The morphometric truss characteristics and classical dimensions of the marine medaka, Oryzias dancena, that might distinguish diploid and triploid fish were examined. Significant differences in all the classical and truss dimensions of the diploid and triploid fish were observed in both sexes (p<0.01). All the dimensions of the triploid fish were greater than those of the diploid fish. The triploid marine medaka shows sexual dimorphism in these characters, and the sexual dimorphism of the triploid marine medaka is similar to that of the diploid marine medaka. Thus, when their classical dimension and truss dimension was measured, the growth of triploid marine medaka is faster than that of the diploid fish, and it displays clear sexual dimorphism, with male fish having longer dorsal and anal fins than female fish.
The sectioned-body morphometric characteristics of the diploid and triploid marine medaka, Oryzias dancena, of both sexes were examined to collect basic data on the significant differences between the diploid and triploid fish. Significant differences between the diploid and triploid fish in both sexes were observed in the body circumference anterior to the base of the pelvic fin, the body circumference anterior to the base of the anal fin, the body circumference anterior to the base of the dorsal fin, the area anterior to the base of the pelvic fin, the area anterior to the base of the anal fin, the area anterior to the base of the dorsal fin, the total height anterior to the base of the pelvic fin, the total height anterior to the base of the anal fin, the height anterior to the base of the pelvic fin, the height anterior to the base of the anal fin, the width anterior to the base of the anal fin, the belly thickness II anterior to the base of the anal fin, section shape 2-1, and section shape 4-1 (p<0.05). These measurements were greater in the triploid marine medaka of both sexes than those in the diploid marine medaka of both sexes, and they were also greater in the male diploid and triploid marine medaka than those in the corresponding female fish. Therefore, the sectioned-body morphometric dimensions were greater in the triploid males than those in the triploid females and the diploid fish in this study.
This investigation was intended to find out the estrogenic effect of chlortetracycline (CTC) on vitellogenin induction in adult male Japanese medaka (Oryzias latipes). Vitellogenin (Vtg) produced in male fish has been used to as one of a biomarker of endocrine disrupters. The positive control was $17{\beta}-estradiol$ (E2) that induced Vtg in male fish. As a result, male and female fish were exposed to 0.1, 1, 10 and 100 ppm of CTC. Western blot results showed approximately 205 kDa, that is similar to myosin at high molecular weight range Sigma maker. Vtg band was showed fainted to 10 and 100ppm for chlortetracycline. Vtg concentration of CTC was qunatified by total protein quantification and ELISA. Exposure of the male fish to CTC of 0.1, 1, 10 and 100 ppm produced Vtg concentrations of 0.24, 0.12, 7.61 and 40.02%o, respectively, that value was elevated than control male fish (0.14%o). CTC exerted as a Vtg inducer in male fish from 10 ppm, but it was a reducer in female fish from 0.1 ppm level. The results say that vitellogenin induction patterns alter in male medaka treated with CTC, and that CTC may caused endocrine disruption in fish.
The study was designed to determine the estrogenic effect of some penicillins on endocrine function in adult Japanese medaka (Oryzias latipes). Vitellogenin (Vtg) produced in male fish has been used for a biomarker to study endocrine disrupters. $17\beta-estradiol\;(E_2)$ was used a positive control that was induced Vtg in male fish. Result of total protein qantification and ELISA for female and male fish were exposed to $17\beta-estradiol$ 10ng/ml for $3\sim5$ days. As a result, male fish exposed to amoxicillin respectively appeared 0.75, 0.23, 8.21 and $9.36\%_{\circ}$ of 1, 10, 100 and 1000 ppm respectively, that value was elevated compared with control male fish. Male fish exposed to ampicillin respectively appeared 1.85, 4.68, 0.85 and $39.59\%_{\circ}$ of 1, 10, 100 and 1000 ppm respectively, that value was elevated compared with control male fish. This study is one of the first reports suggesting potential endocrine disruption of some penicillins in aquatic ecosystem. These results suggest that vitellogenin and estrogen receptor induction patterns alter in male medaka treated with selected estrogenic compounds, and that these results may be useful molecular biomarkers for screening estrogenic EDCs (endocrine-disrupting chemicals) in the shortest possible time.
Fluoranthene, a common polycyclicaromatic hydrocarbon (PAH), exhibits phototoxicity which may affect aquatic organisms. The eventual goal of this study is to develop a biomarker of Japanese medaka (Oryzias latipes) used in monitoring hazardous chemicals in the ecosystem. In this study we investigated neural toxicity of fluoranthene in Japanese medaka (Oryzias latipes) along with comparative analysis of corresponding behavioral response. The untreated individuals shooed normal behavioral characteristics (i. e., smooth and linear movements). The treated fish, however, showed stopping and abrupt change of orientation (100 ppb), and severely reduced locomotive activity and enhanced surfacing activity (1,000 ppb). Treatment of the medaka fish with fluoranthene caused a significant suppresson of acetycholine esterase (AChE) activities in the body portion but not in the head portion. When fish were exposed to 1,000 ppb of fluoranthene for 24 hr, the body AChE activities decreased from 126.${\pm}$31.89 (nmoles substrate hydrolyzed per min per mg protein) to 49.51${\pm}$11.99. Expressions of tyrosine hydroxylase (TH) protein in the different organs from both head and body portions were comparatively analyzed using an immunohistochemical technique. Five organs of the medaka fish showing a strong TH protein expression were the olfactory bulb, hypothalamus, optic lobe, pons and myelencephalon regions. This study provides molecular and neurobehavioral bases of a biomonitoring system for toxic chemicals using fish as a model organism.
Proceedings of the Korea Society of Environmental Toocicology Conference
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2003.10a
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pp.173-173
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2003
With the introduction of DNA microarrays, a high throughput analysis of gene expression is now possible as a replacement to the traditional time-consuming Southern-blot analysis. This cDNA microarray should be ahighly favored technology in the area of molecular toxicology or analysis of environmental stresses.In this study, therefore, we developed a novel cDNA microarray for analyzing stress-specific responses in japanese Medaka fish. In the design and fabrication of this stress specific functional cDNA microarray, 123 different genes in Medaka fish were selected from eighteen different stress responsive groups and spotted on a 25${\times}$75 mm glass surface. After exposure of the fish to bisphenol A which is the one of the well-known endocrine disrupting chemicals (EDCs), over 1 or 10 days, the responses of the DNA chip were found to show distinct expression patterns according to the mode of toxic actions from environmental toxicants. As a results, they showed specific gene expression pattern to bisphenol A, additionally, the chemical spesific biomarkers could be suggested based on the chip analysis data. Therefore, this chip can be used to monitor stress responses of unknown and/or known toxic chemicals using Medaka fish and may be used for the further development of biomarkers by utilizing the gene expression patterns for known contaminants.
The phylogeny and geography of the medaka (Oryzias latipes) populations of Korea were investigated by analyzing sequence data for the mitochondrial control region. From the 41 haplotypes including 25 Korean haplotypes detected in 64 Korean specimens and data for the Japanese and Chinese populations, phylogenetic and nested clade analyses were executed to examine the phylogeny of haplogroups and the relation of the genetic architecture of the haplotypes to the historical geography of the Korean medaka fish. The analyses suggest that there are two very distinct lineages of Korean medaka, and that these result from reproductive isolation mechanisms due to geographic barriers. The southeastern lineage has experienced recent range expansion to the western region. The northwestern lineage, sister to Chinese populations, showed evidence of internal range expansion with shared haplotypes.
Differential gene expression profiling was carried out in the hepatic tissue of medaka fish, Oryzias latipes, after exposure to an organophosphorus pesticide (OPP), Iprobenfos (IBP), a widely used pesticide in agri- and fish-culture, using a medaka cDNA micro array. Twenty six kinds of differentially expressed candidate genes, with 15 and 11 induced and repressed in their gene expressions, respectively, were associated with cytoskeleton (3.8%), development (7.7%), immune (7.7%), metabolism (30.8%), nucleic acid/protein binding (42.3%) and reproduction (7.7%). Of these genes, changes at the transcription level of five were re-evaluated by real-time quantitative PCR (qRT-PCR). Considering the known function of authentic genes, the effects of IBP on the biological activity and pathological aspects in medaka fish were discussed. The identified genes could be used as molecular biomarkers for biological responses to OPPs contamination in an aquatic environment.
Growth hormone (GH) is known as one of the main osmoregulators in euryhaline teleosts during seawater (SW) adaptation. Many of the physiological actions of GH are mediated through insulin-like growth factor-I (IGF-I), and the GH/IGF-I axis is associated with osmoregulation of fish during SW acclimation. However, little information is available on the response of fish IGF-II to hyperosmotic stress. Here we present the first cloned IGF-I and IGF-II cDNAs of marine medaka, Oryzias dancena, and an analysis of the molecular characteristics of the genes. The marine medaka IGF-I cDNA is 1,340 bp long with a 257-bp 5' untranslated region (UTR), a 528 bp 3' UTR, and a 555-bp open reading frame (ORF) encoding a propeptide of 184 amino acid (aa) residues. The full-length marine medaka IGF-II cDNA consists of a 639 bp ORF encoding 212 aa, a 109 bp 5' UTR, and a 416 bp 3' UTR. Homology comparison of the deduced aa sequences with other IGF-Is and IGF-IIs showed that these genes in marine medaka shared high structural homology with orthologs from other teleost as well as mammalian species, suggesting high conservation of IGFs throughout vertebrates. The IGF-I mRNA level increased following transfer of marine medaka from freshwater (FW) to SW, and the expression level was higher than that of the control group, which was maintained in FW. This significantly elevated IGF-I level was maintained throughout the experiment (14 days), suggesting that in marine medaka, IGF-I is deeply involved in the adaptation to abrupt salinity change. In contrast to IGF-I, the increased level of marine medaka IGF-II mRNA was only maintained for a short period, and quickly returned a level similar to that of the control group, suggesting that marine medaka IGF-II might be a gene that responds to acute stress or one that produces a supplemental protein to assist with the osmoregulatory function of IGF-I during an early phase of salinity change.
Lee, Dongwook;Kim, Min Sung;Nam, Yoon Kwon;Kim, Dong Soo;Gong, Seung Pyo
Fisheries and Aquatic Sciences
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v.16
no.3
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pp.177-185
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2013
The development of species-specific fish cell lines has become a valuable tool for biological research. In recent years, marine medaka Oryzias dancena has been recognized as a good experimental model fish but there are no reports of establishment of cell lines from this fish. In this study, two cell lines from O. dancena blastula embryos were established from 41 total trials (4.9%). The two cell lines displayed typical in vitro morphology and have been cultured for >121 passages, which corresponds to 293 days. The doubling times of the cell lines were 29.84 and 28.59 h, respectively, and both possessed the potential to expand in a clonal manner, albeit with significant differences between the two cell lines. The absence of any of the four main medium supplements; i.e., fish serum, fetal bovine serum, basic fibroblast growth factor, and medaka embryo extract, significantly inhibited growth. The proportion of cells possessing normal chromosome number was 45% and 46.7% of the cell lines, respectively. Taken together, two cell lines that proliferate continuously were established from marine medaka and these cell lines may provide a basic tool for characterizing the unique features of this fish species.
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