Studies on the production of cell-wall bound innerpolysaccharides (IPS) (soluble ${\beta}$-D-glucan) have been performed by use of suspended myelial cultures of Inonotus obliquus. This product has promising potentials as an effective antidiabetic as well as an immunostimulating agents. As a first step to enhanced production of IPS, Intensive strain improvement programs were carried out by obtaining a large amounts of protoplasts for the isolation of single cell colonies. Rapid and large screening of high-yielding producers was possible because about fivefold higher amount of protoplasts ($2.3{\times}10^6$ protoplasts/mL) could be recovered with relatively high regeneration rates of $10^{-2}{\sim}10^{-3}$ by applying a modified filtration method, as compared to the previously used trapping method. A basic protocol necessary for UV-mutation of the protoplasts was also developed, resulting in several overproducing variants with good fermentation properties. Since the amount of IPS extracted from the mycelial cell walls of I. obliquus turned out to be almost constant per g DCW, increase in cell mass was considered the most important factor for the enhancement in IPS production. Therefore, attempts were made to screen mutant cells showing rapid mycelial growth rate in the final suspended cultures. Notably, the mutant strains showing an active cellgrowth in the preceding solid growth cultures were observed to produce higher amount of IPS in the suspended fermentations as well. A striking mutant, OBLQ756-15-5 strain, obtained from the survivors of a harsh UV-treated condition (97% death rate) was found to stably produce as high cell mass as 22 g DCW/L in the final fermentations. Currently, this strain is being tested for development of a scaled-up fermentation process for mass production of IPS.
Ribeiro, R.D.X.;Oliveira, Ronaldo Lopes;Macome, F.M.;Bagaldo, A.R.;Silva, M.C.A.;Ribeiro, C.V.D.M.;Carvalho, G.G.P.;Lanna, D.P.D.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.24
no.10
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pp.1399-1406
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2011
This study aimed to establish the optimum level of palm kernel meal in the diet of Santa Ines lambs based on the sensorial characteristics and fatty acid profile of the meat. We used 32 lambs with a starting age of 4 to 6 months and mean weight of $22{\pm}2.75kg$, kept in individual stalls. The animals were fed with Tifton-85 hay and a concentrate mixed with 0.0, 6.5, 13.0 or 19.5% of palm kernel meal based on the dry mass of the complete diet. These levels formed the treatments. Confinement lasted 80 days and on the last day the animals were fasted and slaughtered. After slaughter, carcasses were weighed and sectioned longitudinally, along the median line, into two antimeres. Half-carcasses were then sliced between the 12th and 13th ribs to collect the loin (longissimus dorsi), which was used to determine the sensorial characteristics and fatty acid profile of the meat. For sensorial evaluation, samples of meat were given to 54 judges who evaluated the tenderness, juiciness, appearance, aroma and flavor of the meat using a hedonic scale. Fatty acids were determined by gas chromatography. The addition of palm kernel meal to the diet had no effect on the sensorial characteristics of meat juiciness, appearance, aroma or flavor. However, tenderness showed a quadratic relationship with the addition of the meal to the diet. The concentration of fatty acids C12:0, C14:0 and C16:0 increased with the addition of palm kernel meal, as did the sum of medium-chain fatty acids and the atherogenicity index. Up to of 19.5% of the diet of Santa Ines lambs can be made up of palm kernel meal without causing significant changes in sensorial characteristics. However, the fatty acid profile of the meat was altered.
The brown planthopper (BPH), Nilaparuata lugens, is the major pest 01 nce in Asla. Cument control tactics rely pnmalily on chemical ~nsecticides and resistant nce varieties In Korea, the most important biolog~cal conb-ol agent appears to be the naturally-occuning, mermlthid nematode, Agarnermrs unka. Although parasitism of BPH is highly variable from place to place and from year to year. the rnermithid is a promising biological control agent because it reduces the fecundity of the host and ultimately causes its death. The memithid has only one generation per year compared to the three to four generations of BPH, but the mermithid lemales stagger their egg production so that many individuals in all BPH generations are parastized. Augmentation of this rnermithld into BPH populations is only psslble on a limited scale because it is an obligate parasite and mass production technology has yet to be developed. Conservation of naturally-occumng populations through cultural techniques and the use of compatible resistant rice varieties and chemical insecticides may lead to an effective integrated pest management program for BPH.
A glycosyltransferase, YjiC, from Bacillus licheniformis has been used for the modification of the commercially available isoflavonoids genistein, daidzein, biochanin A and formononetin. The in vitro glycosylation reaction, using UDP-${\alpha}$-D-glucose as a donor for the glucose moiety and aforementioned four acceptor molecules, showed the prominent glycosylation at 4' and 7 hydroxyl groups, but not at the $5^{th}$ hydroxyl group of the A-ring, resulting in the production of genistein 4'-O-${\beta}$-D-glucoside, genistein 7-O-${\beta}$-D-glucoside (genistin), genistein 4',7-O-${\beta}$-D-diglucoside, biochanin A-7-O-${\beta}$-D-glucoside (sissotrin), daidzein 4'-O-${\beta}$-D-glucoside, daidzein 7-O-${\beta}$-D-glucoside (daidzin), daidzein 4', 7-O-${\beta}$-D-diglucoside, and formononetin 7-O-${\beta}$-D-glucoside (ononin). The structures of all the products were elucidated using high performance liquid chromatography-photo diode array and high resolution quadrupole time-of-flight electrospray ionization mass spectrometry (HR QTOF-ESI/MS) analysis, and were compared with commercially available standard compounds. Significantly higher bioconversion rates of all four isoflavonoids was observed in both in vitro as well as in vivo bioconversion reactions. The in vivo fermentation of the isoflavonoids by applying engineered E. coli $BL21(DE3)/{\Delta}pgi{\Delta}zwf{\Delta}ushA$ overexpressing phosphoglucomutase (pgm) and glucose 1-phosphate uridyltransferase (galU), along with YjiC, found more than 60% average conversion of $200{\mu}M$ of supplemented isoflavonoids, without any additional UDP-${\alpha}$-D-glucose added in fermentation medium, which could be very beneficial to large scale industrial production of isoflavonoid glucosides.
Over the past several years, research efforts have been directed both at economically producing valuable substances from the wood biomass and at producing lignolytic enzymes at a lower cost. In the present study, we found that Phellinus igniarius, the basidiomycetes, secreted lignin peroxidase as a main lignolytic enzyme, which was detected maximum activity at 16th day of culture and showed 37 kDa of molecular mass in identification by activity assay and purification by anion-exchange chromatography. The Phellinus igniarius-derived lignin peroxidase hydrolyzed steam-exploded wood (Quercus mongolica) powder into small molecules showing cytotoxicity against cancer cel1s (HepG2 hepatoma, SK-N-SH neuroblastoma, B16 melanoma, MBT-2 bladder cancer). In addition, the enzyme hydrlysates of lignins (ELg) that were extracted from the steam-exploded oak showed more potent cytotoxic effects on the cancer cells than the enzyme hydrolysates of wood biomass (EWp), indicating that the cytotoxic effect of EWp may be due to the enzyme-degraded products of lignin among the lignocellulosics. Furthermore, the cytotoxic effect of ELg on Chang, normal liver cells, was much less potent than that of ELg on HepG2 and B16 cancer cells, indicating that the cytotoxic effect of ELg may be specific for cancer cells. The present results suggest that Phellinus igniarius may be a useful resource for the large-scale production of lignin peroxidase and that the lignin peroxidase may be applied for the generation of valuable biodegradation products from wood lignocellulosics for medical use.
The Journal of the Korea institute of electronic communication sciences
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v.15
no.2
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pp.225-230
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2020
The development of the industrial revolution can confirm the paradigm of manufacturing is changing from the mass production of small varieties to the form of small-scale production of many varieties. That is a form that can reduce the burden of indiscriminate raising of producers and a change in the industrial form that seeks to make up for the problems of the productivity portion that should change as modern society develops. Looking at the 3D printing environment, there are many problems in reaching the final stage of printing. The problem is not just the low-cost, low-end 3D Pirnter, but the high-priced 3D Printers released as finished products also show the same symptoms. This can cause anxiety factors in the printing process. Therefore, the research was conducted to compensate such problems. Based on the research, we propose the design of IoT beacon-based 3D Printer remote safety and quality control system targeting 3D Printer individual users.
Purpose: Bone morphogenetic protein-2(BMP-2) has been shown to possess significant osteoinducitve potential. There have been attempts to overcome a limitation of mass production, and economical efficiency of BMP. The aim of this study was to produce recombinant human BMP-2(rhBMP-2) from E. coli in a large scale and evaluate its biological activity. Materials and Methods: The E.coli strain BL21(DE3) was used as a host for rhBMP-2 production. Dimerized rhBMP-2 was purified by affinity chromatography using Heparin column. To determine the physicochemical properties of the rhBMP-2 expressed in E. coli, we examined the HPLC profile and performed Western blot analysis. The effect of the purified rhBMP-2 dimer on osteoblast differentiation was examined by alkaline phosphatase (ALP) activity and representing morphological change using C2C12 cell. Results: E. coli was genetically engineered to produce rhBMP-2 in a non-active aggregated form. We have established a method which involves refolding and purifying a folded rhBMP-2 dimer from non-active aggregates. The purified rhBMP-2 homodimer was characterized by SDS-PAGE as molecular weight of about 28kDa and eluted at 34% acetonitrile, 13.27 min(retention time) in the HPLC profile and detected at Western blot. The purified rhBMP-2 dimer stimulated ALP activity and induced the transformation from myogenic differentiation to osteogenic differentiation. Conclusion: rhBMP-2 was produced in E. coli using genetic engineering. The purified rhBMP-2 dimer stimulated ALP activity and induced the osteogenic differentiation of C2C12 cells.
Taxol contents in various parts of 15 years old yew tree were determined. The descending order of taxol content per unit mass was stem bark, root bark, needle and seed. In the seed, that order was seed coat, embryo and endosperm. The total amount of taxol extractable from a 15 years old yew tree was 1.68 gram. This amount was distributed in needle, stem bark, root bark and seeds as 48.0, 23.8, 27.9 and 0.4%, respectively. Altitudinal variation of taxol content was also observed. More taxol was observed in yew trees grown at high altitude over 1000m above sea level. Calli and suspension cultures were induced from various yew trees. The presence of taxo] in cultured cells was established bv HPLC. The taxol content in cultured cells were different according to the source of explants. These results may be useful for the goal of large scale taxol production by cultured yew tree cells.
This study aimed to optimize medium composition and culture conditions for enhancing the biomass of Lactobacillus plantarum 200655 using statistical methods. The one-factor-at-a-time (OFAT) method was used to screen the six carbon sources (glucose, sucrose, maltose, fructose, lactose, and galactose) and six nitrogen sources (peptone, tryptone, soytone, yeast extract, beef extract, and malt extract). Based on the OFAT results, six factors were selected for the Plackett-Burman design (PBD) to evaluate whether the variables had significant effects on the biomass. Maltose, yeast extract, and soytone were assessed as critical factors and therefore applied to response surface methodology (RSM). The optimal medium composition by RSM was composed of 31.29 g/l maltose, 30.27 g/l yeast extract, 39.43 g/l soytone, 5 g/l sodium acetate, 2 g/l K2HPO4, 1 g/l Tween 80, 0.1 g/l MgSO4·7H2O, and 0.05 g/l MnSO4·H2O, and the maximum biomass was predicted to be 3.951 g/l. Under the optimized medium, the biomass of L. plantarum 200655 was 3.845 g/l, which was similar to the predicted value and 1.58-fold higher than that of the unoptimized medium (2.429 g/l). Furthermore, the biomass increased to 4.505 g/l under optimized cultivation conditions. For lab-scale bioreactor validation, batch fermentation was conducted with a 5-L bioreactor containing 3.5 L of optimized medium. As a result, the highest yield of biomass (5.866 g/l) was obtained after 18 h of incubation at 30℃, pH 6.5, and 200 rpm. In conclusion, mass production by L. plantarum 200655 could be enhanced to obtain higher yields than that in MRS medium
Various steps in the electrode production process, such as slurry mixing, slurry coating, drying, and calendaring, directly affect the quality and, consequently, mechanical properties and electrochemical performance of electrodes. Herein, a new method of slurry coating is developed: Double-coated electrode. Contrary to single-coated electrode, the cathode is prepared by double coating, wherein each coat is of half the total loading mass of the single-coated electrode. Each coat is dried and calendared. It is found that the double-coated electrode possesses more uniform pore distribution and higher electrode density and allows lesser extent of particle segregation than the single-coated electrode. Consequently, the double-coated electrode exhibits higher adhesion strength (74.7 N m-1) than the single-coated electrode (57.8 N m-1). Moreover, the double-coated electrode exhibits lower electric resistance (0.152 Ω cm-2) than the single-coated electrode (0.177 Ω cm-2). Compared to the single-coated electrode, the double-coated electrode displays higher electrochemical performance by exhibiting better rate capability, especially at higher C rates, and higher long-term cycling performance. Despite its simplicity, the proposed method allows effective electrode preparation by facilitating high electrochemical performance and is applicable for the large-scale production of high-energy-density electrodes.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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