감지하는 모듈, 중간 단계에서는 상동성 검색 결과물로부터 frame skift 돌연변이의 진위 유무를 분석할 수 있는 모듈, 마지막 단계에서는, 이미 발표된 미생물 유전체와 같은 종으로부터 유래된 균주에 대한 유전체 프로젝트를 수행할 경우, 비교유전체 분석 기법을 활용하여 base-calling 오류 가능성이 높은 서열의 후보군을 추출하여 해당서열의 크로마토그램파일을 유전체 연구자가 볼 수 있는 모듈로 구성되어 있다.
The xynA gene encoding an alikali-tolerant endo-1,4-${\beta}$-xylanase (XYN) was cloned from the alkalophilic Bacillus pumilus A-30. The nucleotide sequence of a 974-bp DNA fragment containing the xynA was determined. An ORF of 684 nucleotides that encoded a protein of 228 amino aicds was detected. Asparagine-71 of XYN from B. Pumilus A-30 showed to be highly conservative in alkaline xylanases of family G/11, upon comparing the amino acid sequences of 17 family G/11 xylanases. Site-directed mutation of N71D of the xynA gene resulted in a decrease of 12.4% in the specific acitivity and a significant decline in the enzyme activity in the alkaline pH range.
감마선, 전자빔 등과 같은 전리방사선과 자외선을 이용하는 물리적 멸균방법은 살균 효과와 경제성이 우수하므로 다양한 산업분야에서 사용되고 있으나, 미생물의 돌연변이를 유발하는 요인으로 작용할 수 있다. 본 연구에서는 전리방사선 및 자외선의 유전학적 안전성을 평가하기 위해서 Salmonella enterica와 Escherichia coli 균주에 자외선, 감마선, 전자빔을 조사한 후에 생존율, 돌연변이율, DNA 손상 효과를 조사하였다. 자외선, 감마선, 전자빔의 조사선량이 증가함에 따라 시험 균주의 생존율이 모두 급격히 감소하였으며, 90% 이상이 사멸되는 조사선량은 각각 $0.40{\sim}25.06mJ/cm^3$, 0.11~0.22 kGy, 0.14~0.53 kGy 이었다. SOS/umu-test에서는 자외선, 감마선, 전자빔에 노출된 모든 시료에서 DNA 손상을 유발하는 유전독성이 확인되었다. Ames test에서는 자외선과 감마선에 노출된 후에 복귀 돌연변이율이 각각 $3.82{\times}10^{-4}$, $9.84{\times}10^{-6}$까지 증가하였다. S. enterica TA100의 사멸율이 99.99% 이상 되는 선량의 자외선, 감마선, 전자빔에서의 복귀 돌연변이율은 각각 자연돌연변이율 대비 347배, 220배, 0.6배 증가하였다. E. coli CSH100 균주를 자외선, 감마선, 전자빔에 노출시킨뒤에 조사한 리팜피신내성 돌연변이율은 각각 $2.46{\times}10^{-6}$, $1.66{\times}10^{-6}$, $4.12{\times}10^{-7}$ 이었다. 따라서 사멸효과의 관점에서는 감마선 처리가 미생물 제어에 효과적이라 할 수 있으며, 전자빔은 DNA 손상과 세균돌연변이를 적게 유발하며 사멸효과를 얻는 장점이 있다고 생각된다.
Park, Inshik;Kim, Eun-Ae;Bang, Keuk-Seung;Kim, Seok-Hwan;Kim, Gi-Nahm;Lee, Min-Kyung;Kil, Ji-Oeun
Preventive Nutrition and Food Science
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제6권1호
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pp.79-81
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2001
Deoxynucleoside kinases exist as heterodimeric pairs specific for deoxyadenosine/deoxyguanosine kinase (dAK/dGK) and deoxyadenosine/deoxycytidine kinase (dAK/dCK). The aspartic acid-84 in dGK was mutated to alanine, asparagine and glutamic acid by site-directed mutagenesis. The mutation resulted in a drastic decease in dGK activity compared to the unmodified cloned enzyme while it increased production of dAK activity. The mutated dak/dgk genes, which synthesize tandem deoxyadenosine/deoxyguanosine kinase, were inserted back to the Lactobacillus acidophilus and Lactococcus lactis by electroporation to determine the effect of site-directed mutation of he enzymes on the microbial growth. However, no significant change was observed in cell growth and lactic acid production between wild type and mutant lactic acid bacteria.
Four series (S, M, R, and W) of Alternaria longipes isolates were obtained based on consecutive selection with Dimethachlon (Dim) and ultraviolet irradiation. These isolates were then characterized according to their tolerance to Dim, sensitivity to osmotic stress, and phenotypic properties. All the selected Dim-resistant isolates showed a higher osmosensitivity than the parental strains, and the last generation was more resistant than the first generation in the M, R, and W series. In addition, the changes in the Dim resistance and osmotic sensitivity were not found to be directly correlated, and no distinct morphologic characteristics were found among the resistant and sensitive isolates, with the exception of the resistant isolate K-11. Thus, to investigate the molecular basis of the fungicide resistance, a group III two-component histidine kinase (HK) gene, AlHK1, was cloned from nineteen A. longipes isolates. AlHK1p was found to be comprised of a six 92-amino-acid repeat domain (AARD), HK domain, and response regulator domain, similar to the Os-1p from Neurospora crassa. A comparison of the nucleotide sequences of the AlHK1 gene from the Dim-sensitive and -resistant isolates revealed that all the resistant isolates contained a single-point mutation in the AARD of AlHK1p, with the exception of isolate K-11, where the AlHK1p contained a deletion of 107 amino acids. Moreover, the AlHK1p mutations in the isolates of each respective series involved the same amino acid substitution at the same site, although the resistance levels differed significantly in each series. Therefore, these findings suggested that a mutation in the AARD of AlHK1p was not the sole factor responsible for A. longipes resistance to dicarboximide fungicides.
The biocontrol rhizobacterium Pseudomonas sp. M18 can produce two kinds of antibiotics, namely pyoluteorin (Plt) and phenazine-1-carboxylic acid (PCA), and is antagonistic against a number of soilborne phytopathogens. In this study, a luxR-type quorum-sensing regulatory gene, vqsR, was identified and characterized immediately downstream of the Plt gene cluster in strain MI8. A vqsR-inactivated mutant led to a significant decrease in the production of Plt and its biosynthetic gene expression. However, this was restored when introducing the vqsR gene by cloning into the plasmid pME6032 in trans. The vqsR mutation did not exert any obvious influence on the production of PCA and its biosynthetic gene expression and the production of N-acylhomoserine lactones (C4 and C8-HSLs) and their biosynthetic gene rhlI expression. Accordingly, these results introduce VqsR as a regulator of Plt production in Pseudomonas spp., and suggest that the regulatory mechanism of vqsR in strain M18 is distinct from that in P. aeruginosa. In addition, it was demonstrated that vqsR mutation did not have any obvious impact on the expression of Plt-specific ABC transporters and other secondary metabolic global regulators, including GacA, RpoS, and RsmA.
Laelapinae mites are involved in transmission of microbial diseases between wildlife and humans, with an impact on public health. In this study, 5 mite members in the subfamily Laelapinae (laelapin mites; LM) were morphologically identified by light microscopy, and the phylogenetic relationship of LM was analyzed in combination with the sequence information of part of the LM cytochrome oxidase subunit I (cox1) gene. The morphological identification revealed that 5 mites belonged to the genera Laelaps and Haemolaelaps, respectively. Sequence analysis showed that the ratio of nonsynonymous mutation rate to synonymous mutation rate of LM was less than 1, indicating that the LM cox1 gene had undergone purifying selection. Phylogenetic analysis showed that the Laelapinae is a monophyletic group. The genera Haemolaelaps and Hyperlaelaps did not separated into distinct clades but clustered together with species of the genus Laelaps. Our morphological and molecular analyses to describe the phylogenetic relationships among different genera and species of Laelapinae provide a reference for the improvement and revision of the LM taxonomy system.
제일제당주식회사에서는 미생물발효법을 이용하여 palatinose를 대량생산하게 되었다. Palatinose 산물의 안전성을 확인하기 위하여 1) Salmonella typhimurium을 이용한 미생물복귀돌연변이시험, 2) Chinese Hamster Lung (CHL) 세포를 이용한 in vitro 염색체이상시험을 실시하였다. Palatinose 및 palatinose syrup은 미생물복귀돌연변이 시험에서 10 mg/plate의 용량까지 복귀돌연변이를 유발하지 않았으며, CHL 세포에서도 5 mg/mL 농도에서 염색체이상을 유발하지 않았다. 이 결과는 palatinose 산물들이 위의 in vitro 변이원성시험계에서 돌연변이원성을 나타내지 않음을 보여준다.
Coenzyme Q10(CoQ10) is a biological quinine compound that is widely found in living organisms including yeast, plants, and animals. CoQ10 has two major physiological activities:(a)mitochondrial electron-transport activity and (b )antioxidant activity. Various clinical applications are also available: Parkinson's disease, Heart disease, diabetes. Because of its various application filed, the market size of CoQ10 is continuously expanding all over the world. A Japanese company, Nisshin Pharma Inc. is the first industrial producer of CoQ10(1974). CoQ10 can be produced by fermentation and chemical synthesis. In several companies, these two methods are used for the production of CoQ10:chemical synthesis - Yungjin, Daewoong, Nishin Parma; fermentation - Kaneka, Kyowa, Yungjin, etc. Researchs in microbial production of CoQ10 have several steps: screening of producing microorganisms, strain development, fermentation process, purification process, scale-up process, plant production. Several strategies are available for the strain development : Random mutation and screening, directed metabolic engineering. For the optimization of fermentation process, various conditions (nutrient, aeration, temperature, culture type, etc.) are considered. Purification is one of the most important step because the quality of final products entirely depends on its purity. The production cost will be reduced and the quality of the CoQ10 will be impoved by continuous researches in strain development, fermentation process, purification process.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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