Chaudhuri, Rituparna Kundu;Pal, Amita;Jha, Timir Baran
Plant Biotechnology Reports
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v.2
no.3
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pp.213-218
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2008
Swertia chirata is an endangered gentian species that prefers to grow at higher altitudes. This ethnomedicinal herb is known primarily for its bitter taste caused by the presence of important phytochemicals that are directly associated with human health benefits. Due to a continuous loss of habitat and inherent problems of seed viability and seed germination, alternative strategies for propagation and conservation are urgently required to prevent the possible extinction of this species. We have formulated a reproducible protocol for the rapid propagation and conservation of this plant using leaves taken from in vitro shoot cultures. Direct induction of more than seven shoot buds per explant was achieved for the first time when the explants were placed on MS medium supplemented with $2.22{\mu}M$ N-6-benzyladenine, $11.6{\mu}M$ kinetin, and $0.5{\mu}M$${\alpha}-naphthalene$ acetic acid. Direct organogenesis was noted exclusively from the adaxial surface of the basal segments of leaves. Leaves closer to the apical meristem were more responsive than those farther away from the meristem. Plants raised through direct organogenesis were evaluated for their clonal fidelity by chromosomal analysis and DNA fingerprinting. Complete plants were successfully transferred to the field condition and produced viable seeds. Given the enormous potential of this age-old medicinal plant in terms of potential health-benefitting drugs, this protocol can be used for commercial propagation purposes and to initiate future genetic improvement studies.
Proceedings of the Botanical Society of Korea Conference
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1996.07a
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pp.10-18
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1996
Recently, we have reported a rice MADS-box gene, OsMADS1, as a molecular factor triggering flower formation; this has been well studied in a heterologous system (Chung et al., 1994). In order to study whether the OsMADS1 homolog exists in other plant species, the OsMADS1 cDNA was used as a probe to screen a tobacco cDNA library, and a potential homolog, NtMADS3, was isolated. Sequence analysis revealed that the gene shares 56.1% identity in whole amino acids with OsMADS1. Like OsMADS1, the NtMADS3 gene starts to express at a very early stage of flower development, and the expression continues up to flower maturation. In the tobacco flower, the gene is expressed in whorl 2,3 and 4, corresponding to the petal, stamen, and carpel, respectively. Upon ectopic expression in the homologous system, NtMADS3 caused a trasition from inflorescence shoot meristem into floral meristem, reducing flowering time dramatically. These phenotypes strongly suggest the NtMADS3 gene is the OsMADS1 homolog of tobacco. Hybrids between the OsMADS1 and the NtMADS3 plants were also generated. The hybrids flowered even earlier than these two transgenic plants. The detailed studies are discussed here.
Structures of the adventitious root meristem induced from callus culture of tobaco (Nicotiana tabacum cv. NC 82) leaves were investigated by light and transmission electron microscopy. Structural differences between in vitro root and callus cells were also examined by the microscopy. The submicroscopic features of the in vitro root cells were as follows. Intercellular spaces were not developed and nuclei with two nucleoli were observed occasionally. Plasmodesmate were found in groups or sing1y on transverse and longitudinal walls. Amyloplast solely filled with starch grains, with one to five electron - dense bands, was surrounded by single membrane. in the callus cells, vacuolization of central part in the cytoplasm having mitochondria with swollen cristae and starch grains like those of in vitro root cells was a distinct feature. Vesicles which were found between cell wall and plasma membrane may be arisen by a process of protoplasmic invagination. By comparing of ultrastructures between the cells of callus and in vitro roots we found that the distinct differences lied on thickened cell walls and hypertrophed vacuoles in the former, and less thickened cell walls and several small vacuoles in the later.
Immature zygotic embryos (up to 4mm in length) were cultured on MS medium supplemented with 0.5 to 8mg/L 2,4-D. Up to 87% of them formed somatic embryos on the plumule without producing an intervening callus. The site of somatic embryo formation was confirmed by culturing plumule explants, which consisted of shoot apical meristem domes with 1 or 2 leaf primordia excised from 2-week-old seedlings. When the concentration of 2,4-D was increased over 4 mg/L, the plumule explants produced nonembryogenic calli only, whereas the distal end of the cotyledons directly formed numerous somatic embryos at frequencies of up to 60%. Upon transfer onto MS basal medium,2 out of 15 somatic embryos converted into plantlets. The plantlets were potted to a soil mixture and grown to maturity in a phytotron.
In plants, a shoot apex has a small region known as the shoot apical meristem (SAM) having a group of dividing (initiating) cells. The SAM gives rise to all the groundabove structures of plants throughout their lifetime, and thus it plays important role in growth and development of plants. This review describes theories to explain the SAM organization and function developed over the last 250 years. Since in 1759 German botanist C. F. Wolff has described firstly the SAM, in 1858 Swiss botanist C. N${\ddot{a}}$geli proposed the apical cell theory from the observation of a large single apical cell in the SAM of seedless vascular plants: however, this view was recognized to be unsuitable to seed plants. In 1868, German botanist J. Hanstein suggested the histogen theory: this concept subdividing the SAM into dermatogen, periblem, and plerome was unable to generally apply to seed plants. In 1924, German botanist A. Schmidt proposed the tunica-corpus theory from the examination of angiosperm SAM in which two parts show different planes of cell division: this theory was proved to be not suitable to gymnosperm SAM, not have stable surface tunica layer. In 1938, American botanist A. Foster described zones in gymnosperm SAM based on the cytohistologic differentiation and thus called it a cytohistological zonation theory. With works by E. Gifford, in 1954, this zonation pattern was demonstrated to be also applicable to angiosperm SAM. As another theory, in 1952 French botanist R. Buvat proposed the m${\acute{e}}$rist${\grave{e}}$me d'attente (waiting meristem) theory: however, this concept was confuted because of its negation of function during vegetative growth phase to central initial cells. Rescent studies with Arabidopsis thaliana have found that formation and maintenance of the SAM are under the control of selected genes: SHOOTMERISTEMLESS (STM) gene forms the SAM, and WUSCHEL (WUS) and CLAVATA (CLV) genes function in maintaining the SAM; signaling between WUS and CLV genes act through a negative feedback loop.
Kim, Hye Jin;Lee, Jong Nam;Lim, Hak Tae;Yeoung, Young Rok
Horticultural Science & Technology
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v.32
no.1
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pp.100-104
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2014
This study was conducted to determine the optimal MS medium strength to improve sprouting rate of apical meristem of strawberry 'Seolhyang' in vitro. Strawberry apical meristems at size (0.2 mm to 0.3 mm) with leaf primordials were cultured on the MS media with four strength levels, ($1/4{\times}$, $1/3{\times}$, $1/2{\times}$, and $1{\times}$) and the sprouting rate and growth characteristics were evaluated after eight weeks after cultivation. Shoot rate of 'Daewang' apical meristems was 93.6%whereas 'Seolhyang' apical meristems were sprouted with 31.6% on $1{\times}$ MS medium strength. Different sprouting rates were observed in 'Seolhyang' apical meristem with 31.6% in $1{\times}$ medium, 75.0% in $1/2{\times}$ medium, and 94.4% in $1/3{\times}$ medium. The sprouting rate was improved with the decrease of medium strength, but the shoot rate in $1/4{\times}$ medium decreased up to 54.5%. Shoot length was 0.9 cm in $1{\times}$ medium, 1.2 cm in $1/2{\times}$ medium, 1.6 cm in $1/3{\times}$ medium, and 1.9 cm in $1/4{\times}$ medium. Shoot length was longer as medium strength decreased and numbers of leaves and roots were not significant differences among the medium strengths. As a result, sprouting rate was highest and plant growth was best in $1/3{\times}$ MS medium compared to the others.
This study was conducted to investigate somatic embryogenesis capacity using callus derived from bud meristems in sweetpotato. Shoot apical meristem explants $(height:150{\mu}m;base:\;350{\mu}m)$were cultured on MS medium supplemented with 1 mg/L 2/4-D. Embryogenic callus were observed in five cultivars when their shoot apices were cultured on MS medium supplements with 1 mg/L 2,4-D. After 6 weeks of culture, greater than 80% of the survived explants produced embryogenic calli and the calli gave rise to somatic embryos at frequencies of 72% (Yulmi), 60% (Shinhwangmi), 78% (Geonmi), 70% (KoKei 14), 40% (Sinjami). The regenerated plants developed into whole plantlets after they were transferred onto the fresh hormon-free MS medium of 74% (Yulmi), 82% (Shinhwangmi), 86% (Geonmi), 74% (Kokei 14), 41% (Sinjami) respectively.
Kim, Mi Young;Chun, Jae An;Cho, Kang Hee;Park, Seo Jun;Kim, Se Hee;Lee, Han Chan
Journal of Plant Biotechnology
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v.44
no.4
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pp.379-387
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2017
Various sizes (0.2 ~ 1.2 mm) and developmental stages (referred to as Stage 1 ~ 3) of apical and lateral meristems were excised, together or separately, directly from dormant buds of apple 'Hongro'. They were mixed infected by Apple scar skin viroid (ASSVd), Apple chlorotic leaf spot virus (ACLSV), Apple stem pitting virus (ASPV) and Apple stem grooving virus (ASGV), which are major viruses attacking apples. A total of 31 callus lines (> 10 mm in diameter) were obtained by culturing the explants on Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with 3% sucrose, 3.0 mg/L benzyladenine (BA) and 0.1 mg/L indole-3-butyric acid (IBA), and they were subjected to RT-PCR analysis for virus detection. A high rate of virus elimination (expressed as the percentage of calli that did not amplify during RT-PCR, i.e., RT-PCR negative calli per total number of calli obtained) was achieved for ACLSV (100%), ASSVd (93.7%), and ASPV (93.7%), whereas it was only 25.8% for ASGV. ASPV was detected in the presence of 2 ~ 3 bracts. Simultaneous virus elimination of ASSVd, ASPV, ACLSV, and ASGV occurred during the meristem culture, in which the early stages of the dormant buds (Stage 1) were used, because ASGV was mostly eliminated during that stage. The results of the present study will be valuable for the production of virus-free apple trees.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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