• 대한수의학회지
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• 제33권2호
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• pp.327-336
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• 1993

Present experiments were undertaken in order to clarify the effect of splenectomy on the hematology and marrow megakaryocyte picture and to know the genesis of postsplenectomy thrombocytosis in dogs. Six mongrel dogs weighing 8.5~18㎏ were used, of which three were splenectomized and the other three were laparotomized for comparison. Erythrocyte count, total and differential leukocyte counts, thrombocyte count and packed cell volume measurement were made using the blood samples. In addition, bone marrow samples obtained from the femur at 7th and 23rd day of the operation were examined for the number per low-power field, the diameter, and the distribution frequency of the megakaryocyte. From these experiments, following results were obtained : Erythrocyte count and packed cell volume showed significant decrease beginning on the 15th day of splenectomy. Total and differential leukocyte counts showed marked increase for the first 2 days of postsplenectomy. The thrombocyte count of splenectomized dogs increased from the 2nd day of the operation, reached to the peak count on the 15th day, and returned to the preoperation count by the 28th day. The megakaryocyte count per low-power field of the biopsied preparation increased in according to the increase in thrombocyte count. The megakaryocyte diameter of splenectomized dog showed no increase on the 7th or 23rd day of the operation. However, the distribution frequency of the larger megakaryocyte was higher in the splenectomized dogs than in the laparotomized dogs. The total plasma protein concentration showed no significant change after splenectomy or laparotomy. From these results, it may be concluded that the postsplenectomy thrombocytosis results from the increased megakaryocytopoesis or the activated thrombocytopoesis of the marrow megakaryocytes.

• Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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• 제2권3호
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• pp.509-510
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• 1989

• Journal of Yeungnam Medical Science
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• 제8권2호
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• pp.209-216
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• 1991

Acute Megakaryoblastic leukemia is a rare and rapidly fatal disease characterized by proliferation of megakaryocyte series and atypical megakaryocytes in the bone marrow. Acute Megakaryoblastic leukemia is suspicious when 1) megakaryocyte in peripheral blood, mixture of large and small mononuclear megakaryoblast in the bone marrow 2) cytoplasmic budding in blast 3) myelofibrosis (dense medullary overgrowth of reticulin fibers) 4) PAS(+), ANAE(+), SBB(-), peroxidase(-) and which is confirmed by platelet peroxidase oxidation on electromicroscope or monoclonal antibody. A case of aute megakaryoblastic leukemia was studied morphologically and monoclonal antibody.

• IMMUNE NETWORK
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• 제3권1호
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• pp.47-52
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• 2003

Background: The megakaryopoiesis and platelet production is regulated by several hematopoietc factors such as thrombopoietin (TPO), interleukin-11 (IL-11) and interleukin- 3 (IL-3). IL-11 is a potent stimulator of megakaryopoiesis in vivo, and acts primarily as a megakaryocyte maturation factor in vitro and it can act synergistically with IL-3 and TPO. We performed this study to investigate the effects of recombinant human IL-11 (rhIL-11) with other hematopoietic factors on megakaryocyte colony formation in vitro. Methods: CD34+ cells were separated from umbilical cord blood and megakaryocyte colonies using MegaCult Assay Kit were cultured with rhIL-11, recombinant human IL-3 (rhIL-3), and recombinant human TPO (rhTPO) for 7 and 14 days. The number and percentage of CD34+ and CD41a+ cells were determined by flowcytometry. Results: The number of CD41a+ cells were $0.54{\pm}0.05{\times}10^4$ (rhIL-11 100 ng/ml), $5.32{\pm}0.23{\times}10^4$ (rhIL-3 100 ng/ml), and $8.76{\pm}0.15{\times}10^4$ (rhTPO 50 ng/ml) of total expanded cells during the culture of the purified CD34+ cells in liquid phase for 7 days. The number of CD41a+ cells were increased to $7.47{\pm}0.69{\times}10^4$ (rhIL-3+ rhIL-11), $11.92{\pm}0.19{\times}10^4$ (rhTPO+rhIL-11) of total expanded cells, respectively, during the culture of the purified CD34+ cells in liquid phase for 7 days in the presence of rhIL-11 (100 ng/ml). When the purified CD34+ cells were cultured in semisolid mediaincluding various concentration of rhIL-11, the megakaryocyte colonies were not formed. When the purified CD34+ cells were cultured with rhIL-11 and rhTPO or with rhIL-11 and rhIL-3, the number of megakaryocyte colonies were increased compared with rhTPO or rhIL-3 alone. Conclusion: These results indicate that IL-11 exerts a potent proliferative activity to colony forming unit-megakaryocyte from human umbilical cord blood, and it acts with other hematopoietic factors synergistically.

• 한국동물학회지
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• 제39권1호
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• pp.12-20
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• 1996

K562 적혈구암 세포는 phorbol 12-myristate 13-acetate(PMA)에 의해서 대핵세포로 분화되고 gpIlla의 증가, megakaryocyte와 유사한 형태학적 변화로 특징지워진다. 또한 K562 세포는 dimethy1 sulfoxide(DMSO)나 butyrate와 같은 화학적 유도원에 의해 적혈구로 분화가 유도되고 동시에 헤모글로빈이 축척된다. 본 연구에서는 K562 세포에 대한 단일클론 항체를 생성하고 이를 이용하고 61 KDa의 표면항원을 동정하였다. 단클론항체 EK-2에 의해 인지되는 61 KDa의 표면항원은 sialic acide가 풍부해 당단백질로 사료되고, 그 epitope는 neuraminidase 절단과 peroxidase oxidation에 민감하며, 열처리에는 안정하다. K562 세포의 대핵세포로 분화시에는 61 KDa 표면항원의 발현은 증가하며, 적혈구로 분회시에는 그 발현이 감소한다. EK-2 단클론항체는 조혈세포의 분화 및 암화과정의 분자적 수준을 연구하기 위한 면역학적 probe로 이용 가능할 것으로 기대된다.

• Biomolecules & Therapeutics
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• 제31권2호
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• pp.210-218
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• 2023

Prostate cancer is the fifth leading cause of cancer-related mortality in men, primarily because of treatment resistance, recurrence, and metastasis. In the present study, we investigated the role of paracrine interleukin-8 (IL-8) in the antagonistic expression of IL-8 and androgen receptor (AR), and the contribution of IL-8 to prostate cancer aggressiveness. In hormone-responsive LNCaP cells that do not express IL-8, recombinant IL-8 treatment significantly increased expressions of IL-8, CXC chemokine receptor 2 (CXCR2), matrix metalloproteinase (MMP)-2/9, Snail, and vimentin. IL-8 treatment significantly decreased AR and E-cadherin expression. IL-8-induced gene expression changes were suppressed by navarixin, a CXCR1/2 inhibitor, and gallein, a Gβγ inhibitor. In PC-3 androgen-refractory prostate cancer cells, IL-8 knockdown reduced expressions of CXCR2, MMP-2/9, Snail, and vimentin, and increased AR and E-cadherin expressions at the mRNA and protein levels. Co-culture with MEG-01 human megakaryocytic cells secreting high levels of IL-8 induced gene expression changes in both LNCaP and PC-3 cells, similar to those induced by IL-8 treatment. The altered gene expressions were accompanied by significant activation of transcription factor Snail in LNCaP and PC-3 cells. Treatment with the CXCR blocker navarixin inhibited the invasion of PC-3 cells but not LNCaP cells. However, invasion induced by MEG-01 was inhibited by navarixin in both LNCaP and PC-3 cells. The collective findings demonstrate that IL-8 enhances CXCR2 expression, which antagonistically regulates AR expression. More importantly, through changes in IL-8/CXCR2-regulated gene expression, IL-8 induces antiandrogen therapy resistance and epithelial-mesenchymal transition in prostate cancer.

• Clinical and Experimental Pediatrics
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• 제45권2호
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• pp.247-255
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• 2002

목 적 : 태아 간세포는 면역학적으로 미숙하여 이식에 따른 거부반응이 잘 일어나지 않으므로 조혈모세포 이식, 특히 자궁내 이식의 좋은 공여세포로 이용할 수 있으나 아직 국내에서는 이를 위한 기초연구가 미미한 실정이다. 연구자는 태아 간 단핵세포를 이용하여 면역조직학적 염색과 체외배양 결과를 분석하여 태아 간의 거핵구 집락형성과 관련된 기초자료를 마련하고자 이 연구를 시행하였다. 방 법: 임신중절시 수집한 태아 간조직과 특발성 혈소판 감소성 자반증 및 범혈구 감소증 환아의 골수에서 단핵세포를 분리한 후 $MegaCult^{TM}-C$ 배지에서 12일간 배양 후 성장인자 첨가에 따른 거핵구 집락형성을 관찰하였고, 5일간의 Flask 배양 후 유세포 분석기를 이용하여 CD34, CD41 양성세포를 측정하였으며, methylcellulose 배지를 이용하여 $37^{\circ}C$ 5% $CO_2$ 배양기에서 배양한 후 제 7일과 14일에 성장인자 첨가에 따른 CFU-GM 집락 수를 조사하였다. 결 과 : 태아 간의 단핵세포 수는 재태주령 11주에 비해서 19주에서 더 많았으며 세포생존율은 $91.2{\pm}3.4%$였다. $MegaCult^{TM}-C$ kit를 이용하여 12일간 배양시 재태주령 11주의 태아 간이 19주에 비해서 거핵구 집락 수가 많았고, 4례 모두 성장인자의 첨가에 따른 집락증폭의 상승효과는 없었으며 배양 후 형성된 거핵구 집락 수는 태아 간, 특발성 혈소판 감소성 자반증 환아의 골수, 범혈구 감소증 환아의 골수 순이었다. 거핵구 집락 중 순수집락 수는 태아 간이 특발성 혈소판 감소성 자반증 및 범혈구 감소증 환아의 골수에 비해서 유의하게 높았으며, 순수집락 중 large CFU-Mk의 비율은 태아 간이 특발성 혈소판 감소성 자반증 및 범혈구 감소증 환아의 골수에 비해서 높았으나 유의성은 보이지 않았다. 태아 간 단핵세포를 5일간 flask 배양한 후 CD34 양성세포의 발현율은 증가하였으나 성장인자의 첨가에 따른 집락증폭의 상승효과는 TPO 투여군에서만 있었고, CD41 양성세포의 발현율 역시 배양 후 증가하였으나 성장인자 첨가군에 비해서 대조군의 발현율이 너무 높은 결과를 보였다. Methylcellulose 배지를 이용한 단핵세포 배양에서 CFU-GM 집락 수는 태아 간의 경우 배양 7일에 비하여 14일에 감소하였고, 성장인자의 첨가에 따른 집락증폭의 상승효과는 태아 간에서는 모든 군에서 보였으나 특발성 혈소판 감소성 자반증에서는 GM-CSF 투여군에서만 있었으며 범혈구 감소증 환아의 골수에서는 없었다. 결 론: $MegaCult^{TM}-C$ 배지를 이용하여 태아 간세포를 배양하고 면역조직학적 염색으로 거핵구 집락형성을 성공적으로 관찰하였으며, 태아 간에서 얻은 거핵구 집락이 특발성 혈소판 감소성 자반증 및 범혈구 감소증 환아의 골수에서 얻은 집락에 비하여 집락수나 순수집락의 분포, 집락의 크기 등에서 우수한 것으로 나타났으나 태아 간 조혈모세포 이식의 실제적인 임상적용을 위해서는 체계적인 더 많은 연구가 필요할 것으로 생각된다.

• Clinical and Experimental Pediatrics
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• 제48권8호
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• pp.894-900
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• 2005

목 적 : 조직적합 항원의 불일치로 인하여 골수이식을 할 수 없는 경우에 점점 더 제대혈이 사용되고 있다. 그러나 제대혈의 조혈모세포의 수가 적기 때문에 이를 증가시킬 대책이 필요한 바, 여러 성장인자를 조합하여 체외증폭하여 말초혈의 체외증폭과 비교하였다. 방 법 : 저자들은 제대혈 및 말초혈로부터 분리한 CD34+ 세포를 혈청이 아닌 배양체에서 체외 증폭하여 비교하였다. Miltenyi 방법으로 분리한 CD34+는 조혈성장인자들과 함께 체외 증폭 시켰다. 증폭 당일, 4일 후, 7일 후 및 14일에 증폭된 세포를 가지고 burst-forming units of erythrocytes (BFU-E), colony-forming units of granulocytes and monocytes (CFU-GM) 및 colony-forming units of megakaryocytes (CFU-Mk)의 생성 능력을 알아보았다. 결 과 : 말초혈에 비하여 제대혈로부터 분리한 CD34+ 세포의 증폭 능력이 2배로 컸다. 체외에서7일 및 14일 동안 증폭된 제대혈이 더 많은 BFU-E를 생성하였고, 4일 및 7일 동안 증폭된 제대혈이 더 많은 CFU-Mk를 생성하였다. 결 론 : MGDF, FL 및 IL-3를 포함한 성장인자의 자극 하에서 제대혈의 체외 증폭이 더 많은 BFU-E 및 CFU-Mk를 생성하였으므로, 이를 이용한 체외 증폭을 시도하는 것의 가능성을 시사하고 있다.

• 대한방사선기술학회지:방사선기술과학
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• 제33권3호
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• pp.185-192
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• 2010

거대핵세포(megakaryocyte)에서 유래된 혈소판은 백혈구와 더불어 방사선에 민감하여 가장 먼저 감소하므로 방사선장해의 지표로 활용된다. 따라서 혈소판이 부족하게 되면 점상출혈(dot hemorrhage)이 계속되고 혈구 수의 감소와 면역기능 저하로 이어진다. 특히, 전신조사(whole body irradiation)로 4~6 Gy를 받을 경우, 3주 후 혈소판이 최하로 감소되어 출혈과 빈혈에 의한 조혈기계 장해의 사망원인이 된다. 따라서 본 연구는 혈소판 장해의 메카니즘을 밝히고 방어효과를 알아보고자 하였다. 실험에 사용한 방어물질은 마늘 성분의 알리인(Alliin)을 사용하였으며, rat의 꼬리 정맥에 투여한 후 전자현미경(TEM)으로 관찰하였다. 연구 결과, 5 Gy 방사선조사(Irradiation) 후 10일 경과된 혈소판 조직에서는 세포막이 심하게 손상되어 풍선모양으로 부풀어 올랐으며, 당질층(glycocalyx)이 비후되었다. 조사 후 20일 경과된 혈소판에서는 소기관들의 형태를 알아볼 수 없을 정도로 손상되었으며, 세포질의 내용물이 간질부위로 유출되어 손상이 매우 심하였다. 또한 과립들의 형태도 관찰되지 않았다. 30일 경과된 혈소판에서는 가운데 부분에서 공포(vacuole)가 생기고 조직의 손상이 관찰되었다. 하지만 Alliin을 정맥 투여한 실험군에서는 과립(granules)들의 형태가 대조군과 같이 일정하게 유지되고 있었으며, 세포막의 손상도 확인되지 않았다. 따라서 Alliin의 혈관투여시 혈소판의 방사선방어 효과를 확인할 수 있었다.

• BMB Reports
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• 제48권12호
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• pp.691-695
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• 2015

We report that phytosphingosine, a sphingolipid found in many organisms and implicated in cellular signaling, promotes megakaryocytic differentiation of myeloid leukemia cells. Specifically, phytosphingosine induced several hallmark changes associated with megakaryopoiesis from K562 and HEL cells including cell cycle arrest, cell size increase and polyploidization. We also confirmed that cell type specific markers of megakaryocytes, CD41a and CD42b are induced by phytosphingosine. Phospholipids with highly similar structures were unable to induce similar changes, indicating that the activity of phytosphingosine is highly specific. Although phytosphingosine is known to activate p38 mitogen-activated protein kinase (MAPK)-mediated apoptosis, the signaling mechanisms involved in megakaryopoiesis appear to be distinct. In sum, we present another model for dissecting molecular details of megakaryocytic differentiation which in large part remains obscure.