The mechanisms and metabolic products involved in the degradation of an organophosphate insecticide, diazinon, were studied in submerged paddy soil under the laboratory condition at $30^{\circ}C$. Diazinon abatement in non-sterilized soil was more rapid than indicating microbial participation in diazinon in soil. One-half of the original applications was lost in 2 days and less than 5% remained after 7 days. During the same period, dizinon applications increased tha microbial populations in accordance with the monooxygenase and esterase activities in soil. These results suggest that the microbiological factors develop in soil following diazinon application. The esterase and monooxygenase-catalyzing degradation products of diazinon were isolated and tentatively identified by mass spectrometryas 2-isopropyle-6-methyl-4-hydroxy pyrimidine, diazoxon, hydroxydiazinon, and sulfotep.
The microbial degradation of $poly-{\beta}-hydroxybutyrate$ (PHB) films was studied in soil microco는 incubated at a constant temperature of 2, 10, 20, 30 and $40^{\circ}C$ for up to 49 days. The degradation rate measured through loss of weight was enhanced by incubation at a higher temperature. At the soil temperature $40^{\circ}C$, $poly-{\beta}-hydroxybutyrate$ was rapidly degraded at a decay rate of 3.5% weight loss per day. The degradation of $poly-{\beta}-hydroxybutyrate$ did not affected significantly the chemical properties of soils such as pH and electric conductivity. However, microbial activity of soil in terms of dehydrogenase activity was increased by the degradation of $poly-{\beta}-hydroxybutyrate$.
Pseudomonas aeruginosa F722 produces a biosurfactant (BS) during its degradation of carbon and hydrocarbon compounds. The culture conditions for upgrading the biosurfactant productivity were investigated. The concentration of the biosurfactant produced by P. aeruginosa F722 was 0.78 g/L in C-medium; however, this increased to 1.66 g/L in BS medium, which was experimentally adjusted to optimal conditions. $NaNO_{2}$ was found to be most effective for microbial growth, with an $O.D_{600nm}$ of 1.18 for 0.1 % $NaNO_{2}$. Microbial growths, according to the $O.D_{600nm}$ were 2.53, 2.68, 2.89, and 2.87 for glucose, glycerol, $n-C_{10},\;and\;n-C_{22}$, respectively. Clear zone diameters (cm), indicating biosurfactant activity, were 9.0, 8.8, 5.7, and 8.5 for glucose, glycerol, $n-C_{10},\;and\;n-C_{22}$, respectively. Microbial growth was not consistent with the biosurfactant activity. The best biosurfactant activity was found with a C/N ratio of 20. Under optimal culture condition, the average surface tension decreased from 70 to 30 mN/m after 5 days. With aeration of 1.0 vvm, the biosurfactant produced increased to 1.94 g/L (up to 20%) compared to that of 1.66 g/L with no aeration. With aeration, the velocities of glucose degradation during both the log and stationary growth phases increased from 0.25 and $0.18\;h^{-1}$ to 0.33 and $0.29\;h^{-1}$, respectively, and the time for the culture to arrive at the maximum clear zone diameter became shorter, from 80 down to 60 h with no aeration.
A microbial consortium, TMC7, was enriched for the degradation of natural lignocellulosic materials under high temperature. TMC7 degraded 79.7% of rice straw during 15 days of incubation at $65^{\circ}C$. Extracellular xylanase was effectively secreted and hemicellulose was mainly degraded in the early stage (first 3 days), whereas primary decomposition of cellulose was observed as of day 3. The optimal temperature and initial pH for extracellular xylanase activity and lignocellulose degradation were $65^{\circ}C$ and between 7.0 and 9.0, respectively. Extracellular xylanase activity was maintained above 80% and 85% over a wide range of temperature ($50-75^{\circ}C$) and pH values (6.0-11.0), respectively. Clostridium likely had the largest contribution to lignocellulose conversion in TMC7 initially, and Geobacillus, Aeribacillus, and Thermoanaerobacterium might have also been involved in the later phase. These results demonstrate the potential practical application of TMC7 for lignocellulosic biomass utilization in the biotechnological industry under hot and alkaline conditions.
Whole lupinus albus seeds were pressure toasted at temperatures of 100, 118 and $136^{\circ}C$ for 3, 7, 15 and 30 min to study rumen degradation and post-rumen digestion and to determine optimal heating conditions for the Dutch dairy feed industry. In sacco nylon bag and mobile bag techniques were employed for rumen and intestine incubations to determine ruminal degradation characteristics and intestinal digestion of crude protein (CP) in 4 lactation rumen cannulated and 4 lactating intestinal cannulated Dutch dairy cows fed 47% hay and 53% concentrate according to Dutch dairy requirements. Measured rumen degradation characteristics were soluble fraction (S), undegradable fraction (U), potentially degradable fraction (D), lag time (T0) and rate of degradation (Kd) of insoluble but degradable fraction. Percentage bypass feed protein (BCP), ruminal microbial protein synthesized based on available nitrogen (N_MP) and that based on available energy (E_MP), true protein supplied to the small intestine (TPSI), truly absorbed BCP (ABCP), absorbed microbial protein (AVP) in the small intestine, endogenous protein losses in the digestion (ENDP), true digested protein in the small intestine (TAP or DVE in Dutch) and degraded protein balance (PDB or OEB in Dutch) were totally evaluated using the new Dutch DVE/OEB System. Pressure toasting decreased (p<0.001) rumen degradability of CP. It reduced S (p<0.05) and Kd (p=0.06), increased D (p<0.05) and U (p<0.01) but did not alter T0 (p>0.05), thus resulting in dramatically increased BCP (p<0.001) with increasing time and temperature from 73.7 (raw) up to 182.5 g/kg DM ($136^{\circ}C/15min$). Although rumen microbial protein synthesized based on available energy (E_MP) was reduced, true protein (microbial and bypass feed protein) supplied to the small intestine (TPSI) was increased (p<0.001) from 153.1 (raw) to 247.6 g/kg DM ($136^{\circ}C/15min$). Due to digestibility of BCP in the intestine not changing (p>0.05) average 87.8%, the absorbed BCP increased (p<0.001) from 62.3 (raw) to 153.7 g/kg DM ($136^{\circ}C/15min$). Therefore DVE value of true digested protein in the small intestine was significantly increased (p<0.001) from 118.9 (raw) to 197.0 g/kg DM ($136^{\circ}C/15min$) and OEB value of degraded protein balance was significantly reduced (p<0.001) from 147.2 (raw) to 63.1 g/kg DM ($136^{\circ}C/15min$). It was concluded that pressure toasting was effective in shifting degradation of CP of lupinus albus from the rumen to small intestine without changing intestinal digestion. Further studies are required on the degradation and digestion of individual amino acids and on the damaging effects of processing on amino acids, especially the first limiting amino acids.
Proceedings of the Korean Society of Soil and Groundwater Environment Conference
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2005.04a
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pp.28-30
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2005
Because of high population diversity in soil microbial communities, it is difficult to accurately assess the capability of biodegradation of toxicant by microbes in soil and sediment. Identifying biodegradative microorganisms is an important step in designing and analyzing soil bioremediation. To remove non-important noise information, it is necessary to selectively enrich genomes of biodegradative microorganisms fromnon-biodegradative populations. For this purpose, a stable isotope probing (SIP) technique was applied in selectively harvesting the genomes of biphenyl-utilizing bacteria from soil microbial communities. Since many biphenyl-using microorganisms are responsible for aerobic PCB degradation In soil and sediments, biphenyl-utilizing bacteria were chosen as the target organisms. In soil microcosms, 13C-biphenyl was added as a selective carbon source for biphenyl users, According to $13C-CO_2$ analysis by GC-MS, 13C-biphenyl mineralization was detected after a 7-day of incubation. The heavy portion of DNA(13C-DNA) was separated from the light portion of DNA (12C-DNA) using equilibrium density gradient ultracentrifuge. Bacterial community structure in the 13C-DNAsample was analyzed by t-RFLP (terminal restriction fragment length polymorphism) method. The t-RFLP result demonstates that the use of SIP efficiently and selectively enriched the genomes of biphenyl degrading bacteria from non-degradative microbes. Furthermore, the bacterial diversity of biphenyl degrading populations was small enough for environmental genomes tools (metagenomics and DNA microarrays) to be used to detect functional (biphenyl degradation) genes from soil microbial communities, which may provide a significant progress in assessing microbial capability of PCB bioremediation in soil and groundwater.
Biodegradation of an explosive compound, glyceryl trinitrate (GTN), was studied with a denitrifying microbial culture grown in a sequencing batch reactor and a GTN acclimated denitrifying culture. The GTN acclimated culture, which were fed on GTN for 1 month, degraded GTN regioselectively via denitration on C1 position as compared to C2 position denitration by denitrifying culture that has never been exposed to GTN. Accumulation of two isomeric glyceryl dinitrates (GDNs) in both culture medium suggests that GDN denitration is the rate-limiting step in GTN biodegradation. The first order GTN degradation rate normalized to cell concentration of the acclimated culture was calculated to be 0.045 (${\pm}0.002$) L/g-hr. Increasing concentration of electron acceptor(nitrate) resulted in discouraged GTN degradation. According to microbial community analysis, prolonged GTN exposure resulted in 25% increase in the genus level of the GTN acclimated culture with the disappearance of two dominating denitrifying microbial species of Methyloversatilis universalis and Hyphomicrobium zavarzinii in the denitrifying culture.
34 strains were isolated from dyeing wastewater in order to improve treatment efficiency of dyeing wastewater containing PVA. Two strains of them were finally selected through the PVA degrading test, and identified as Microbacterium barkeri LCa and Paenibacillus amylolyticus LCb. As a result, optimal conditions for microbial growth and PVA degradation were 30$^{\circ}C$, neutral pH, starch as a carbon source, and peptone as a nitrogen source. And it was concluded that these two strains have good ability for PVA degradation. And 90% over PVA was degraded by single culture as well as a mixed culture of 2 different strains.
To isolate a nonylphenol (NP)-degrading bacterium, we isolated a single colony from the NP-degrading microbial consortium SW-3, which was previously isolated from an aqueous environment. Ten colonies that exhibited different cell morphologies were isolated and the strains were named SW-3-A, -B, -C, -D, -E, -F1, -F2, -G, -H, and -I. The ability of isolates to degrade NP was evaluated by kinetic analysis by the constant of NP degradation rate ($k_1$) and the half-life time of NP degradation ($t_{1/2}$). SW-3-F1, -F2, -G, and -I strains were superior at degrading NP. The $k_1$ and $t_{1/2}$ values of the four strains were sixfold higher and one-sixth lower, respectively, than those of the consortium strain. Additionally, SW-3-F1, -G, and -I strains were tested for their ability to degrade NP during coculture. NP degradation by coculture with a combination of all three strains was inferior to that of culture conducted with single isolates, suggesting that the three strains are antagonistic toward each other during NP degradation.
Since the enzymatic degradation of microbial poly(hydroxylalkanoate)s (PHAs), such as poly[(R)-3-hydroxybutyrate] and poly[(R)-3-hydroxybutyrate-co-3-hydroxyvalerate] initially occurs by a surface erosion process, their degradation behaviors can be controlled by the change of surface property. In order to control the rate of enzymatic degradation, plasma modification technique was applied to change the surface property of microbial PHAs. The surface hydrophobic and hydrophilic properties of PHA films were introduced by $CF_3H$ and $O_2$ plasma exposures, respectively. The enzymatic degradation was carried out at $37^{\circ}C$ in 0.1 M potassium phosphate buffer (pH 7.4) in the presence of an extracellular PHB depolymerase purified from Alcaligenes facalis T1. The results showed that the significant retardation of initial enzymatic erosion of $CF_3H$ plasma-treated PHAs was observed due to the hydrophobicity and the enzyme inactivity of the fluorinated surface layers while the erosion rate of $O_2$ plasma-treated PHAs was not accelerated.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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